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畜牧人

標(biāo)題: 魚(yú)粉中揮發(fā)性鹽基氮和組胺的測(cè)定方法！ [打印本頁(yè)]

作者: swordman33 時(shí)間: 2007-12-25 04:02
標(biāo)題: 魚(yú)粉中揮發(fā)性鹽基氮和組胺的測(cè)定方法！
魚(yú)粉中揮發(fā)性鹽基氮和組胺的測(cè)定方法沒(méi)有飼料專用的方法，目前國(guó)標(biāo)中都是引用食品肉類的標(biāo)準(zhǔn)！

作者: 馬前卒 時(shí)間: 2007-12-25 11:35
大家現(xiàn)在都在　用這兩個(gè)指標(biāo)來(lái)評(píng)價(jià)魚(yú)粉的新鮮度．

作者: swyt2007 時(shí)間: 2007-12-25 12:25
多謝樓主的組胺測(cè)定方法。

作者: yinghuier 時(shí)間: 2007-12-25 13:05
多謝樓主，:jiu: :jiu: :jiu: 期待繼續(xù)

作者: zqslc 時(shí)間: 2007-12-25 18:51
多謝樓主的組胺測(cè)定方法。
(本文來(lái)自：中國(guó)畜牧人論壇,http://www.cqnsfzw.com ) :hihi: :sdsd:

作者: xiaohui 時(shí)間: 2008-2-25 10:00
呵呵,我們也在找這個(gè)資料,

作者: 725fa5acb719d45 時(shí)間: 2008-2-25 10:10
為何魚(yú)粉這么難買？？？摻假太利害了！

作者: jku002 時(shí)間: 2008-2-25 10:16
公布出來(lái)讓大家看多好啊，沒(méi)錢了

作者: 肖秀 時(shí)間: 2008-3-2 10:19
魚(yú)粉中揮發(fā)性鹽基氮的測(cè)定方法

作者: glory143 時(shí)間: 2008-3-5 15:16
標(biāo)題: 郁悶
沒(méi)錢了，下不了了，直接貼出來(lái)就好了啊

作者: glory143 時(shí)間: 2008-3-18 08:15
組胺的方法可能不行，做過(guò)的有沒(méi)有這感覺(jué)

作者: 冰兒9447 時(shí)間: 2008-3-18 09:38
要學(xué)的太多了？魚(yú)粉也要測(cè)組胺嗎？有這個(gè)必要嗎/

作者: qinqin 時(shí)間: 2008-3-18 14:30
磷酸組胺很貴啊！！測(cè)組胺成本很高！！！

作者: glory143 時(shí)間: 2008-3-18 16:20
不測(cè)組胺，你有什么好指標(biāo)？？VBN？

作者: wangheping 時(shí)間: 2008-3-23 17:49
大家現(xiàn)在都在　用這兩個(gè)指標(biāo)來(lái)評(píng)價(jià)魚(yú)粉的新鮮度．謝謝樓主

作者: glory143 時(shí)間: 2008-3-25 08:18
按照這種方法做組胺，大家覺(jué)得結(jié)果怎么樣呢？做過(guò)的也來(lái)發(fā)表一下看法，別下載了就完事了啊

作者: 習(xí)老 時(shí)間: 2008-3-25 08:27
多謝樓主，請(qǐng)繼續(xù)！！！

作者: glory143 時(shí)間: 2008-4-17 11:28
個(gè)人感覺(jué)，這兩個(gè)方法都沒(méi)實(shí)際用處

作者: HHH 時(shí)間: 2008-5-12 10:50
下載了,正好需要!

作者: zdw123 時(shí)間: 2008-5-13 14:20
感謝樓主，:xuehu: :huahua:

作者: zhoushun 時(shí)間: 2008-5-14 09:39
個(gè)人認(rèn)為沒(méi)多少使用價(jià)值，最好發(fā)點(diǎn)在用、實(shí)用、容易操作的方法。

作者: nissian54 時(shí)間: 2008-5-23 18:08
好資料，下載學(xué)習(xí)學(xué)習(xí)。

作者: 柳粒橙 時(shí)間: 2008-5-29 09:32
這兩個(gè)其實(shí)都是反映魚(yú)粉是否腐敗的指標(biāo),但是我們公司只測(cè)VBN,組胺不測(cè),成本高.

作者: yangxiaodong 時(shí)間: 2008-5-29 13:17
標(biāo)題: 魚(yú)粉中揮發(fā)性鹽基氮的測(cè)定方法
還有沒(méi)有更好的。

作者: yangxiaodong 時(shí)間: 2008-5-29 13:19
魚(yú)粉會(huì)不會(huì)漲價(jià)

作者: hfdywj 時(shí)間: 2008-5-29 13:43
多謝樓主的組胺測(cè)定方法。前幾天正在找呢

作者: 又見(jiàn)新月 時(shí)間: 2008-5-29 15:47
本人正在研究化驗(yàn)方面的東西

作者: yjia810 時(shí)間: 2008-6-1 23:14
VBN用的比較多

作者: 長(zhǎng)江之水 時(shí)間: 2008-7-18 10:34
魚(yú)粉的新鮮度是個(gè)很重要的指標(biāo),不亞于其它指標(biāo).

作者: 田玉安 時(shí)間: 2008-7-18 10:41
1、組胺的測(cè)定
原理：魚(yú)粉中組胺用三氯乙酸提取，之后調(diào)PH=9，將游離的組胺用正戊醇提取出，之后再用HCL反萃取，用偶氮試劑顯色。
組胺+三氯乙酸鹽（溶于水）-（PH=9---組胺（溶于正戊醇）-----HCL----正戊醇（組胺溶于稀HCL）
1、組胺的測(cè)定
收集水相（下層）于20ml刻度試管內(nèi)，用水定容至刻度，搖勻，吸取1.00ML（2ML）鹽酸提取液于10ML比色管中，加入碳酸氫鈉溶液（50g/l）3.0ml搖勻，振蕩下加入偶氮試劑3.0ml，用水定容到刻度，室溫下顯色10min，用1cm比色皿于480nm下測(cè)定吸光度。
1、組胺的測(cè)定
偶氮試劑的配制
甲液：稱取0.5g對(duì)硝基苯胺，加5ml鹽酸（1+1）溶解，再加水稀釋到200ml，置冰箱中（2~8度）保存。
乙液：亞硝酸鈉溶液5g/l，臨用現(xiàn)配
甲液5ml、乙液40ml混合后立刻使用。
1、組胺的測(cè)定
步驟（1）樣品處理
  稱取1~3克魚(yú)粉于具塞三角瓶?jī)?nèi)，加入25ml三氯乙酸（100g/l）每隔30分鐘搖動(dòng)一次，稱取3小時(shí)，過(guò)濾，取濾液2ml或1ml于15ml試管內(nèi)，加氫氧化鈉（250g/l）5滴，振蕩一下，再加5ml正戊醇振蕩2分鐘，靜止分層（如出現(xiàn)乳化現(xiàn)象可滴加2~3滴無(wú)水乙醇），用移液槍小心吸取上清液（正戊醇層）于50ml分液漏斗內(nèi)，下層沉淀再分別用鹽酸（1mol/l）5ml、5ml、3ml反萃取3次。
步驟2：標(biāo)準(zhǔn)曲線法
稱取磷酸組胺樣品（Sigma公司）2.7671mg，置于100ml容量瓶?jī)?nèi)，用水溶解并定容到刻度，此液組胺含量為10ug/ml，分別取此標(biāo)液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00ml于5支10ml比色管內(nèi)，各加鹽酸（1mol/L）1.0ml，振蕩，用水定容到刻度，搖勻后放置10min（室溫下），用1cm比色皿于480nm下測(cè)吸光值。
參比液：試劑空白
計(jì)算公式：
                                 C*100
(m/25.0)*(1.00/15.0)*1000

實(shí)例：魚(yú)粉2.3455，取三氯乙酸提取液1.00ml，吸光度A=0.257
標(biāo)準(zhǔn)曲線:A=0.012380*c+0.01310
計(jì)算:c=(A-0.0131)/0.012380=19.70ug
組胺=[19.70/(2.3455/25)*(1.0/15)*100=315mg/100g=3150ppm
應(yīng)用：
進(jìn)口白魚(yú)粉：組胺<10mg/100g(1~5mg/100g)
進(jìn)口水產(chǎn)級(jí)蒸汽魚(yú)粉<100mg/100g(50mg/100g)
優(yōu)質(zhì)國(guó)產(chǎn)魚(yú)粉<150mg/100g(50-150mg/100g)
新鮮度差的魚(yú)粉(國(guó)產(chǎn),進(jìn)口)組胺200~340mg/100g
用于乳豬料的魚(yú)粉組胺<100mg/100g

2揮發(fā)性鹽基氮的測(cè)定(VBN)
原理:蛋白質(zhì)分解時(shí)，氨基酸脫氨基生成氨，氨基酸脫羧基生成胺，氨與胺在堿液中被蒸發(fā)出來(lái)，用硼酸吸收，用標(biāo)準(zhǔn)鹽酸反滴定，測(cè)出其含量。
步驟：稱取5-10g樣品于250ml具塞三角瓶?jī)?nèi)，準(zhǔn)確加入100.00ml水，振蕩30min，過(guò)濾，取慮液10.00ml，按粗蛋白蒸餾操作，但加入的堿為氧化鎂溶液（10g/L）5-8ml。
計(jì)算：
揮發(fā)性鹽基氮（VBN）（mg/100g）=[c（V-V0）/m*（10/100）*100
實(shí)例：魚(yú)粉樣品8.6706g，VHCL=0.0200mol/L  V=3.93ml V0=0.015ml
   VBN={[0.0200*10/100]}*14*100=122.1mg/100g
應(yīng)用：
新鮮度好的魚(yú)粉VBN<100mg/100g（40-80）
新鮮度差的魚(yú)粉VBN>150mg/100g（180-350）
乳豬料魚(yú)粉VBN<100mg/100g
飼料中免疫球蛋白lgG的測(cè)定
   --------高效液相色譜法
1 范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用高效液相色譜法儀測(cè)定飼料中免疫球蛋白IgG含量的方法
本標(biāo)準(zhǔn)適用配合飼料、濃縮飼料、含Ig的飼料原料（包括血漿蛋白粉、雞蛋粉等）中免疫球蛋白IgG的測(cè)定
本方法檢出限：當(dāng)取樣1g，稀釋至25ml，進(jìn)樣量20ul，檢出濃度為0.2mg/ml
2 原理
根據(jù)高效親和色譜的原理，在磷酸鹽緩沖液條件下免疫球蛋白IgG與配基連接，在PH2.5的鹽酸甘氨酸條件下洗脫免疫球蛋白IgG。
3、試劑
除非另有說(shuō)明，在分析中僅使用確認(rèn)為分析純的試劑，水為去離子水或相當(dāng)純度的水，應(yīng)符合CB/T6682三級(jí)用水的規(guī)定
3．1磷酸二氫鉀
3．2 磷酸氫二鉀
3．3流動(dòng)相A：PH6.5，0.05mol/l磷酸鹽緩沖液
4.4 流動(dòng)相B：PH2.5，0.05mol/l甘氨酸鹽酸緩沖液
4．5IgG儲(chǔ)備標(biāo)準(zhǔn)液：
稱取IgG標(biāo)準(zhǔn)品（Sigma）0.0100g，用流動(dòng)相A（4。3）溶解并定容至10ml，搖勻，濃度為1.0mg/ml
4．6IgG工作標(biāo)準(zhǔn)溶液：
取IgG標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用流動(dòng)相A（4。3）稀釋成含IgG0.2，0.4，0.6，0.8，1.0mg/ml
的標(biāo)準(zhǔn)系列。臨用時(shí)配制。
5 儀器和設(shè)備
5．1 實(shí)驗(yàn)室常用儀器設(shè)備
5．2PH計(jì)
5．3超純水裝置
5．4勻漿機(jī)
5．5高效液相色譜儀：具紫外檢測(cè)器和梯度洗脫裝置
6試樣制備
按GB/T14699飼料采樣，選取飼料樣品至少500g，四分法縮減至少100g，磨碎，通過(guò)0.28 um孔篩，混勻，裝入密閉容器中，避光低溫保存?zhèn)溆谩?br /> 7分析步驟
7．1試樣處理：
稱取一定量試樣（精確至0.0001），配合飼料、濃縮飼料時(shí)，稱取試樣2~5g；血漿蛋白粉稱取試樣0.1g；雞蛋粉稱取試樣0.5g，于茄形瓶中，準(zhǔn)確加入25ml流動(dòng)相A（4。3），用勻漿機(jī)勻漿5分鐘，取溶液10ml 于離心管中，以1000g（3500r/min）離心10min，通過(guò)0.45um微孔濾膜后進(jìn)樣
7．2測(cè)定：
7．2．1HPLC測(cè)定參數(shù)的設(shè)定：
色譜柱：Pharmacia HI-Trap Protein G柱，1Ml
波長(zhǎng)：280nm
進(jìn)樣量：20ul
7．2．2梯度洗脫條件
梯度洗脫見(jiàn)表1
7．2．3測(cè)定
7．2．3．1先用5倍柱體積的重蒸餾水或去離子水洗柱，再用10倍柱體積流動(dòng)相A（4。3）平衡柱，按洗脫程序進(jìn)行洗脫。
分別取7.1試樣處理液和4.4標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)行測(cè)定，以色譜峰面積積分值做單點(diǎn)或多點(diǎn)校準(zhǔn)定量。
8結(jié)果計(jì)算
8．1試樣中IgG含量按公式（1）計(jì)算：
  Pi×V×c×Vst×100
Pst×m×Vi×V1×100
式（1）中：試樣中IgG含量，g/100g；
         c——標(biāo)準(zhǔn)工作液（A.2.3）中IgG的濃度,mg/ml;
         P1——標(biāo)準(zhǔn)工作液峰面積值；
         Vst——標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)樣體積，uL；
         Pst——試樣峰面積值；
         Vi——試樣進(jìn)樣體積；u L；
         V——試樣體積，mL；
         m——稱取試樣的質(zhì)量，g；
8．2 平行測(cè)定結(jié)果用算術(shù)平行值表示，保留小數(shù)點(diǎn)后兩位有效數(shù)字。
9 重復(fù)性
   在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)試結(jié)果的測(cè)定值的絕對(duì)差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的15%。

作者: glory143 時(shí)間: 2008-7-18 10:45
組胺的方法能做出來(lái)嗎？？

作者: fuzhen 時(shí)間: 2008-7-31 16:05
魚(yú)粉中組胺、揮發(fā)性鹽基氮的標(biāo)準(zhǔn)是多少呢？

作者: dengchunhua 時(shí)間: 2008-11-9 11:02
標(biāo)題: 能不能提供酸價(jià)的檢測(cè)方法
能不能提供酸價(jià)的檢測(cè)方法

作者: fengjunping 時(shí)間: 2008-11-18 10:43
標(biāo)題: 回復(fù) 樓主 swordman33 的帖子
我的論壇幣不夠，那個(gè)好心人給我發(fā)一個(gè)，萬(wàn)分感謝！feng_junping@163.com

作者: fengjunping 時(shí)間: 2008-11-18 10:45
標(biāo)題: 回復(fù) 樓主 swordman33 的帖子
我的論壇幣不夠，能不能給我發(fā)一下，我正需要，萬(wàn)分感謝！feng_junping@163.com

作者: wuhan001 時(shí)間: 2008-12-15 01:05
學(xué)習(xí)學(xué)習(xí)，終于找到了

作者: fengyun22shiji 時(shí)間: 2008-12-29 11:20
不能看啊我找了很久才找到這個(gè)網(wǎng)站的注冊(cè)了花了很長(zhǎng)時(shí)間

作者: 水本無(wú)味 時(shí)間: 2008-12-29 11:23
魚(yú)粉最主要是檢測(cè)揮發(fā)性言基氮和鹽分，在加上鏡檢，如果有條件在檢測(cè)氨基酸

作者: yufa14 時(shí)間: 2009-1-13 11:18
我也想要，不要錢就好了

作者: 國(guó)國(guó) 時(shí)間: 2009-6-15 15:53
有一個(gè)魚(yú)粉樣,鹽基氮我測(cè)得110,而組胺測(cè)得1500多,有這種可能嗎?

作者: sasakai 時(shí)間: 2009-6-16 17:20
魚(yú)粉中揮發(fā)性鹽基氮的范圍是多少~?

作者: 國(guó)國(guó) 時(shí)間: 2009-6-16 19:21
國(guó)標(biāo)中鹽基氮小于110mg/100g是特級(jí),組胺小于1500mg/kg是三級(jí).

作者: LXSLDXH0521 時(shí)間: 2009-6-27 12:41
測(cè)揮發(fā)性鹽基氮為什么要加氧化鎂蒸溜, 而不用氫氧化鈉.

作者: 馮春偉 時(shí)間: 2009-7-28 20:59

引用自LXSLDXH0521 發(fā)表于 2009-6-27 12:41的內(nèi)容
測(cè)揮發(fā)性鹽基氮為什么要加氧化鎂蒸溜, 而不用氫氧化鈉.

,方法中不是說(shuō)的弱堿性嗎？

[ts]馮春偉于 2009-7-28 21:02 補(bǔ)充以下內(nèi)容[/ts]

引用自sasakai 發(fā)表于 2009-6-16 17:20的內(nèi)容
魚(yú)粉中揮發(fā)性鹽基氮的范圍是多少~?

魚(yú)粉中揮發(fā)性鹽基氮的范圍是110~120mg/100g

作者: zhonghongju2008 時(shí)間: 2009-10-23 08:40
魚(yú)粉新鮮度是用全量蒸餾測(cè)定的嗎？論壇幣不足了@@007:

作者: guo08 時(shí)間: 2010-4-26 11:36
非常有用，謝謝樓主

作者: 豬啊豬 時(shí)間: 2010-5-18 16:54
謝謝樓主分享啊~我正需要這個(gè)！

作者: 我是女生 時(shí)間: 2010-5-22 21:50
魚(yú)粉新鮮度采用這兩項(xiàng)指標(biāo)，若摻雜銨鹽則測(cè)出的鹽基氮必高，但實(shí)際是摻進(jìn)去的，應(yīng)該怎樣區(qū)分腐敗造成還是故意摻雜？

作者: 365haha 時(shí)間: 2010-5-22 21:52
有沒(méi)有更詳細(xì)的資料

[ts]365haha 于 2010-5-22 21:53 補(bǔ)充以下內(nèi)容[/ts]

關(guān)于魚(yú)粉的

作者: iron-monkey 時(shí)間: 2010-5-23 11:22
用國(guó)發(fā)現(xiàn)總是誤差很大，現(xiàn)在2003的都出來(lái)了

作者: yifan85919 時(shí)間: 2010-6-12 14:10
沒(méi)錢，我也想要這個(gè)方法

作者: lijing8620746 時(shí)間: 2011-3-10 11:07
這個(gè)組胺的測(cè)定是什么格式？打不開(kāi)啊，花了50論壇幣

補(bǔ)充內(nèi)容：
說(shuō)是PDF，打不開(kāi)。怎么回事？

作者: 魔刀 時(shí)間: 2011-3-10 14:36
“對(duì)不起，你還未登錄，無(wú)權(quán)下載本附件。”已經(jīng)登錄了還說(shuō)沒(méi)登陸，這是怎么回事？

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