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畜牧人

標題: 全球基因工程實驗室都在使用耐熱達93℃的DNA聚合酶…… [打印本頁]

作者: saturnbio 時間: 2010-12-7 12:47
標題: 全球基因工程實驗室都在使用耐熱達93℃的DNA聚合酶……
本帖最后由 saturnbio 于 2010-12-7 12:52 編輯

當飼料行業還在質疑酶制劑是否可能做到天然耐熱的時候，天然耐熱93℃以上的DNA聚合酶早已在基因工程的PCR技術中普遍應用。
PCR技術是指聚合酶鏈式反應，其英文Polymease Chain Reaction(PCR)是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應組成一個周期,循環進行,使目的DNA得以迅速擴增,具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時等特點。它不僅可用于基因分離、克隆和核酸序列分析等基礎研究,還可用于疾病病的診斷或任何有DNA,RNA的地方．聚合酶鏈式反應又稱無細胞分子克隆或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴增技術。由美國科學家PE（Perkin Elmer珀金-埃爾默）公司遺傳部的Dr. Mullis發明，由于PCR技術在理論和應用上的跨時代意義，因此Mullis獲得了1993年諾貝爾化學獎。

技術原理　　
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。在

聚合酶鏈式反應
實驗中發現，DNA在高溫時也可以發生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。

　　但是，DNA聚合酶在高溫時會失活，因此，每次循環都得加入新的DNA聚合酶，不僅操作煩瑣，而且價格昂貴，制約了PCR技術的應用和發展。發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受93℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環加酶，使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術得以大量應用，并逐步應用于臨床。

作者: sailingbbs 時間: 2010-12-7 20:48
Taq酶雖然耐熱，但是他的最適溫度是75度左右，在動物體內環境下無法發揮作用。

sailingbbs于2010-12-8 15:46補充以下內容：
不給動物用，你耐1000度也沒用啊。也沒必要放在這個版塊來討論了吧。

作者: boy8848 時間: 2010-12-11 11:12
其實飼用酶方面，也有達到天然耐熱94℃的產品，例如云師大酶工程所開發的3位植酸酶。具體產品就是諾偉司的諾偉磷。

作者: tugoulan 時間: 2011-8-11 07:13
希望早點讓三正使這種耐更高溫的酶應用于工業生產，期待云師大酶工所的精英們智慧

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