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畜牧人

標題: 探討一下霉菌毒素的檢測方法？ [打印本頁]

作者: 游子吟 時間: 2009-8-18 15:02
標題: 探討一下霉菌毒素的檢測方法？
本人現(xiàn)在欲尋找一種較好的測定飼料中霉菌毒素含量的方法，請各位高人指點一下？謝謝！

作者: njsx 時間: 2009-8-18 15:17
現(xiàn)在都是買試劑盒測定

作者: fengyuyuan168 時間: 2009-8-18 15:40
不知道這個試劑盒的價格怎樣?。?hr noshade size="2" width="100%" color="#808080"> 作者: 葉知秋 時間: 2009-8-18 15:46
現(xiàn)在比較通用的方法是ELESA（酶聯(lián)免疫），但是測定時的誤差是比較大的，但優(yōu)點是較快速，可靠性相對較高。
當前最為準確的方法是高效色譜法（記不清是液相還是氣相了），這個成本高，測定準確

作者: hexuejun02 時間: 2009-8-18 15:46
主要看測哪幾種，現(xiàn)在可以測好久中霉菌毒素，如果飼料廠用的話，試劑盒就夠了，但要是做研究的話，那個精度還是差一些。

作者: 游子吟 時間: 2009-9-9 16:26
本帖最后由游子吟于 2009-9-9 16:29 編輯

感謝大家的指點，我也查閱了一些資料，共大家討論學習。

作者: xiaohui09 時間: 2009-9-10 14:55
樓主的檢測方法夠貴的啊！:kelian:

作者: czc 時間: 2009-9-10 20:43
能不能打包啊?單下麻煩啊.

作者: dongwei 時間: 2009-9-11 13:53
最好的是色譜但無法推廣，目前商品檢測的還是試劑盒或試紙，檢測精度可以達到國家標準。

作者: xxc1963 時間: 2009-9-13 22:36
能不能具體檢測毒素的種類

作者: 寧衡 時間: 2009-9-13 22:45
10# xxc1963
用ELISA試劑盒可以的，液相色譜設備要求高。不過試劑盒一次最少買96樣，測的完嗎？

作者: dongwei 時間: 2009-9-14 11:09
[quote]引用自xxc1963 發(fā)表于 2009-9-13 22:36的內(nèi)容

能不能具體檢測毒素的種類
色譜只要有標準品肯定沒問題，試劑盒和試紙大多是AB1。

作者: 游子吟 時間: 2009-9-14 17:40
飼料中霉菌毒素的檢測方法主要有目測法、薄層色譜法、高效液相色譜法、酶聯(lián)免疫法、放射免疫法、氣相色譜法及快速試紙檢測法。常用的方法為薄層色譜法、高效液相色譜法、酶聯(lián)免疫法、快速試紙檢測法。每種方法都有其利弊和適用的條件。具體使用那種方法主要看你對毒素含量的精度要求和你的實驗室條件而定了。

作者: 游子吟 時間: 2009-9-14 17:43
TLC法是測定霉菌毒素的經(jīng)典方法, 是我國測定食品及飼料中霉菌毒素的標準方法之一。
如黃曲霉毒素的檢測原理：是將樣品經(jīng)過提取、柱層析、洗脫、濃縮、薄層分離后, 在波長 365 nm紫外光下產(chǎn)生藍紫色或黃綠色熒光, 黃曲霉毒素 B1、 B2 產(chǎn)生藍紫色熒光, 黃曲霉毒素 G1、 G2 產(chǎn)生黃綠色熒光, 并根據(jù)其在薄層上顯示的最低檢出量來確定其含量, 是一種半定量檢測技術。
優(yōu)點：TLC有單向展開法和雙向展開法,其中雙向展開法能進一步除去樣品中的雜質(zhì), 提高靈敏度。TLC法由于設備簡單,易于普及,所以國內(nèi)外仍在使用。
缺點：由于該法樣品前處理繁瑣,且提取和凈化效果不夠理想, 提取液中雜質(zhì)較多, 因而在展開時影響斑點的熒光強度, 雙向展開法雖避免了雜質(zhì)干擾,但增加了操作步驟和時間。TLC法較適合于對黃曲霉毒素的定性檢測, 是研究黃曲霉毒素初期所使用的主要方法。薄層色譜法對樣品處理繁瑣, 實驗過程復雜, 所需時間多, 易受雜質(zhì)干擾, 準確性差, 對實驗人員危害大。

作者: 游子吟 時間: 2009-9-14 17:44
酶聯(lián)免疫吸附法的定義：是抗原(或抗體)吸附劑和用酶標記的抗體(或抗原)與標本中的待測物(抗原和抗體)起特異的免疫學反應, 用測定酶活力的方法來增加測定的敏感度,是一種定性或半定量的方法。
優(yōu)點：酶聯(lián)免疫吸附法特異性強、靈敏度高、成本低, 適于批量檢測, 食品和飼料工業(yè)上可利用此方法來界定食品或飼料中黃曲霉毒素的超標問題。關于運用酶聯(lián)免疫法檢測AFTB1的檢測報道也較多,目前國外已有較成熟的檢測食品及飼料中 AFTB1 等真菌毒素的 ELISA 試劑盒出售。
缺點：由于酶本身的不穩(wěn)定性, 用此方法檢驗黃曲霉毒素有可能帶來假陽、陰性結(jié)果, 復雜樣品受干擾, 檢測準確度不高。所以研制出的黃曲霉毒素快速測試盒多以測定最具毒性的種屬為主, 酶聯(lián)免疫吸附法的檢測精度還有待于提高。

作者: 游子吟 時間: 2009-9-14 17:45
HPLC是近幾年發(fā)展起來的檢測 AFTB1 方法,主要是用熒光檢測器檢測,在適宜的流動相條件下,采用反相 C18 柱,使多種黃曲霉毒素同時分離。文鏡采用國產(chǎn)硅鎂吸附柱層析分離純化玉米中 AFTB1, 用HPLC 法檢測, 方法簡便,純化效果好, 最低檢出量為0.08 ng,回收率為 92.87%,該法制柱方便,而且降低了成本。
優(yōu)點：李佐卿等則將免疫學技術和 HPLC法相結(jié)合采用免疫親和柱對樣品進行凈化,AFTB1 回收率達到97.3%,相關系數(shù) r=0.999 4,最低檢出限為 6.25 pg,該法將提取、凈化、濃縮一次完成,大大簡化了前處理過程提高了工作效率及方法的靈敏度,但增加了成本。高效液相色譜法靈敏、分辨率高, 可作定性、定量分析, 同時可檢測多個黃曲霉毒素種類, 適于大批量樣品的分析。
缺點：高效液相色譜法儀器設備昂貴, 技術水平要求高, 每次實驗所使用的化學藥劑和處理途徑對試驗結(jié)果影響程度差別很大, 對實驗結(jié)果的精度造成影響樣品還需進行繁瑣的純化處理, 不適合快速檢測。

作者: 游子吟 時間: 2009-9-14 17:53
快速檢測試紙的檢測采用膠體金免疫層析技術，應用免疫層析技術檢測霉菌毒素的含量，屬于定性和半定量方法。優(yōu)點是操作簡單，不需要昂貴的儀器設備，結(jié)果準確，成本低，可以逐份檢測，30分鐘內(nèi)可以出結(jié)果，非常方便實用。適合飼料廠采購購買原料時快速檢測所需，也可以作為養(yǎng)殖場飼喂動物時檢測霉菌毒素的一個簡單的判斷指標。

作者: zqslc 時間: 2009-9-14 20:33
學習、學習。本企業(yè)正需要啦。

作者: 寧衡 時間: 2009-9-15 23:27
17# 游子吟
有沒有試紙條的經(jīng)銷電話和價格，如果有使用效果可不可以給說說？

作者: 游子吟 時間: 2009-9-16 09:11
上海澳靈生物科技有限公司的霉菌毒素快速檢測試紙，你可以試試。我只是用過黃曲霉毒素的測試紙，效果還可以。其他的霉菌毒素檢測試紙，沒用過，不好說怎么樣？具體情況你可以上網(wǎng)查查看，打電話咨詢一下。

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