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畜牧人
標題:
【筆記】診斷醫(yī)師:DAMNIT與樣本采集
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作者:
畜牧人小李
時間:
2016-10-19 10:33
標題:
【筆記】診斷醫(yī)師:DAMNIT與樣本采集
診斷醫(yī)師:DAMNIT與樣本采集
里齊·弗蘭奇 獸醫(yī)學(xué)博士/正大集團
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弗蘭奇博士首先展示了一幅《亡者能夠揭示真相》的油畫,說明病理學(xué)診斷的重要性。在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,進行蓋棺定論的往往是病理學(xué)家。他能告訴人們正確的診斷結(jié)果應(yīng)該是什么,以及治療為何沒有效果。在這幅圖中,醫(yī)患關(guān)系發(fā)生顛倒,亡者復(fù)生,告訴病理學(xué)家哪一步走錯了,因此在疾病診斷中,病理學(xué)家要盡可能的綜合分析采集足夠的、全面的樣本,通過檢測結(jié)果及配合臨床觀察做出準確診斷,從而更好地治療及控制疾病。
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一、診斷人員,獲取樣本
在疾病診斷中三類檢測可以回答你的基本問題:
1、回答“有沒有”的問題需要進行病原檢測。例如,確認臨床樣本里是否含有偽狂犬病毒,或一次非臨床樣本檢測是否呈陰性。
2、要確定動物發(fā)病的病因,需要對病變內(nèi)的病原進行檢測。
3、要確定動物此前有無此類疾病感染,要進行實驗室抗體檢測。
二、診斷人員培訓(xùn)
要想獲得準確診斷,需要對診斷人員進行系統(tǒng)培訓(xùn)
1、識別疾病是防控的基礎(chǔ)
2、在疾病識別過程中,診斷實驗室處在生產(chǎn)者和從業(yè)者之后的第三(最后)一環(huán)
3、診斷人員的主要任務(wù)是確定病因
4、診斷實驗室次級任務(wù)(與主要任務(wù)同等重要)是:提供咨詢/建議,解讀檢測結(jié)果,解讀監(jiān)測結(jié)果。
診斷人員需要具有以下能力:具有辯證思維能力,能夠風險評估,懂得創(chuàng)業(yè)和金融管理,能夠有效溝通,掌握流行病學(xué)知識,在動物方面,掌握營養(yǎng)、育種、養(yǎng)殖、安全和福利等。
三、討論
在疾病診斷中,豬場要盡可能提供足夠多的信息,而不是考檢測人員。診斷人員搜集病癥病史,能夠識別并描述病理損傷,給出形態(tài)診斷。對病變要寫客觀描述:1)描述看到現(xiàn)象,2)、不要解讀,3)、用現(xiàn)在時態(tài)描述,4)、要語句完整,5)、要語法正確。不能用形容食物的詞來形容病變。最好是拍照片給診斷人員,而不是直接描述,因為不同的人有不同的看法。
弗蘭奇博士利用一種新的記憶方法幫助記憶病因,并形成習慣,每次診斷時,均將這些描述在腦子里一項一項的確定。方法如下:
在形成診斷方面:考慮方面以下方面:(其中字母代表英文術(shù)語的首字母,如第一個D 是Degree的首字母 ):D:程度-輕微,中等,顯著,嚴重;D:持續(xù)時間-特急性,急性,亞急性,慢性;D:分布-局灶性,多灶性,彌漫性等;E:分泌液-纖維素性,化膿性,嚴重等;M:修飾-胸膜,腎小球,間質(zhì)等;T:組織-受損器官。
在鑒別診斷方面:即你認為是什么?需要排除不是那些疾病,一般用特殊的詞匯描述現(xiàn)象,如下:
V:血管的;I:發(fā)炎/感染的;N:腫瘤的;D:退化的/缺乏/藥物;I:自發(fā)的/中毒/醫(yī)源性的;C:先天的;A:自體免疫/過敏的/解剖的;T:外傷的;E:內(nèi)分泌的/環(huán)境的;M:代謝的。
D:退化的,發(fā)展的;A:過敏性的、自體免疫的,異常現(xiàn)象;M:代謝性,機械性,管理(環(huán)境的);N:營養(yǎng)的,腫瘤的;I:感染性,免疫媒介性,炎癥性,先天性,醫(yī)源性;T:毒性的,外傷的。
要想熟練掌握以上方式,最好的方法是每一次均這樣一項一項的考慮問題,最后形成習慣。
在診斷種類方面:
先推斷性診斷再實驗室確診。
1)、臨床或推定性診斷:僅根據(jù)癥狀和病史判斷動物潛在疾病
2)、形態(tài)診斷:是病變的總結(jié),但通常不描述導(dǎo)致病變的原因
3)、定位診斷:這類檢測可以簡單概括為兩個詞,病原體和病變位置(例如,分枝桿菌腸炎)
4)、病因?qū)W:這類僅僅是病原體,或病原,并不需要器官,分布等其他信息(例如,結(jié)核肝腸)
5)、確診疾?。哼@類診斷給出的疾病名稱都比較口語(例如,約內(nèi)氏?。约毦阅c炎),是最終診斷。
在確診性診斷時需要收集各種信息,將信息按照優(yōu)先等級分類,最終實驗室確診。
四、形成診斷
形成診斷有四步,臨床人員
1、收集所有關(guān)于動物信息,創(chuàng)建癥狀列表
2、列出所有造成病癥的可能原因
3、將最有可能致病原因放在列表第一位
4、將可能致病原因一一進行排除/治療,從列表上最顯著癥狀開始從上向下進行
5、排除---實際上就是用檢測和其他科學(xué)手段確定一項癥狀是否可以從臨床上忽略
五、科學(xué)與實踐
診斷人員需要具有疾病常識和實踐知識。在疾病常識方面需要具有以下科學(xué)(背景知識)知識:1)病因?qū)W,2)疾病發(fā)病機理,3)病理生理學(xué),4)其他科學(xué)學(xué)科。在實踐:臨床評估方面,要注意:1)觀察農(nóng)場,2)觀察豬群,3)觀察個體豬只,三者相互結(jié)合。
病因?qū)W方面,掌握感染疾病病原體:病毒、細菌、真菌、寄生蟲、朊病毒,了解你所管理是哪種疾???熟練掌握疾病發(fā)病機理及病理生理學(xué),這樣就知道發(fā)病時需要采哪些樣品,有利于準確診斷。比如在PED感染后8小時通過免疫組化可檢測到病毒,而感染后36小時免疫組化檢測到病毒很少,不利于疾病診斷。
六、疾病調(diào)查選材討論
1)、搜集病癥病史2)、描述病變,給出形態(tài)診斷3)、討論鑒別診斷4)、搜集最佳樣本送往實驗室5)、結(jié)果解讀,給出病因?qū)W診斷6)、疾病確診
七、疾病診斷臨床案例
隨后弗蘭奇博士通過三個具體疾病診斷案例來說明其疾病診斷過程,具體如下:
案例1,臨床病史:
一輛轉(zhuǎn)豬車裝了187頭出欄豬前往屠宰場。抵達時已有80%出現(xiàn)跛足;25-30%出現(xiàn)蹄部出現(xiàn)水泡病變。
隨后追蹤了上游7個農(nóng)場,沒有出現(xiàn)發(fā)病。
按照:“六”中六個方面一一考慮,即搜集病癥病史,描述病變,給出形態(tài)診斷……
在鑒別診斷方面考慮:口蹄疫、水泡性口炎病毒、水皰性發(fā)診、豬水皰疹、化學(xué)或熱燒傷(如接觸石灰)。
選送樣本:1)血清,2)、血樣(EDTA抗凝血和肝素抗凝血、3)拭子、4)水皰液、5)組織(扁桃體,淋巴結(jié),皮膚)
實驗室檢測結(jié)果:
1)、血清:口蹄疫、水泡性口炎病毒、水皰性發(fā)診、豬水皰疹均為陰性。
2)、拭子和組織:口蹄疫陰性;水泡性口炎病毒陰性;水皰病實時RT-PCR檢測陰性;部分細小病毒PCR檢測陽性;部分腸道病毒PCR檢測陽性;部分豬PCV-2 PCR檢測陽性;所有塞內(nèi)卡谷病毒PCR陽性;口蹄疫、水泡性口炎病毒、豬水皰病原陰性。
最終診斷為:原發(fā)性皰疹病-可能由塞尼卡病毒引起
案例2,臨床病史
20%的豬感染伴隨發(fā)燒,萎靡厭食癥狀;5%豬有便秘或腹瀉癥狀;10%豬有結(jié)膜炎;皮膚充血;自上周有弱仔及流產(chǎn)母豬;有些仔豬有顫抖癥狀;過去兩周死亡13例豬子。
剖檢:扁桃體多灶性壞死,淋巴結(jié)大理石樣。
鑒別診斷:考慮以下疾?。?、經(jīng)典豬瘟2、非洲豬瘟3、豬繁殖與呼吸綜合癥4、豬皮炎腎病綜合癥5、斷奶豬多系統(tǒng)衰弱綜合癥6、偽狂犬7、沙門氏菌病8、豬紅斑丹毒絲菌
9、多殺性巴氏桿菌10、副豬嗜血桿菌11、鏈球菌12、附紅細胞體病13、中毒14、滅鼠靈中毒15、重金屬中毒
診斷樣本:1、血清2、扁桃體3、扁桃體刮片4、淋巴結(jié)-咽后/下顎/腸胃/腸系膜5、全血-肝素血(VI),抗凝血樣(PCR)6、脾臟7、腎臟8、回腸末端
實驗室檢測結(jié)果:豬水皰病陰性,藍耳陽性,豬瘟陽性,部分細小病毒陽性,部分圓環(huán)病毒陽性,所有塞內(nèi)卡谷病毒陰性,口蹄疫、水泡性口炎病毒、水皰病均為陰性,細菌學(xué)檢測陰性。
最終診斷為豬瘟感染,其他事是繼發(fā)感染。
經(jīng)典豬瘟,送檢樣本
1)、血清2)、全血-肝素血(綠試管):VI檢測 ;抗凝血(紫試管):PCR檢測3)、拭鼻子4)、扁桃體刮片5)、組織(新鮮&固定)-淋巴結(jié),脾臟,扁桃體 -肝,腎,肺,-回腸末端
組織樣本:
固定組織:1、10%福爾馬林中性緩沖液,2、福爾馬林和組織比例10:1,3、固定二十四小時
新鮮組織:1、維持冷鏈保存2、盡快將組織和拭子裝入有冰袋容器
八、總結(jié):
診斷中需要獲取最佳樣本:如果不確定選取哪個樣本,使用哪個試管或要求發(fā)現(xiàn)檢測……請聯(lián)系你的診斷實驗室或同事,獲取建議。
學(xué)到什么:1)、解剖所有死豬2)、知道何時需要幫助3)、如果不知道取什么樣本可取全血樣和全組織樣本。將過濾性器官全部采集一套(肺、肝、腎、脾及淋巴結(jié)),以及將受到感染的所有組織樣本均采集。
樣品采集開始之前:1)、在實驗室檢測測試規(guī)格:需要的樣本、有無特殊媒介、溫度2)、搜集所有物料:預(yù)備標記樣本容器3)、準備好個人防護裝備:衣褲相連工作服,鞋類、手套、口罩,面罩。
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臨床診斷與實驗室檢測是當前規(guī)?;i場疫病防控的重要手段。作為實驗室檢測人員需要具備哪些素質(zhì),才能更好的做疾病的精準診斷,基礎(chǔ)知識如:病原學(xué)、解剖學(xué)、病理學(xué)、分子生物學(xué)、流行病學(xué)和其他學(xué)科等知識。
但為了精準的診斷,需要從以下幾個方面做好:首先了解豬場周邊疫情(情況大數(shù)據(jù)),本場既往病史、臨床癥狀、免疫方案和保健程序、采取的措施和生產(chǎn)數(shù)據(jù)等進行初步診斷,其次根據(jù)臨床的初步診斷采集適宜的,足夠的檢測樣品,送至實驗室檢進行驗證和診斷,討論和鑒別診斷,最終確診,第三檢測結(jié)果出來后,因地制宜制定具體的防控舉措。
疾病診斷必須將實驗室檢測數(shù)據(jù)、生產(chǎn)數(shù)據(jù)與臨床疾病觀察結(jié)合起來分析,最終出具適合豬場的解決方案。而當前實驗檢測普遍存在的兩個問題:一是樣品采集不全面(特別是養(yǎng)殖場送檢樣品的,未送典型癥狀樣品,部分豬場采集死亡豬只病料,未送檢發(fā)病活豬剖檢病料),二是檢測數(shù)據(jù)未能與臨床實際結(jié)合,這樣均導(dǎo)致了檢測結(jié)果不能很好的指導(dǎo)生產(chǎn)實際。因此需要檢測機構(gòu)做好相關(guān)人員的培訓(xùn)工作及形成實驗室檢測人員與臨床獸醫(yī)有機結(jié)合和相互對接的機制,使檢測真正能發(fā)揮其解決豬場實際問題的效力。
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