畜牧人
標題: 赭曲霉毒素快檢 [打印本頁]
作者: 15011925025 時間: 2016-7-13 23:00
標題: 赭曲霉毒素快檢
1. 概要
赭曲霉毒素A主要是由赭曲霉（Aspergillus ochraceus）和純綠青霉 (Penicillium viridicatum)產(chǎn)生的一種霉菌腎毒素，存在于糧食（小麥、玉米、大麥、燕麥、黑麥、大米和黍類等）、花生、蔬菜（豆類）等農(nóng)作物上。赭曲霉毒素A主要侵害動物肝臟與腎臟，引起腎臟損傷，大量的毒素也可能引起動物的腸黏膜炎癥和壞死。產(chǎn)生赭曲霉毒素A的霉菌（如赭曲霉、純綠青霉等）普遍存在，赭曲霉毒素A的污染可以發(fā)生在植物的生長、收獲、加工、貯藏和運輸?shù)冗^程中。中國規(guī)定谷物、豆類及其制品中赭曲霉毒素A不得超過5μg/kg，歐盟規(guī)定谷物、豆類及其制品中赭曲霉毒素A不得超過,3μg/kg。iCheck®赭曲霉毒素A定量快檢卡可以快速定量的檢測小麥及其制品中0-20ppb的赭曲霉毒素A含量。
2. 赭曲霉毒素A定量快檢卡測試包組成
1) iCheck®赭曲霉毒素A快檢卡（25個）
2) OTA微孔（25個）
3) 稀釋緩沖液CSB-1（5mL）
4) 200μL吸頭（50個）
5) OTA電子標定卡（1個）
6) 操作說明書
3. 試驗需要的設備
1）200μL 、1000μL微量移液器（各1支）
2）iCheck® 定量快檢儀(帶零點校正片)
3）多用途旋轉(zhuǎn)搖床 4）計時器 5) 電子稱 6）純水，或二次蒸餾水 7）提取液：甲醇+水（70+30）
8）漏斗 9）定性濾紙
10）50mL離心管
4. 試驗前的準備與儀器標定
1）使用前將快檢卡、緩沖液和待檢樣品恢復至室溫30分鐘。
2）設備零點校正：將零點校正片插入定量快檢儀測定室，點擊“零點校正”即可。
3）設備標定：將OTA電子標定卡插入定量快檢儀卡槽中，點擊讀取“進行標定”即可。測定時，不得將電子標定卡取出。
4）根據(jù)測定樣品數(shù)量，打開包裝袋，取出快檢卡和OTA微孔，將OTA微孔置于微孔架上。
5. 樣品處理與檢測
1）稱取5.0g粉碎(20目過篩)的玉米（或者大米）樣品于50mL離心管中，加入25.0mL 70%甲醇水提取液，置于旋轉(zhuǎn)搖床上旋轉(zhuǎn)振蕩提取5分鐘(或用高速均質(zhì)器均質(zhì)1分鐘，或用手劇烈振蕩3分鐘)。
2）用定性濾紙過濾，取120μL 稀釋緩沖液CSB-1于OTA微孔中，加入濾液30μL，用移液器吸打5次混勻，取100μL加入到快檢卡樣品孔中。
3）37℃（±2℃）反應10分鐘后，立即將快檢卡放入定量快檢儀中，點擊“分析”讀數(shù)，即為樣品實際濃度。
6. 結(jié)果判定
1）檢測范圍：0-20ppb，定量限2.5ppb。
2）此檢測卡為定量快檢卡，若控制線（C）無紅線出現(xiàn)，表明快檢卡失效。
3）如果測定值大于內(nèi)部或標準限量值的80%（如大于4 ppb），請再重新測定一次。如果還是大于上述值，請用儀器法進行確認分析。
4）如果測定值大于20ppb，請將樣品提取液的濾液用70%甲醇水進行稀釋，最后定量快檢儀
的讀數(shù)乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品實際濃度。
7. 注意事項
1) 快檢卡在保質(zhì)期內(nèi)一次性使用。2-8℃冰箱保存使用前應平衡至室溫后再開袋使用。
2) 謹防快檢卡受潮，鋁箔包裝袋受損或快檢卡受潮后，檢測卡不要使用。
3) 盡量不要觸摸快檢卡中央的白色膜。
4) 所有溫育過程應避免陽光直射。
5) 鋁箔包裝袋中的小包是干燥劑，不可誤服。
6) 超過保質(zhì)期不可使用。
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