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今天的這篇文章于幾周前的7月27日發表于Poultry Science雜志。文章名為「Comparison of multiple methods for induction of necrotic enteritis in broilers: II. Impact on the growth curve」，即「比較肉雞壞死性腸炎的不同攻毒方法：II. 對生長曲線的影響」。

這項研究來自美國俄亥俄州立大學（The Ohio State University）的年輕教授，Dr. Lisa Bielke，的團隊。

壞死性腸炎(necrotic enteritis, NE)這個敵人想必家禽行業的朋友們都不陌生了。在這個無抗養殖時代，它無疑是家禽養殖面臨的一大難題。

壞死性腸炎是怎么來的呢？歸根到底它是由不同的「誘導因素」(predisposing factor) 導致腸道中的「產氣莢膜梭菌」(Clostridium Perfringens) 過度繁殖而引起的。而在不同的誘導因素中，球蟲病(coccidiosis)是最常見的一個(最給力的助攻!)。因此我們常常把它們倆拿到一起討論。

而球蟲病則是由寄生在動物腸道中的一類寄生原蟲，艾美耳屬球蟲（Eimeria），引起的。在上一篇文章中，溫博士提到了不同種類的球蟲對腸道不同部位的影響。我們現在已知7種球蟲會誘發禽類球蟲病，其中，巨型艾美耳球蟲（Eimeria Maxima）是常見的一個。

為了研究對付壞死性腸炎的不同營養手段，我們在實驗中常常需要應用「攻毒模型」，說白了就是通過實驗手段讓雞生病。而目前最常用的方法，便是用「巨型艾美耳屬球蟲 + 產氣夾膜梭菌」進行混合攻毒。字太多了容易看得頭暈，以下我們簡稱「球蟲+梭菌」吧。

可是問題是 - 球蟲有這么多種類（species），而在同一種類下，又有不同蟲株（strains）；同樣的，產氣莢膜梭菌也有不同菌株。而且，在不同的梭菌菌株中，有些含有壞死性腸炎B樣毒素基因（NetB gene），有這個基因的梭菌我們稱作「NetB+ 菌株」，它顧名思義可以釋放壞死性腸炎B樣毒素，據說有了B樣毒素，這群梭菌便能夠在沒有任何助攻的情況下自己引發壞死性腸炎。

所以...到底我們在實驗中該用那種球蟲、哪種梭菌呢？能不能只用「NetB+ 梭菌菌株」單獨攻毒呢？哪種攻毒方法的效果最好？

本次實驗設計有3個試驗，乍一看，實驗設計有點兒復雜，但其實說到底主要是以下4個變量：

我們先來看「球蟲 + NetB- 梭菌」攻毒組（EM+CP1），低濃度的球蟲+梭菌在16-27日齡的時候的確引發了體重的降低，但在27日齡后效果便不再明顯 (實驗1, 這里用的Guelph蟲株）。而將球蟲濃度升高6倍之后，M6蟲株比Guelph蟲株的攻毒效果更好（降低體重更多）（實驗2，看綠色虛線）。

再看梭菌單獨攻毒組，不管什么菌株，有沒有NetB+ 基因，也不管什么處理方法，都沒能產生攻毒效果（與負對照沒有體重差異）。

實驗3進一步證實了球蟲蟲株的不同會產生不同的效果。同樣的，從下圖綠色虛線可以看到，M6蟲株即便在低濃度下也比Guelph蟲株效果更給力（20k M6 vs. 30k Guelph oocytes/bird vs. 實驗1中 60k Guelph oocytes）。

對于梭菌單獨攻毒組，作者在實驗3中把濃度相對于實驗2提高了10倍，這時候終于有點兒效果了，我們可以看到生長曲線的變化 --- 未處理的CPB1（unwashed）攻毒效果最好，處理過的CPB1（washed）也還不錯。

這些結果表明，不管是NetB+還是NetB-，低于一定濃度的梭菌很難在沒有球蟲病助攻的情況下單獨誘發壞死性腸炎。

這個實驗中作者沒有發現任何臨床性壞死性腸炎，因此，我們在這兒討論的都是亞臨床表現（即體重下降）。如果再回去看一下上面兩個圖，假設2800g為肉雞的出欄體重，那么可以看到生長曲線的明顯變化---有亞臨床壞死性腸炎的肉雞要推遲好幾天才能達到出欄體重。

順便說一下，作者之所以要測試梭菌上清液攻毒效果，是因為作者認為在細菌培養過程中產生的代謝產物（大部分存在于上清液中）會在誘發壞死性腸炎中發揮重要作用，但結果呢...從實驗2和實驗3來看，體外代謝產物沒啥作用。

✅ 除非濃度真的特別特別高，否則，單獨的產氣莢膜梭菌是很難自己誘發壞死性腸炎的。在肉雞中，巨型艾美耳屬球蟲（M6蟲株） + 產氣夾膜梭菌共同攻毒，能比較理想地誘發壞死性腸炎亞臨床癥狀。

✅感染亞臨床壞死性腸炎的肉雞生長曲線會減緩，需要更長的時間才能達到出欄體重。接下來的研究可以關注營養策略對腸炎肉雞生長曲線的影響, 看如何能最小化生長曲線的偏移。

英文博客：Xixi | 翻譯&編輯：Liting | 校正：Xixi | 來源：曦曦博士

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