畜牧人
標(biāo)題: 自家疫苗制作方法 [打印本頁]
作者: 李小鵬 時間: 2011-3-10 21:49
標(biāo)題: 自家疫苗制作方法
一、 儀器恒溫干燥箱、組織搗碎機(jī)、高壓蒸氣滅菌器、天平、燒杯、漏斗、鐵架臺、手術(shù)刀、手術(shù)剪、鑷子、止血鉗、廣口瓶
二、 原料與物品
甲醛、甘油、紗布、注射用生理鹽水（無熱源物質(zhì)，以免注射時發(fā)生過敏反應(yīng)，減少變態(tài)反應(yīng)）、膠手套、自家病豬的內(nèi)臟組織
三、
制作步驟
1 滅菌
將所需儀器、原料和物品進(jìn)行高壓滅菌。
2 取樣
采取自家病豬的內(nèi)臟器官和組織。一般原則：優(yōu)先采取含毒量最高的組織或器官，肝—脾—腎—肺—淋巴結(jié)（整個采樣過程要求無菌操作）。
3 去菌
用注射用生理鹽水洗去樣品表面的細(xì)菌。
4 剪碎
用手術(shù)刀、手術(shù)剪將樣品剪碎，去除其中的結(jié)締組織、血管等難以搗碎部分。
5 稱重
用天平稱量所剪碎的樣品，并記錄好其重量。
6 搗碎
用組織搗碎機(jī)將稱量好的樣品搗碎，呈肉湯樣，要求越碎越好。
7 凍融
將搗碎好的樣品置于冰箱內(nèi)反復(fù)凍融三次，凍融過程中前4小時內(nèi)，每隔20分鐘搖勻一次，盡量使病毒釋放出來。
8 過濾
凍融后完全溶解之后，用紗布過濾兩次，先用四層紗布過濾一次，再用八層紗布過濾一次即可
9
稀釋
用注射生理鹽水溶液以1：5的比例將樣品稀釋。
10 滅活
在稀釋好的樣品中添加0.4%甲醛（滅活劑）和5~10%甘油（保護(hù)劑），再將其置于37℃的恒溫干燥箱內(nèi)滅活24~48小時，盡量使病毒全部被滅活，但又必須最大限度地保持其抗原性。
11 安全檢測 用小白鼠進(jìn)行免疫接種，觀察其反應(yīng)和行為，同時剖解觀察其病理變化。
12 無菌檢驗(yàn) 用肉湯或瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)，觀察其是否有細(xì)菌生長。
13
分裝
14 免疫接種
15 效力檢驗(yàn)
四、 疫苗的使用說明
1
保存
2~8℃冷藏
2
保質(zhì)期6個月
3
用法用量
使用前必須先充分搖勻，以2ML/頭進(jìn)行肌肉注射，于發(fā)病期前10~15天接種，也可用于緊急接種，一般免疫接種后10天左右產(chǎn)生免疫抗體。
作者: 唐朝2009 時間: 2011-3-11 00:01
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