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畜牧人
標題:
中華人民共和國國家標準
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作者:
nety
時間:
2006-8-14 10:23
標題:
中華人民共和國國家標準
中華人民共和國國家標準
GB/T18651-2002
牛無漿體病快速凝集檢測方法
中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局發布
1范圍
本標準規定了牛無漿體病快速凝集檢測方法。
本標準適用于牛無漿體病的診斷。其他動物無漿體病的診斷亦可參照辦法。
2試劑和器械
2.1試劑
a）無漿體凝集抗原，4℃保存；
b）陰性協同血清（牛血清因子），-70℃"-80℃保存；
c）陽性對照血清，-20℃保存；
d）陰性對照血清，-20℃保存。
以上試劑由制標單位提供。
2.2器械
2.2.1微量移液器：5μL、10μL或5μL"25μL（連續可調）。
2.2.2微量移液器頭若干個。
2.2.3試驗用板：取85mm×12.5mm潔凈透明塑料平板，用油漆或油性記號筆劃成4排×6個區位。
3操作步驟
實驗應在25℃"28℃環境下進行。
3.1被檢血清按常規采集和分離，從采集到第一次檢測前，要在室溫放置38h"48h，然后冷藏或凍存備用，長期低溫保存會使陽性率下降。
3.2取出凝集抗原、陰性協同血清、陽性和陰性對照血清以及被檢血清，在25℃"28℃下放置15min"20min。
3.3同時在平板第一排左起1、2區位劃上陽性（ ）和陰性（-）符號，其余各區位依次編上被檢血清號。
3.4用微量移液器在編號區位內按號分別加陽性、陰性對照血清和待檢血清10μL。
3.5在各區位加凝集抗原5μL，靠近血清，互不接觸。
3.6在各區位抗原旁邊加陰性協同血清10μL，互不接觸。
3.7用牙簽將各區位的三種反應物攤成液面（約成人小指甲蓋面積），混合均勻。做一份血清換用一根牙簽。
3.8用手輕輕晃動該平板，在4min"8min內，當陽性對照血清開始出現凝集反應時，對著黑色背景判讀結果。
4判定標準
4.1陽性對照血清出現顆粒清晰的凝集現象。
4.2陰性對照血清沒有可辨認的任何凝集顆粒。
4.3被檢血清凡出現可辨認的凝集顆粒的凝集現象，均判為陽性反應。
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