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畜牧人

標題: 大蒜多糖對四氯化碳損傷小鼠肝組織SOD、MDA的影響 [打印本頁]

作者: 貔貅 時間: 2007-12-18 14:53
標題: 大蒜多糖對四氯化碳損傷小鼠肝組織SOD、MDA的影響
大蒜中有效成分包括揮發性成分，糖類，肽與各種氨基酸類,多種酶類,硫甙類及甾體甙類。現代醫學、營養學、預防醫學的研究證明：大蒜有降血脂、預防動脈硬化、防治冠心病、腦血栓、消炎殺菌、抗腫瘤、提高機體免疫力、保護肝臟、降血壓、降血脂和延緩衰老、促進礦物質吸收、防治便秘、治療肥胖癥等多方面的生理功能，大蒜多糖是大蒜的主要成分之一，屬于菊糖類的果聚糖，具有特殊的保健作用，開展大蒜多糖的提取、性質、利用等方面的研究，對于發揚我國的大蒜產業優勢，有很高的開發應用價值。目前，對于大蒜多糖的研究報道并不多見，本文就大蒜多糖對四氯化碳所致肝損傷小鼠肝組織中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）影響進行了探討。　　1.材料與方法
　　1.1 材料
　　動物：昆明種小鼠40只，雄性、健康，購自蘭州生物制藥廠。
　　藥品、試劑：大蒜多糖，由中國農科院蘭州畜牧與獸藥研究所提取；1﹪CCl4 橄欖油溶液；冰醋酸（分析純）；超氧化物歧化酶（SOD）測試盒、丙二醛（MDA）測定試劑盒、組織蛋白測定試劑盒（南京建成生物工程研究所）。
　　儀器：紫外可見光分光光度計（日本島津），恒溫水浴鍋，臺式離心機，微量式移液器
　　1.2方法與步驟
　　小鼠隨機分為5組，每組8只:正常對照組（I組）、CCl4 模型組（II組）、多糖低劑量組（III組）、多糖中劑量組（IV組）和多糖高劑量組（V組）。禁食12小時，稱重，按0.1ml/10g 體重灌胃1﹪ CCl4 橄欖油溶液（灌服組為II、III、IV、V組），I組灌服生理鹽水；5小時后III、IV、V 組灌服大蒜多糖，劑量分別為100mg/kg，200mg/kg, 400mg/kg。連續灌服7d，處死前10小時再次灌服1﹪CCl4橄欖油溶液（方法同前）。頸椎脫臼處死小鼠，摘取肝臟進行研磨，制成肝組織勻漿(10%)，按試劑盒說明書在550nm 處測定肝組織中SOD活力，在532nm 處測定MDA含量，同時利用考馬斯亮藍法進行組織中蛋白質的測定。
　　1.3 統計方法
　　組織勻漿中SOD活力的計算:(U/mg prot)SOD 活力=(對照管AO-測定管AO)÷對照管AO÷50%×(反應總體積÷取樣量)÷組織中蛋白含量組織勻漿中SOD活力的計算:(nmol/mg prot)
MDA含量=(測定管AO-測定空白管AO)÷(標準管AO-標準空白管AO)×標準品濃度÷蛋白含量對SOD活力、MDA含量結果進行t檢驗，數據均采用x ±s表示。
　　2.結果
　　2.1大蒜多糖對各實驗組肝組織中SOD活力和MDA含量的影響測定結果見　圖1.

注：與模型組比較，*表示p<0.05,**表示p<0.01

　　2.2大蒜多糖對各實驗組肝組織中MDA含量的影響測定結果見　圖2 　　

注：與模型組比較，*表示p<0.05,**表示p<0.01，***表示p<0.001

　　與正常對照組比較，四氯化碳模型組肝臟組織中SOD活力降低，肝臟組織中MDA含量顯著升高。100mg/kg的實驗組與模型組比較，SOD活力有提高但差異不顯著(P>0.05),MDA含量顯著降低(P<0.05)；200mg/kg的實驗組與模型組比較SOD活力顯著提高(P<0.05),MDA含量差異極顯著(P<0.01)；400mg/kg的實驗組與模型組相比SOD顯著(P<0.01)， MDA變化差異極顯著(P<0.001)。　　4.討論
　　SOD是體內催化歧化反應的一種抗氧化保護酶，此酶廣泛的存在于各種生物中。SOD對機體的氧化和抗氧化平衡起著重要的作用，此酶能清除超氧陰離子自由基（.O2-）保護細胞免受損傷。丙二醛（MDA）是機體通過酶系統和非酶系統產生氧自由基，攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸，引發脂質過氧化作用的過程中產生的，其含量反應機體內脂質過氧化及細胞損傷的程度。我們采用四氯化碳誘導的急性肝損傷模型,其機制主要是四氯化碳進入機體后在肝臟經細胞色素P450激活為自由基·CCl3 攻擊肝細胞膜上的磷脂分子,繼而與膜脂質和蛋白質大分子進行共價結合,使蛋白質代謝障礙,引起膜結構和功能完整性的破壞。另外,·CCl3 可抑制細胞膜和微粒體膜上鈣泵的活性,使Ca2 + 內流增加。兩種途徑最終導致脂質過氧化物反應,細胞內MDA含量增加,SOD活性下降。從圖中可知，CCl4對肝臟SOD的影響較對MDA的緩和，在灌服大蒜多糖后，對兩者的影響作用均呈現一定的量效關系。在劑量為400mg/kg時，SOD的活力幾乎恢復到正常水平，而對于MDA，它們之間還存在著一定差距。本實驗結果表明低濃度大蒜多糖對CCl4所致的化學性肝損傷有一定的緩解作用；中濃度大蒜多糖對肝損傷的緩解作用相對較強；高濃度大蒜多糖有良好的緩解作用。這可能是大蒜多糖通過穩定細胞膜結構、抑制脂質過氧化而發揮作用的結果。

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