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畜牧人

標題: 哪里有測膨化玉米糊化度的呀，請大家幫個忙？ [打印本頁]

作者: lzc1226 時間: 2007-1-29 08:03
標題: 哪里有測膨化玉米糊化度的呀，請大家幫個忙？
哪里有測膨化玉米糊化度的呀，請大家幫個忙？

作者: xiaoyanzhu2002 時間: 2007-10-25 19:18
我也很想知道怎樣做淀粉糊化度，誰能測定？？？

作者: xys123456 時間: 2007-10-26 17:18
淀粉糊化度分析方法
原理簡介: β-淀粉酶在適當的PH值和溫度下，能在一定的時間內，將糊化淀粉轉化成還原糖及β-糊精，轉化的糖量與淀粉的糊化程度成比例。用鐵氰化鉀法測其還原糖量，即可計算出淀粉的糊化度。
1. 儀器和設備
1.1  分析天平：感量0.1mg
1.2  恒溫水浴鍋：可控溫度40±1℃
1.3  定性濾紙：中速
1.4  堿式滴定管：25ml（刻度0.1ml）
1.5  移液管：2ml、5ml、15ml、25ml。
1.6  玻璃漏斗：φ6cm
1.7  容量瓶：100ml。
2. 試劑與溶液
2.1磷酸鹽緩沖液10%（V/V）（PH=6.8）
甲液：溶解71.64g磷酸氫二鈉于蒸餾水中，并稀釋至1L。
乙液：溶解31.21g磷酸二氫鈉于蒸餾水中，并稀釋至1L。
取甲液49.0ml和乙液51.0ml合并為100ml，再加900mL蒸餾水即為10％（V/V）磷酸鹽緩沖液。
2.2 β-淀粉酶溶液 60g/L
溶解6.0gβ-淀粉酶（PH＝6.8，40℃時活力大于8萬單位，細度為80％以上通過60目）于100ml 10％磷酸鹽緩沖液中成乳濁液。（β-淀粉酶貯存于冰箱內，現用現配）

2.3  硫酸溶液  10%（V/V）
  將10ml濃硫酸用蒸餾水稀釋至100ml。
2.4 鎢酸鈉溶液 120g/L
  溶解12.0g鎢酸鈉于100ml蒸餾水中。
2.5 堿性鐵氰化鉀溶液  0.1mol/L
  溶解32.9g鐵氰化鉀和44.0g無水碳酸鈉于蒸餾水中并稀釋至1L，貯存于棕色瓶內。
2.6  醋酸鹽溶液
溶解70.0g氯化鉀和40.0g硫酸鋅于蒸餾水中加熱溶解，冷卻至室溫，再緩緩加入200ml冰乙酸并稀釋至1L。
2.7 碘化鉀溶液  100g/L
溶解10.0g碘化鉀于100ml蒸餾水中，加入幾滴飽和氫氧化鈉溶液，防止氧化，貯存于棕色瓶內。
2.8 硫代硫酸鈉溶液 C(Na2S2O3)= 0.1mol/L
溶解24.82g硫代硫酸鈉和3.8g硼酸鈉于蒸餾水中，并稀釋至1L，貯存于棕色瓶內（此溶液放置二星期后使用）
2.9 淀粉指示劑  10g/L
溶解1.0g可溶性淀粉于煮沸的100ml蒸餾水中，再煮沸2分鐘冷。
3.分析步驟
3.1  分別稱取試樣1.0000±0.0003（淀粉含量不大于0.5g）二份，置于二只150ml三角瓶中，標上A、B。另取一只150ml三角瓶，不加試樣，作空白，并標上C。在這三只三角瓶中各用加入40±1.0ml磷酸鹽緩沖液。
3.2  將A置于沸水浴中煮沸30min，取出快速冷卻至60℃以下。
3.3  將A、B、C置于40±1℃恒溫水浴鍋中預熱3分鐘后，各用5ml移液管加入5±0.1ml β-淀粉酶溶液，保溫（40±1℃）1小時（每隔15分鐘輕輕搖勻一次）。
3.4  1h后，將三只三角瓶取出，用移液管分別加入2±0.1ml硫酸溶液搖勻，再加入2±0.1ml鎢酸鈉溶液搖勻。并將它們全部轉移到三只100ml容量瓶中（用蒸餾水蕩洗三角瓶3次以上，蕩洗液也轉移至相應的容量瓶內）。最后用蒸餾水定容至100ml，并貼上標簽。
3.5  搖晃容量瓶，靜置2min后，用中速定性濾紙過濾。留濾液作為下面測定試樣。
3.6  用5ml移液管分別吸取上述濾液5±0.05ml，放入潔凈的150碘量瓶中，再用15ml移液管加入15±0.05ml堿性鐵氰化鉀溶液，搖勻后置于沸水中準確加熱20min后取出，用冷水快速冷卻至室溫，用25ml移液管緩慢加入25±0.1ml醋酸鹽溶液，并搖勻。
3.7  用5ml移液管加入5±0.05ml碘化鉀溶液搖勻，立即用硫代硫酸鈉溶液滴定，當溶液顏色變成淡黃色，加入幾滴淀粉指示劑，繼續滴定到蘭色消失。各三角瓶分別逐一滴定，并記下相應的滴定量。
3.8  結果計算
  所測試樣糊化度α(%)，按下式計算：

α=             ×100

式中：P—空白滴定量，ml；
m—完全糊化樣品溶液滴定量，ml；
  n—樣品溶液滴定量，ml
3.9  精密度
每個試樣取平行樣進行測定，以其算術平均值為結果。
雙試驗的相對誤差：糊化度在50%以下時，不超過10%；糊化度在50%以上時，不超過5%。
注意事項：
a.  β-淀粉酶在貯存期間內會有不同程度失活，一般每貯藏三個月測一次酶活力。
為了保證樣品酶解完全，以酶活力8萬單位，酶用量300mg為準，如酶的活力降低，酶用量則按比例加大。
b.  在滴定時，指示劑不要過早加入，否則會影響測定結果，同一樣品滴定時，應在變成一樣的淡黃色時加入淀粉指示劑。

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