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1.1.乙酸緩沖液(1)：稱取20.52g無水乙酸鈉于1000 ml燒杯中，加入900ml蒸餾水溶解，用冰乙酸調節pH至5.50±0.01，移至1000ml容量瓶中，蒸餾水定容至刻度。室溫下存放2個月有效。

1.2.乙酸緩沖液(2)：稱取20.52g無水乙酸鈉，0.5 ml TritonX-100, 0.5g牛血清白蛋白于1000ml燒杯中，加入900ml蒸餾水溶解，用冰乙酸調pH至5.50±0.01，移至1000ml容量瓶中，蒸餾水定容至刻度，室溫下存放2個月有效。

1.3.硝酸溶液：1+2水溶液。

1.4.鉬酸銨溶液：稱取10g鉬酸銨于100ml容量瓶中，加蒸餾水溶解（微加熱），加入1ml氨水(25％)，用蒸餾水定容至刻度。

1.5.偏釩酸銨溶液：稱取0.235 g偏釩酸銨于100mL棕色容量瓶中，加50ml蒸餾水微加熱溶解，待溶液冷卻后加入2 mL硝酸溶液(1.3)，用蒸餾水溶解定容至刻度。避光條件下保存一周有效。

1.6.顯色終止液：移取2份硝酸溶液(1.3)，1份鉬酸銨溶液(1.4)，1份偏釩酸銨溶液(1.5)混合后使用，現用現配。

1.7．植酸鈉溶液：（sigmaP0109）稱取0.69g肌醇六磷酸鈉(C6H6O24P6Na12)于100mL容量瓶中，用乙酸緩沖液(2)溶解并定容至刻度，現用現配(實際反應液中的最終濃度為5.0 mmol／L)。

1.8基準物：準確稱取0.6804g在105℃烘至恒重的基準磷酸二氫鉀于100ml容量瓶中，用乙酸緩沖液（1）溶解，準確定容至刻度（濃度為50.0µmol/ml）。

準確稱取植酸酶試樣1g，置于100ml容量瓶中，加入乙酸緩沖液（2）搖勻并定容至刻度，放入磁力棒，在磁力攪拌器上高速攪拌40min，將提取后的試樣在離心機上以4000r/min離心15min，取上清液1ml于100ml容量瓶中，用乙酸緩沖液（2）定容至刻度，使樣液濃度保持在0.5U/ml左右，待反應。

反應順序	樣品、標準	樣品空白（標準空白）
1、乙酸緩沖液1（ml）	1.8	1.8
2、待反應液（ml）	0.2	0.2
3、混合	√	√
4、37℃水浴預熱5min	√	√
5、依次加入底物溶液（ml）	4	4（第二步）
6、混合	√	√
7、37℃水浴水解30min	√	√
8、依次加入終止液（ml）	4	4（第一步）
9、混合	√	√

反應后將試樣在常溫下靜置10min，出現渾濁，然后在離心機上以4000r/min離心15min，取上清液以標準空白調零，在分光光度計波長為415nm處測出各個吸光值。

標液序號	稀釋倍數	濃度/（µmol/ml）
1	0.5→16	1.5625
2	0.5→8	3.125
3	0.5→4	6.25
4	1→4	12.5
5	1→2	25

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