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甜菜堿的產(chǎn)品分類及測定方法

簡介
甜菜堿(Betaine)是一種能為動物提供高效活性甲基的類維生素的營養(yǎng)添加劑,19世紀最早發(fā)現(xiàn)于歐州,因它主要存在于甜菜的糖蜜中,故而得名。
  甜菜堿(Betaine)是一種能為動物提供高效活性甲基的類維生素的營養(yǎng)添加劑,19世紀最早發(fā)現(xiàn)于歐州,因它主要存在于甜菜的糖蜜中,故而得名。甜菜堿的化學名稱是1-羧基-N,N,N- 三甲基乙內(nèi)脂,分子式為C5H11NO2,化學結構與甘氨酸類似,屬于季胺堿類。

  甜菜堿具有多種功能,作為高效甲基的供體,可以促進動物脂肪代謝,緩和應激,調(diào)節(jié)滲透壓,促進家禽生長,增加體重及產(chǎn)蛋量,穩(wěn)定維生素,預防球蟲病,提高瘦肉率,防止脂肪肝,提高飼料利用率等多種功效。目前,隨著生物制藥技術的不斷進步,在發(fā)酵中添加適量甜菜堿可提供甲基供體,促進菌體生長,從而大大改善藥品的質(zhì)量并降低生產(chǎn)制造成本。甜菜堿也是良好的飼料及食品添加劑。

  目前,市場上甜菜堿的種類很多,根據(jù)生產(chǎn)工藝不同分為天然甜菜堿、化工合成甜菜堿及其制劑。化學合成甜菜堿根據(jù)分子結構不同可分為甜菜堿和甜菜堿鹽酸鹽;按產(chǎn)品功能和生產(chǎn)工藝上可分為復合甜菜堿和吸附甜菜堿。甜菜堿純品為白色晶體,有甜味和特殊的蛋白質(zhì)味,易潮解;甜菜堿屬無毒物質(zhì),其外觀因載體和生產(chǎn)工藝不同而有所差異。以下就幾種不同類型甜菜堿品質(zhì)控制要點和甜菜堿含量的檢測方法分別進行介紹和探討。

  1 不同形式甜菜堿產(chǎn)品的控制要點

  1.1 天然甜菜堿

  天然甜菜堿取自于甜菜制糖廢液,一般是用離子交換提取和離子排斥提取分離加工而成。按GB/T 21515-2008《飼料添加劑 天然甜菜堿》規(guī)定的技術指標進行檢測和品控制即可達到產(chǎn)品質(zhì)量的要求。

  1.2 化工合成甜菜堿

  1.2.1 甜菜堿、復合甜菜堿、吸附甜菜堿

  化工合成甜菜堿是用三甲胺與氯乙酸鈉進行反應,然后用適當?shù)姆椒▽⑵浞蛛x從而得到甜菜堿產(chǎn)品。復合甜菜堿和吸附甜菜堿從生產(chǎn)工藝上均屬于化工合成甜菜堿,是與促甲基轉(zhuǎn)化物質(zhì)、營養(yǎng)增強劑、載體吸附或復合而成不同含量和劑型的產(chǎn)品。

  化工合成甜菜堿及其制劑還未見相關產(chǎn)品標準出現(xiàn),多以生產(chǎn)企業(yè)標準為主。含量測定推薦采用NY/T 1619-2008《飼料中甜菜堿的測定 離子色譜法》,后于2009年12月1日升級為 GB/T 23710-2009《飼料中甜菜堿的測定 離子色譜法》進行檢測。此外,含量標準的細節(jié)也應寫明,含量應大于標簽標準所規(guī)定的含量,合同中如約定含量允許一定的檢測誤差,則最大誤差應不大于測定方法允許誤差的兩倍。

  2.4 重量法

  在一定酸度(pH 2.0~6.5)溶液中, 甜菜堿和四苯硼鈉生成白色沉淀, 根據(jù)生成沉淀的量計算甜菜堿的含量。

  此法重現(xiàn)性好,具有一定鑒別含氮化合物的能力,但不能排除其他可能的干擾物如氨基酸、六次甲基四胺,并且實驗操作比較復雜,需注意四苯硼鈉試劑的低溫貯存、澄清度的處理等影響。

  2.5 薄層掃描定量法

  用0.5%羧甲基纖維素鈉的硅膠G薄層板,以氯仿-甲醇-甲酸-水為展開劑,以改良碘化鉍溶液為顯色劑,掃描波長為520nm,以甜菜堿含量進行測定。

  由于操作中難以保持展開溫度、展開劑極性及蒸氣壓等諸多條件的恒定,該法重現(xiàn)性并不是很理想。

  2.6 凱氏定氮法

  用凱氏定氮法測定樣品中的氮,通過甜菜堿和氮含量的換算公式得到甜菜堿的量。一般可做兩個測定①檢測正常情況下的三甲胺和甜菜堿之和:水提取液消解,加堿蒸餾測定總N。②檢測正常情況下反映三甲胺的量:直接堿蒸餾測定氨態(tài)氮和一、二、三級胺。

  此法可減少空氣污染對操作人員健康的危害,也可排除環(huán)境溫度、濕度的變化對高氯酸非水滴定法的影響。能排除氯離子對檢測的干擾,具有一定的鑒別能力。但在檢測純品時檢測誤差比高氯酸滴定法高,并且不能排除含氮物質(zhì)的干擾。

  2.7 高氯酸滴定法

  《獸藥質(zhì)量標準 2003》中《鹽酸甜菜堿》、NY 399-2000、GB/T 21515-2008分別是甜菜堿鹽酸鹽和甜菜堿產(chǎn)品質(zhì)量標準,含量檢測采用高氯酸非水滴定法。該法是利用甜菜堿鹽酸鹽為季胺鹽類化合物,用冰醋酸為溶媒,與乙酸汞可形成難電離的氯化汞,并形成季銨醋酸鹽而具有明顯的堿性,以結晶紫為指示劑,用高氯酸進行非水滴定。因市售的冰醋酸含有少量水分,為避免水分存在對滴定的影響,GB/T 21515 -2008反應條件中還加入一定量的乙酸酐,使其與水反應變成醋酸,有效確保在非水溶劑中進行滴定分析,確保了結果準確性。

  優(yōu)點:①對于純品的甜菜堿、甜菜堿鹽酸鹽用該法檢測準確、可靠。具有重現(xiàn)性好、精度高的優(yōu)點。②可利用此法確定甜菜堿標準品的真實含量。

  缺點:①該法采用結晶紫指示劑,終點顏色變化不明顯,較難判定終點;②采用的高氯酸和冰醋酸有很強的腐蝕性;③高氯酸標準溶液放置過久會變成黃色,對化驗室外部環(huán)境控制要求較高,受環(huán)境溫度、濕度影響較大,要經(jīng)常配制、標定。④利用此法進行檢測只要樣品中具有堿性基團的化合物如胺類、氨基酸類、含氮雜環(huán)化合物、某些有機堿的鹽及弱酸鹽、鈉離子等,都會影響高氯酸非水滴定法檢測的準確性。不適用于甜菜堿預混劑、復合甜菜堿的檢測。

  2.8 離子色譜法

  離子色譜法是20世紀70年代以來發(fā)展起來的一種分析離子的液相色譜法,甜菜堿及其鹽酸鹽屬于有機堿,在弱酸性陽離子交換柱上可以分離,而且可以與許多干擾物質(zhì)分離開,從而科學、準確的測定飼料中的甜菜堿。

  現(xiàn)在使用離子色譜法檢測甜菜堿的含量的產(chǎn)品標準有GB/T 21515-2008,檢測標準有NY/T 1619-2008、GB/T 23710-2009。于2009年12月1日正式實施的GB/T 23710-2009,除了適用范圍、標準品含量及試劑的配制上描述更加準確外,操作方法上與NY/T 1619-2008中離子色譜含量檢測基本一致,屬于從農(nóng)業(yè)行業(yè)標準轉(zhuǎn)化為國家推薦標準。GB/T 21515-2008中含量檢測使用的仲裁法和GB/T 23710-2009的檢測方法都使用離子色譜法。但前者適用于從糖蜜廢液中提取加工而成的天然甜菜堿產(chǎn)品;后者適用于配合飼料、濃縮飼料、預混合飼料、飼料添加劑甜菜堿及其鹽酸鹽、復合甜菜堿及其鹽酸鹽含量的測定,后者涵蓋范圍更廣。

  用離子色譜進行檢測時需注意對色譜儀、色譜柱和抑制器的維護,關注標準溶液的保存期,注意峰面積的變化。用離子色譜法測定時誤差較大,如果譜圖無誤,可用凱氏定氮法進行對比。離子色譜法的檢出限量均為0.02%。標準GB/T 23710-2009對樣品前處理方法和儀器分析條件進行了系統(tǒng)的優(yōu)化,實驗室檢測時也發(fā)現(xiàn):含量小于0.02%時,樣品峰小于3倍噪音量,且測定回收率超差,平行樣品測定結果偏差大。而含量大于0.02%時,可以得到較好的回收率及較小的變異。該法準確、快速、再現(xiàn)性高、可連續(xù)進樣,能滿足大量樣本進行分析時快速檢測的要求。

  此外氣相層析法、質(zhì)譜法等微量測定方法識假能力強,定性準確性高,也能同時定量。但儀器價格昂貴,操作要求高,檢測誤差大。

  目前,GB/T 23710-2009作為國家標準化管理委員會最新頒布的仲裁執(zhí)行標準,實驗操作簡單、抗干擾能力強,并能同時測定甜菜堿中鈉離子、鎂離子、鈣離子、游離銨和三甲胺的含量,這無論是對控制甜菜堿產(chǎn)品質(zhì)量還是為飼料養(yǎng)殖企業(yè)提供科學配方,都具有十分重要的指導作用。雖然GB/T 23710-2009已經(jīng)涵蓋了所有甜菜堿系列的產(chǎn)品含量檢測,但由于離子色譜價格較高、維護成本較高、檢測誤差比高氯酸滴定法高等缺點,離子色譜法在飼料企業(yè)不易普及。故檢測甜菜堿時,如確定為純品的甜菜堿,可選擇高氯酸非水滴定法,也可根據(jù)實驗室條件和測定要求選擇適當?shù)姆椒ǎ瑥亩行Т_保甜菜堿及其制劑的質(zhì)量。


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