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氨基酸類飼料添加劑— L-組氨酸

簡介
天然的組氨酸為無色針狀或片狀結(jié)晶,味甜,無臭,對空氣敏感。在277℃時軟化,287℃時分解,熔點為282℃。
  【別 名】L-組氨酸;L-a-氨基-β-4-咪唑基丙酸

  【化學(xué)名】L-a-氨基-β-4-咪唑基丙酸

  【商品名】組氨酸

  【英文名】L-Histdine;L-a-Amino-1H-imidazole-4-propanoic acid

  【分子式】C6H9N3O2

  【結(jié)構(gòu)式】

  【分子量】155.16

  【CAS號】71-00-1

  【MDL號】MFCD00064315

  【性 狀】天然的組氨酸為無色針狀或片狀結(jié)晶,味甜,無臭,對空氣敏感。在277℃時軟化,287℃時分解,熔點為282℃。易溶于水,25℃時水中溶解度為41.9g/L,極微溶于乙醇,不溶于乙醚、丙酮。旋光度為-39.4°(c=1.13,水中)。

  【制 法】目前國內(nèi)L-組氨酸的制備方法主要有以下二種方法:

  1. 從豬血、牛血中提取L-組氨酸。豬血(或牛血)經(jīng)噴霧干燥制得血粉,豬血粉水解后趕氨,趕氨液脫色,經(jīng)飽和樹脂過濾即得組氨酸收集液。

  2. 從脫脂大豆的水解產(chǎn)物中提取L-組氨酸。但此方法的成本比較高,國內(nèi)一般不太常用。

  L-組氨酸的精制可分為水結(jié)晶法和樹脂分離法。

  (1)水結(jié)晶法

  由于組氨酸和組胺類物質(zhì)均易溶于水中,不易溶于乙醇,故采用飽和水溶液結(jié)晶即可將兩者分離。將粗組氨酸鹽酸鹽加熱溶于去離子水,再移至冷水浴中,不斷攪拌,趁熱用鹽酸調(diào)節(jié)pH值為2.5,立即加入2倍溶液量的乙醇,靜置,沉淀,過濾,即得L-組氨酸粗品,經(jīng)脫色、重結(jié)晶、干燥得L-組氨酸成品。

  (2)樹脂分離法

  L-組氨酸最常用的提取方法是將胱氨酸生產(chǎn)中中和段產(chǎn)物通入濃縮罐內(nèi),通入蒸汽,在溫度為120℃,氣壓為-0.09 Mpa,濃縮6小時,結(jié)晶,過濾。 將結(jié)晶液注入脫色罐,投入活性炭和純水,在溫度為70℃條件下,脫色2小時,并將過濾溶液注入陽離子交換柱內(nèi),流速500L/h,上柱量為50kg/柱,上柱完畢后,定量水洗,純水用量是柱體積的一倍,水洗后溶液用0.1mol/L氨水洗脫并收集至第二柱流出液有組氨酸的Pauly反應(yīng)時終止。

  組氨酸收集液用高效薄膜濃縮到粘稠狀,加純水適當(dāng)稀釋,出料,濃縮稀釋液用6mol/L HCl調(diào)pH值為7.5,加活性炭脫色,板框壓濾,濾液用泵泵入濃縮鍋 ,在80~90℃條件下,真空濃縮到有大量結(jié)晶出現(xiàn),放料,冷析,離心收集組氨酸,即得組氨酸的粗品。

  組氨酸粗品加水,升溫到70℃,校正pH值,加活性炭脫色,保溫攪拌1小時,脫色的透光率要達(dá)到99%以上,板框過濾,濾液經(jīng)超濾后,用泵泵入濃縮鍋,在高真空,80~90℃以下,濃縮到有大量結(jié)晶出現(xiàn),放料,冷析,離心收集組氨酸,即得組氨酸精品。

  組氨酸精品置于雙錐旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)干燥器內(nèi)干燥到水分達(dá)標(biāo)。

  【工藝流程】

  【質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)】參照中華人民共和國農(nóng)業(yè)部《進(jìn)口產(chǎn)品暫行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》(1987)中《飼料級L-組氨酸》的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行(見表1)。

  表1 飼料級L-組氨酸質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

  指標(biāo)名稱指標(biāo)值

  含量(C6H9N3O2計)98%~101.5 %

  鹽酸鹽灰分(%)≤0.1

  鉛(mg/kg)≤10

  比旋度[a] D20+12°~+12.8°

  SO42+(mg/kg)<200

  Cl(mg/kg)<200

  鐵(mg/kg)<10

  NH4+(mg/kg)<200

  透光率>98 %

  pH值7~8.5

  【功 用】L-組氨酸屬于堿性氨基酸或雜環(huán)氨基酸。有D-、L-及混旋體,存在于珠蛋白內(nèi),也是存在肌肉中的一種肌肽成分。以干面粉,豬、牛血粉,豬毛或蹄甲為原料制取,也可由葡萄糖發(fā)酵制得。組氨酸與其他氨基酸相比,除一些常見的化學(xué)反應(yīng)外,由于其右側(cè)鏈咪唑基與重氮苯磺酸能形成棕紅色化合物,即可發(fā)生波利(Pauly)反應(yīng)。由于咪唑基解離常數(shù)為6.0,解離的質(zhì)子濃度與水的相近,因此組氨酸既可作為質(zhì)子供體,又可作為質(zhì)子受體。另一方面,咪唑基供出質(zhì)子和接受質(zhì)子的速度十分快,半衰期小于10秒,且供出質(zhì)子和接受質(zhì)子的速度幾乎相等。組氨酸殘基在活性蛋白中常為活性中心。組氨酸為半必需氨基酸,可作為藥物或生化試劑。L-組氨酸是蛋白質(zhì)合成的編碼氨基酸,哺乳動物的必需氨基酸和生糖氨基酸。其側(cè)鏈?zhǔn)侨鯄A性的咪唑基。天然蛋白質(zhì)中尚未發(fā)現(xiàn)D-組氨酸。

  對人體來說,組氨酸可由普通的中間代謝產(chǎn)物合成,因此一直被認(rèn)為是非必需氨基酸,但隨著研究的深入,人們發(fā)現(xiàn)幼齡動物和嬰兒體內(nèi)的組氨酸合成量不能滿足機(jī)體生長需要,即使是成年動物,若不從食物中補(bǔ)充,體內(nèi)合成的也不能滿足需要,所以人們又稱之為半必需氨基酸。

  現(xiàn)已知道,組氨酸在生物體內(nèi)的主要代謝途徑有通過組氨酸脫氨酶進(jìn)行脫氨、通過脫羧酶形成組胺以及氨基轉(zhuǎn)移反應(yīng)三種。生物合成是從ATP的腺嘌呤部分和磷酸核糖絲磷酸形成咪唑甘油磷酸,進(jìn)行氨基轉(zhuǎn)換反應(yīng)。

  【性價比】組氨酸的咪唑基能與Fe2+或其他金屬離子形成配位化合物,促進(jìn)鐵的吸收,因而可用于防治貧血。組氨酸是一個含咪唑雜環(huán)的氨基酸,同其它氨基酸一樣,是蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的組成部分,參與動物機(jī)體蛋白質(zhì)合成。同時,還以多種形式廣泛參與機(jī)體的各種生理生化過程,其中包括組成多種生理生化的活性成分、清除細(xì)胞內(nèi)氧化物和參與免疫調(diào)節(jié)等,因此,組氨酸在動物營養(yǎng)中有重要的作用。

  許多學(xué)者研究了組氨酸的缺乏癥,認(rèn)為組氨酸缺乏時出現(xiàn)的癥狀主要為:①負(fù)氮平衡;②血清白蛋白下降;③血漿和肌肉游離組氨酸下降;④血紅蛋白下降;⑤血細(xì)胞比容下降;⑥肌肉中肌肽含量下降;⑦全血中銅和鋅含量降低;⑧血清鐵升高。補(bǔ)充組氨酸后,上述癥狀被緩解或消除。因此,為了保證機(jī)體的正常功能,必須從日糧中攝入定量組氨酸。因此,盡管機(jī)體可以自身合成組氨酸,但是組氨酸仍然是一種必需氨基酸。組氨酸已經(jīng)被列為是豬和雞的必需氨基酸。

  飼料中組氨酸的含量不同,谷物類飼料中組氨酸含量為0.2%~0.4%,而蛋白質(zhì)飼料一般為0.6%~1.5%,含量最高的是血粉,含量最低的是羽毛粉。Fuller等(1979)發(fā)現(xiàn)組氨酸是繼賴氨酸和蘇氨酸后的第三限制性氨基酸。

  Brudevold和Southern(1994)報道,在10~20kg仔豬的低蛋白質(zhì)(12%)“高粱-豆粕型”日糧中,組氨酸與異亮氨酸、色氨酸和纈氨酸一樣,都是第三限制性氨基酸。因此,低蛋白質(zhì)水平日糧中要注意組氨酸的缺乏。

  組氨酸雖然是一種必需氨基酸,但與其它必需氨基酸相比,一般不容易出現(xiàn)缺乏,只有在蛋白質(zhì)較低的特殊日糧中才需要額外添加合成組氨酸。目前,人們對有關(guān)組氨酸營養(yǎng)需要量的研究還不夠重視(NRC,1998),因而這方面的資料數(shù)據(jù)非常少。隨著理想蛋白質(zhì)概念的提出和實際應(yīng)用,人們已經(jīng)認(rèn)識到在研究每一種氨基酸,特別是必需氨基酸的營養(yǎng)需要量時,必須考慮其它氨基酸的含量。

  飼料級組氨酸目前的市場價格在200元/公斤左右。

  【檢測方法】組氨酸產(chǎn)品的檢驗按以下步驟操作:

  含量測定:取本品約0.15g,精密稱定,加無水甲酸2mL使溶解,加冰醋酸50mL,照電位滴定法,用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定,并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。

  計算公式:

  式中:0.00776的高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于組氨酸(C6H9N3O2)的克數(shù)。

  酸堿度:取本品1.0g,加水50ml溶解后,依法測定,pH值應(yīng)為7.0~8.5。

  溶液的透光率:取本品0.60g,加水20mL溶解后,照紫外-可見分光光度法,在430nm的波長處測定透光率,不得低于98.0%。

  氯化物:取本品0.25g,依氯化物標(biāo)準(zhǔn)檢測,與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液5.0mL制成的對照液比較,不得更濃(0.02%)。

  硫酸鹽:取本品1.0g,依硫酸鹽標(biāo)準(zhǔn)檢測,與標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液2.0mL制成的對照液比較,不得更濃(0.02%)。

  銨鹽:取本品0.10g,依銨鹽標(biāo)準(zhǔn)檢測,與標(biāo)準(zhǔn)氯化銨溶液2.0mL制成的對照液比較,不得更深(0.02%)。

  其他氨基酸:取本品,加水制成每1mL中含10mg的溶液,作為供試品溶液;精密量取上述溶液適量,加水稀釋成每1mL中含50μg的溶液,作為對照溶液。照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各5μL,分別點于同一硅膠G薄層板上,以正丙醇-濃氨溶液(67:33)為展開劑,展開,晾干,噴以茚三酮的丙酮溶液(1→50),在80℃加熱至顯色,立即檢視,供試品溶液所顯雜質(zhì)斑點的顏色與對照溶液的主斑點比較,不得更深(0.5%)。

  干燥失重:取本品,在105℃干燥3小時,減失重量不得超過0.2%。熾灼殘渣不得超過0.1%。

  鐵鹽:取本品1.0g,依鐵鹽標(biāo)準(zhǔn)測定,與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液1.0mL制成的對照液

  比較,不得更深(0.001%)。

  重金屬:取本品1.0g,依重金屬標(biāo)準(zhǔn)測定,含重金屬不得超過10%。

  砷鹽:取本品2.0g,加水23mL溶解后,加鹽酸5ml,依法檢查,應(yīng)符合規(guī)定(0.0001%)。

  熱原:取本品,加氯化鈉注射液制成每1mL中含30mg的溶液,依法檢測,劑量按家兔體重每1kg注射10mL,應(yīng)符合規(guī)定(供注射用)。

  【使用方法】在日糧中組氨酸水平對14C標(biāo)記苯丙氨酸氧化速度的影響程度間接估測小豬對組氨酸的需要量。組氨酸大于0.4%時,苯丙氨酸氧化速度最低,小于0.4%時,苯丙氨酸氧化速度隨著組氨酸水平的降低而升高,表明組氨酸大于0.4%時,苯丙氨酸用于蛋白質(zhì)合成的速度并未受到限制。因此,組氨酸營養(yǎng)推薦量為0.4%。隨著理想蛋白質(zhì)概念的提出和實際應(yīng)用,在研究每一種氨基酸,特別是必需氨基酸的營養(yǎng)需要量時,必須同時考慮其它氨基酸的含量。

  【注意事項】添加適量的L-組氨酸可促進(jìn)鐵的吸收,可降低胃液酸度,但添加過量會導(dǎo)致日糧氨基酸組成失衡,降低蛋白質(zhì)的利用率,嚴(yán)重時也會中毒。

  【儲 運】密封、干燥、避光保存,嚴(yán)禁與有毒物質(zhì)混放,以免污染。運輸時輕裝、輕卸,防止雨淋,不能與有毒有害物質(zhì)同運。本品為非危險品。
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