１﹒３﹒２ 納米氧化銅。采用固相反應合成方法制備，球形，粒徑 １００ ｎｍ，大小均勻，無團聚現象（圖 ２）， 純度 １００ ％， 由山東科技大學提供。

　　１﹒４ 檢測指標與方法

　　１﹒４﹒１ 樣品的采集。采用全收糞法，從飼喂試驗日糧開始，連續 ７ ｄ 收集受試雞的全部排泄物，剔除雜質， 在 ６０-６５ ℃干燥箱中烘 ５-６ ｈ，室內冷卻制成風干樣品，準確稱量各組受試雞的排泄物并粉碎， 用樣品袋封裝、標號， 保存備用。

　　１﹒４﹒２ 采食量。采用清箱底的方法， 精確計算 ５ ｄ 內各組受試雞的采食量。

　　１﹒４﹒３ 飼料和糞便中銅、鋅、鐵、錳含量的測定。精確稱取０﹒２５０ ０ ｇ 樣品于 ２５０ ｍｌ 錐形瓶中，加入 ３０ ｍｌ 濃硝酸，置電爐上灰化至黃煙逸盡， 冷卻后加入 １０ ｍｌ高氯酸，加熱至無色，冷卻，加 ５０ ｍｌ 去離子水，置電爐上加熱至沸騰，趕盡二氧化氮，冷卻后定容至 ５０ ｍｌ，在 ＴＡＳ!９９０Ｆ 原子吸收分光光度計（北京普析通用儀器有限公司） 上用火焰法測定銅、鋅、鐵、錳的含量。

　　１﹒４﹒４ 糞便中粗蛋白含量的測定。采用半微量凱氏定氮法。

　　１﹒４﹒５ 蛋白質和微量元素表觀消化率的計算。粗蛋白質表觀消化率 （ ％） ＝（ 飼料采食量×飼料粗蛋白質含量－ 排泄物量×排泄物粗蛋白含量） （／ 飼料采食量×飼料粗蛋白質含量）×１００﹔ 微量元素表觀消化率（ ％） ＝（ 飼料采食量×飼料微量元素含量－ 排泄物量×排泄物微量元素含量） （／ 飼料采食量×飼料微量元素含量） ×１００。

　　１﹒５ 數據處理與分析   銅回收率為９９﹒５７ ％，變異系數為１﹒２５ ％﹔鋅回收率為９９﹒３２％，變異系數為１﹒４１％﹔鐵回收率為９９﹒０２％，變異系數為１﹒６５ ％﹔錳回收率為９９﹒１８ ％，變異系數為１﹒１９％。各數據采用 χ２ 檢驗進行比較。

　　２ 結果與分析

　　２﹒１ 不同形式的銅和銅化合物對飼料中粗蛋白質表觀消化率的影響   試驗結果表明，添加氧化銅、硫酸銅、納米氧化銅和納米銅組蛋白質表觀消化率分別為 ７３﹒８０％、６４﹒８６％、７２﹒８５ ％和 ６８﹒９４ ％，經 χ２ 檢驗， 各組粗蛋白質的表觀消化率差異不顯著（ Ｐ＞０﹒０５）。

　　２﹒２ 不同形式的銅和銅化合物對飼料中銅、鋅、鐵、錳表觀消化率的影響   試驗結果表明，添加硫酸銅、氧化銅、納米氧化銅和納米銅組銅的表觀消化率分別為 ２６﹒８０％、１４﹒０４％、５１﹒２１ ％、４２﹒４９ ％， 經 χ２ 檢驗，納米氧化銅組銅的表觀消化率極顯著高于硫酸銅和氧化銅組（Ｐ＜０﹒０１），與氧化銅組相比，添加納米銅極顯著提高銅的表觀消化率（Ｐ＜０﹒０１），與硫酸銅組相比，納米銅組顯著提高銅表觀消化率（Ｐ＜０﹒０５）﹔鋅的表觀消化率分別為３２﹒４６ ％、４１﹒１１ ％、６７﹒６１ ％、５４﹒２７ ％， 經χ２ 檢驗，納米氧化銅組極顯著高于硫酸銅組（Ｐ＜０﹒０１），顯著高于氧化銅組（Ｐ＜０﹒０５），納米銅組顯著高于硫酸銅組（Ｐ＜０﹒０５），與氧化銅組無顯著差異（Ｐ＞０﹒０５）﹔鐵的表觀消化率分別為６８﹒５８ ％、６６﹒０６ ％、７７﹒５９ ％、５７﹒０５ ％， 經 χ２ 檢驗，納米銅和納米氧化銅組與硫酸銅和氧化銅組差異不顯著 （Ｐ＞０﹒０５）﹔錳的表觀消化率分別為２８﹒１５ ％、１７﹒７９ ％、４３﹒８１ ％和５９﹒３８ ％，經 χ２ 檢驗，納米氧化銅組顯著高于硫酸銅組（ Ｐ＜０﹒０５），極顯著高于氧化銅組（Ｐ＜０﹒０１），納米銅組極顯著高于硫酸銅組（Ｐ＜０﹒０１）和氧化銅組（Ｐ＜０﹒０１） 。

　　３ 討論

　　Ｆｌｏｒｅｎｃｅ 等認為，營養物質的顆粒大小是影響胃腸道對其吸收的一個關鍵因素[９]。Ｊａｎｉ 等報道，小鼠口服３種不同大小的聚苯乙烯微粒 （ ５０、５００ ｎｍ 和 １ μｍ）６ｈ 內，５０ｎｍ 粒子出現在淋巴結中并有最大程度的吸收，口服１８ｈ后５００ｎｍ微粒才在肝、脾中出現， 而 １μｍ粒子只有少量吸收[１０]。

　　Ｄｅｓａｉ 在對小鼠的研究中指出﹕ １００ ｎｍ 粒子比其他大粒子的吸收率高 １０-２５０ 倍[１１]。另據報道，粒徑小于５μｍ的微粒可通過肺， 粒徑小于 ３００ ｎｍ 的微粒可進入血液循環，小于 １００ｎｍ 的微粒能進入骨髓。因此， 納米顆粒更容易通過胃腸黏膜，從而使其生物利用率得以提高[１２]。該試驗結果表明，與硫酸銅、氧化銅相比，在肉雞飼料中添加納米氧化銅和納米銅可顯著提高銅的表觀消化率。這可能是由于納米微粒具有表面效應和小尺寸效應。納米微粒在胃腸道的吸收可以不通過離子交換而直接滲透， 從而提高了吸收的速度和利用率[１３]。納米氧化銅和納米銅的銅表觀消化率提高， 也可能有相同的機制。

　　張婉如等報道， Ｆｅ２＋、Ｚｎ２＋、Ｍｎ２＋與 Ｃｕ２＋競爭蛋白質的結合點，而 Ｃｕ２＋只有與蛋白質相結合才能被吸收，這種競爭是相互的[１４－１６]。該試驗結果顯示，與硫酸銅和氧化銅相比，添加納米氧化銅顯著提高了鋅和錳的表觀消化率。這可能是因為納米氧化銅以納米顆粒的形式吸收，而不是以離子的形式吸收，減弱了 Ｃｕ２＋對 Ｚｎ２＋和 Ｍｎ２＋的拮抗用，使 Ｚｎ２＋和 Ｍｎ２＋更容易與蛋白質結合，從而提高鋅和錳的利用率。這也表明納米氧化銅可以擴散吸收，而非主動吸收，其詳細機制有待進一步研究。

　　（田相迪，朱風華， 孫金全，李曙明，朱連勤）

　　參考文獻略