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畜牧人

標(biāo)題: 再求飼料中TBA值的測(cè)定方法一個(gè) [打印本頁(yè)]
作者: 綠緣    時(shí)間: 2006-3-7 19:35
標(biāo)題: 再求飼料中TBA值的測(cè)定方法一個(gè)
[i=s] 本帖最后由 szhilei 于 2009-9-8 15:06 編輯 [/i]

過氧化值尚未解決，再急求飼料中TBA值測(cè)定方法，大蝦們多多指教啊！                  http://www.cqnsfzw.com/thread-175323-1-2.html 看一下上面這個(gè)帖子
作者: 綠緣    時(shí)間: 2006-3-9 10:29
標(biāo)題: re:哦？沒有人知道嗎？TBA值又叫硫代巴...
哦？沒有人知道嗎？
TBA值又叫硫代巴比妥值，在醫(yī)院里面是血液的一項(xiàng)指標(biāo)，他們用試劑盒去做，油脂中也有國(guó)標(biāo)方法，但是飼料中的可溶性糖對(duì)其吸光值影響很大，不知道有什么合適的方法　
作者: 粗蛋白    時(shí)間: 2006-3-9 11:52
標(biāo)題: re:沒接觸過...期待知道的朋友快快到來(lái)!!
沒接觸過...期待知道的朋友快快到來(lái)!!
作者: 綠緣    時(shí)間: 2006-3-9 14:32
標(biāo)題: re:9494,知道的朋友趕快來(lái)啊！！！
9494,知道的朋友趕快來(lái)啊！！！
作者: 紫末    時(shí)間: 2006-3-10 23:11
標(biāo)題: re:我也沒有接觸過這方面的檢測(cè).誰(shuí)能幫忙呢?
我也沒有接觸過這方面的檢測(cè).誰(shuí)能幫忙呢?
作者: 綠緣    時(shí)間: 2006-3-17 19:00
標(biāo)題: re:我來(lái)發(fā)一個(gè)吧植物中的植物組織中丙二醛...
我來(lái)發(fā)一個(gè)吧植物中的
植物組織中丙二醛含量的測(cè)定
植物器官衰老或在逆境下遭受傷害，往往發(fā)生膜脂過氧化作用，丙二醛（MDA）是膜脂過氧化的最終分解產(chǎn)物，從膜上產(chǎn)生的位置釋放出后，與蛋白質(zhì)、核酸起反應(yīng)修飾其特征；使纖維素分子間的橋鍵松馳，或抑制蛋白質(zhì)的合成。MDA的積累可能對(duì)膜和細(xì)胞造成一定的傷害。
原理
丙二醛（MDA）是常用的膜脂過氧化指標(biāo)，在酸性和高溫度條件下，可以與硫代巴比妥酸（TBA）反應(yīng)生成紅棕色的三甲川（3,5,5-三甲基惡唑2,4-二酮），其最大吸收波長(zhǎng)在532nm。但是測(cè)定植物組織中MDA時(shí)受多種物質(zhì)的干擾，其中最主要的是可溶性糖，糖與TBA顯色反應(yīng)產(chǎn)物的最大吸收波長(zhǎng)在450nm，532nm處也有吸收。植物遭受干旱、高溫、低溫等逆境脅迫時(shí)可溶性糖增加，因此測(cè)定植物組織中MDA—TBA反應(yīng)物質(zhì)含量時(shí)一定要排除可溶性糖的干擾。低濃度的鐵離子能夠顯著增加TBA與蔗糖或MDA顯色反應(yīng)物在532、450nm處的消光度值，所以在蔗糖、MDA與TBA顯色反應(yīng)中需一定量的鐵離子，通常植物組織中鐵離子的含量為100～300μg/g DW，根據(jù)植物樣品量和提取液的體積，加入Fe3＋的終濃度為0.5μmol/L。A. 直線回歸法
MDA與TBA顯色反應(yīng)產(chǎn)物在450nm波長(zhǎng)下的消光度值為零。不同濃度的蔗糖（0～25mmol/L）與TBA顯色反應(yīng)產(chǎn)物在450nm的消光度值與532nm和600nm處的消光度值之差成正相關(guān)，配制一系列濃度的蔗糖與TBA顯色反應(yīng)后，測(cè)定上述三個(gè)波長(zhǎng)的消光度值，求其直線方程，可求算糖分在532nm處的消光度值。UV-120型紫外可見分光光度計(jì)的直線方程為：
Y532＝﹣0.00198＋0.088D450 ①
B．雙組分分光光度計(jì)法
據(jù)朗伯-比爾定律：D＝kCL，當(dāng)液層厚度為1cm時(shí)，k=D/C，k稱為該物質(zhì)的比吸收系數(shù)。當(dāng)某一溶液中有數(shù)種吸光物質(zhì)時(shí)，某一波長(zhǎng)下的消光度值等于此混合液在該波長(zhǎng)下各顯色物質(zhì)的消光度之和。
已知蔗糖與TBA顯色反應(yīng)產(chǎn)物在450nm和532nm波長(zhǎng)下的比吸收系數(shù)分別為85.40，7.40。MDA在450nm波長(zhǎng)下無(wú)吸收，故該波長(zhǎng)的比吸收系數(shù)為0，532nm波長(zhǎng)下的比吸收系數(shù)為155，根據(jù)雙組分分光度計(jì)法建立方程組，求解方程得計(jì)算公式：
C1(mmol/L)=11.71D450 ②
C2(μmol/L)=6.45(D532－D600)－0.56D450 ③
式中 C1－為可溶性糖的濃度；
C2－為MDA的濃度；
D450、D532、D600分別代表450nm、532nm和600nm波長(zhǎng)下的消光度值。
試劑
10%三氯乙酸（TCA）；0.6%硫代巴比妥酸，先加少量的氫氧化鈉（1mol/L）溶解，再用10％的三氯乙酸定容；石英砂。
方法
1. 實(shí)驗(yàn)材料 受干旱、高溫、低溫等逆境脅迫的植物葉片或衰老的植物器官。
2. MDA的提取 稱取剪碎的試材1g，加入2ml 10％TCA和少量石英砂，研磨至勻漿，再加8ml TCA進(jìn)一步研磨，勻漿離心（4000×g）10min，上清液為樣品提取液。
3. 顯色反應(yīng)和測(cè)定 吸取離心的上清液2ml（對(duì)照加2ml蒸餾水），加入2ml 0.6%TBA溶液，混勻物于沸水浴上反應(yīng)15min，迅速冷卻后再離心。取上清液測(cè)定532nm、600nm和450nm波長(zhǎng)下的消光度。
4. 計(jì)算含量
(1) 直線方程法 按公式①求出樣品中糖分在532nm處的消光度值Y532，用實(shí)測(cè)532nm的消光度值減去600nm非特異吸收的消光度值再減去Y532，其差值為測(cè)定樣品中MDA-TBA反應(yīng)產(chǎn)物在532nm的消光度值。按MDA在532nm處的毫摩爾消光系數(shù)為155換算求出提取液中MDA濃度。
(2) 雙組分分光光度法 按公式③可直接求得植物樣品提取液中MDA的濃度。
用上述任一方法求得MDA的濃度，根據(jù)植物組織的重量計(jì)算測(cè)定樣品中MDA的含量：
MDA（μmol/g FW）＝C×V/W
式中 C－MDA濃度（μＭ）；
V－提取液總體積（ml）；
W－植物組織鮮重（g）。
作者: 泥鰍    時(shí)間: 2006-7-25 11:33
標(biāo)題: 求原料新鮮度-ＴＢＡ的測(cè)定方法
求原料新鮮度-ＴＢＡ的測(cè)定方法
作者: 綠緣    時(shí)間: 2006-7-25 13:20
標(biāo)題: re:呵呵，這個(gè)東東以前我也求過，就是沒人給，...
呵呵，這個(gè)東東以前我也求過，就是沒人給，樓上的要耐心等待高人的出現(xiàn)哦！
作者: 泥鰍    時(shí)間: 2006-7-25 14:19
標(biāo)題: re:好的，我會(huì)耐心的等待，我相信會(huì)有貴人的
好的，我會(huì)耐心的等待，我相信會(huì)有貴人的
作者: 居心良苦    時(shí)間: 2006-7-26 11:42
標(biāo)題: re:別求了，不會(huì)有的。原料不同，即使有測(cè)定指...
別求了，不會(huì)有的。原料不同，即使有測(cè)定指標(biāo)，指標(biāo)也不一樣；即使統(tǒng)一原料，測(cè)新鮮度指標(biāo)，也不會(huì)有標(biāo)準(zhǔn)，沒有標(biāo)準(zhǔn)的東西，怎么去表達(dá)，去要求別人。
真要采購(gòu)好原料，就要品管采購(gòu)多溝通，或者干脆將兩個(gè)部門合在一塊。現(xiàn)在很多公司做統(tǒng)一采購(gòu)就有這方面的味道
作者: 泥鰍    時(shí)間: 2006-7-28 19:14
標(biāo)題: re:我認(rèn)為能控制的還是要控制一下，原料差別太...
我認(rèn)為能控制的還是要控制一下，原料差別太大了．
作者: 綠緣    時(shí)間: 2006-7-29 12:25
標(biāo)題: re:植物組織中丙二醛含量的測(cè)定植物器官衰...
植物組織中丙二醛含量的測(cè)定
植物器官衰老或在逆境下遭受傷害，往往發(fā)生膜脂過氧化作用，丙二醛（MDA）是膜脂過氧化的最終分解產(chǎn)物，從膜上產(chǎn)生的位置釋放出后，與蛋白質(zhì)、核酸起反應(yīng)修飾其特征；使纖維素分子間的橋鍵松馳，或抑制蛋白質(zhì)的合成。MDA的積累可能對(duì)膜和細(xì)胞造成一定的傷害。
原理
丙二醛（MDA）是常用的膜脂過氧化指標(biāo)，在酸性和高溫度條件下，可以與硫代巴比妥酸（TBA）反應(yīng)生成紅棕色的三甲川（3,5,5-三甲基惡唑2,4-二酮），其最大吸收波長(zhǎng)在532nm。但是測(cè)定植物組織中MDA時(shí)受多種物質(zhì)的干擾，其中最主要的是可溶性糖，糖與TBA顯色反應(yīng)產(chǎn)物的最大吸收波長(zhǎng)在450nm，532nm處也有吸收。植物遭受干旱、高溫、低溫等逆境脅迫時(shí)可溶性糖增加，因此測(cè)定植物組織中MDA—TBA反應(yīng)物質(zhì)含量時(shí)一定要排除可溶性糖的干擾。低濃度的鐵離子能夠顯著增加TBA與蔗糖或MDA顯色反應(yīng)物在532、450nm處的消光度值，所以在蔗糖、MDA與TBA顯色反應(yīng)中需一定量的鐵離子，通常植物組織中鐵離子的含量為100～300μg/g DW，根據(jù)植物樣品量和提取液的體積，加入Fe3＋的終濃度為0.5μmol/L。A. 直線回歸法
MDA與TBA顯色反應(yīng)產(chǎn)物在450nm波長(zhǎng)下的消光度值為零。不同濃度的蔗糖（0～25mmol/L）與TBA顯色反應(yīng)產(chǎn)物在450nm的消光度值與532nm和600nm處的消光度值之差成正相關(guān)，配制一系列濃度的蔗糖與TBA顯色反應(yīng)后，測(cè)定上述三個(gè)波長(zhǎng)的消光度值，求其直線方程，可求算糖分在532nm處的消光度值。UV-120型紫外可見分光光度計(jì)的直線方程為：
Y532＝﹣0.00198＋0.088D450 ①
B．雙組分分光光度計(jì)法
據(jù)朗伯-比爾定律：D＝kCL，當(dāng)液層厚度為1cm時(shí)，k=D/C，k稱為該物質(zhì)的比吸收系數(shù)。當(dāng)某一溶液中有數(shù)種吸光物質(zhì)時(shí)，某一波長(zhǎng)下的消光度值等于此混合液在該波長(zhǎng)下各顯色物質(zhì)的消光度之和。
已知蔗糖與TBA顯色反應(yīng)產(chǎn)物在450nm和532nm波長(zhǎng)下的比吸收系數(shù)分別為85.40，7.40。MDA在450nm波長(zhǎng)下無(wú)吸收，故該波長(zhǎng)的比吸收系數(shù)為0，532nm波長(zhǎng)下的比吸收系數(shù)為155，根據(jù)雙組分分光度計(jì)法建立方程組，求解方程得計(jì)算公式：
C1(mmol/L)=11.71D450 ②
C2(μmol/L)=6.45(D532－D600)－0.56D450 ③
式中 C1－為可溶性糖的濃度；
C2－為MDA的濃度；
D450、D532、D600分別代表450nm、532nm和600nm波長(zhǎng)下的消光度值。
試劑
10%三氯乙酸（TCA）；0.6%硫代巴比妥酸，先加少量的氫氧化鈉（1mol/L）溶解，再用10％的三氯乙酸定容；石英砂。
方法
1. 實(shí)驗(yàn)材料 受干旱、高溫、低溫等逆境脅迫的植物葉片或衰老的植物器官。
2. MDA的提取 稱取剪碎的試材1g，加入2ml 10％TCA和少量石英砂，研磨至勻漿，再加8ml TCA進(jìn)一步研磨，勻漿離心（4000×g）10min，上清液為樣品提取液。
3. 顯色反應(yīng)和測(cè)定 吸取離心的上清液2ml（對(duì)照加2ml蒸餾水），加入2ml 0.6%TBA溶液，混勻物于沸水浴上反應(yīng)15min，迅速冷卻后再離心。取上清液測(cè)定532nm、600nm和450nm波長(zhǎng)下的消光度。
4. 計(jì)算含量
(1) 直線方程法 按公式①求出樣品中糖分在532nm處的消光度值Y532，用實(shí)測(cè)532nm的消光度值減去600nm非特異吸收的消光度值再減去Y532，其差值為測(cè)定樣品中MDA-TBA反應(yīng)產(chǎn)物在532nm的消光度值。按MDA在532nm處的毫摩爾消光系數(shù)為155換算求出提取液中MDA濃度。
(2) 雙組分分光光度法 按公式③可直接求得植物樣品提取液中MDA的濃度。
用上述任一方法求得MDA的濃度，根據(jù)植物組織的重量計(jì)算測(cè)定樣品中MDA的含量：
MDA（μmol/g FW）＝C×V/W
式中 C－MDA濃度（μＭ）；
V－提取液總體積（ml）；
W－植物組織鮮重（g）。
作者: 綠緣    時(shí)間: 2006-7-29 12:25
標(biāo)題: re:可以參考一下
可以參考一下
作者: 泥鰍    時(shí)間: 2006-7-30 11:39
標(biāo)題: re:非常感謝謝謝綠緣版主！
非常感謝謝謝綠緣版主！
作者: yyt    時(shí)間: 2006-8-3 16:52
標(biāo)題: re:有人說沒有標(biāo)準(zhǔn),我還真找到一分,但是不知...
有人說沒有標(biāo)準(zhǔn),我還真找到一分,但是不知道是否滿足大家的需要
名稱過氧化值（%）TBA值（A532/kg樣品）皂化率（%）
魚　粉 ＜0.05 ＜1000 ＞85
烏賊內(nèi)臟 ＜0.05 ＜1000 ＞90
蝦殼粉 ＜0.05 ＜2000 ＞80
魚　油 ＜0.05 ＜1000 ＞95
豬　油 ＜0.05 ＜1000 ＞90
混合油 ＜0.05 ＜1000 ＞85
肉　粉 ＜0.05 ＜1000 ＞85
肉骨粉 ＜0.05 ＜1000 ＞85
油渣粉 ＜0.05 ＜1000 ＞85
玉　米 ＜0.05 ＜1000 ＞90
麥　麩 ＜0.05 ＜1000 ＞90
花生粕 ＜0.05 ＜1000 ＞ 85
磷脂類 ＜0.1 ＜2000 ＞80
米　糠 　＜0.1 ＜1000 ＞80
芝麻粕 　＜0.1 ＜1000 ＞80
谷殼粉 ＜0.05 ＜1000 －
豆　油 ＜0.05 ＜2000 ＞95
菜　油 ＜0.05 ＜2000 ＞95
椰子油 ＜0.02 ＜1000 ＞95
如果不錯(cuò)的話,版主一定要給我獎(jiǎng)勵(lì)哦,至少加1000幣.否則下次就不再奉獻(xiàn)了
作者: 綠緣    時(shí)間: 2006-8-3 21:11
標(biāo)題: re:A532/kg樣品，這個(gè)單位是什么意思啊...
A532/kg樣品，這個(gè)單位是什么意思啊？
作者: 綠緣    時(shí)間: 2006-8-5 14:49
標(biāo)題: re:沒有下載看，猜想娟版的測(cè)定方法是豬油TB...
沒有下載看，猜想娟版的測(cè)定方法是豬油TBA值測(cè)定的國(guó)標(biāo)方法，用于飼料原料不太合適。
如果想用的話必須現(xiàn)將脂肪抽出來(lái)，這樣就麻煩多了，呵呵
作者: 紫末    時(shí)間: 2006-8-5 14:59
標(biāo)題: re:綠緣版主說的很對(duì),比較麻煩....
綠緣版主說的很對(duì),比較麻煩.
采用Tarladgis(1964)的蒸餾方法測(cè)定，結(jié)果用每kg樣品中丙二醛的mg數(shù)來(lái)表示（mg/kg）。取樣品25g，加入75mgBHA磨碎，將10g磨碎的樣品用試劑I[2]和蒸餾水（1：3 v:v）混合液40ml,移至300ml長(zhǎng)頸瓶中充分混合，用4mol/L鹽酸調(diào)節(jié)pH=4，室溫放置30～60min，再用4mol/L鹽酸調(diào)整pH=1.3，滴加幾滴消泡劑，水蒸氣蒸餾收集200ml蒸餾液，取5ml于帶塞的試管中，加入0.02mol/LTBA溶液5ml，40℃，15h發(fā)色，在533nm處測(cè)定吸光值（ABS）。則：

TBA值（丙二醛mg/kg）=ABS×18.7×200/5×1/W

其中：W---樣品重量

作者: 綠緣    時(shí)間: 2006-8-6 09:42
標(biāo)題: re:娟版方法里面的試劑I[2]指的是什么啊？
娟版方法里面的試劑I[2]指的是什么啊？
作者: 紫末    時(shí)間: 2006-8-6 11:57
標(biāo)題: re:我也不知道
我也不知道
作者: yyt    時(shí)間: 2006-8-7 09:24
標(biāo)題: re:王博說話算數(shù)嗎，我很在乎的，可以多在貴店...
王博說話算數(shù)嗎，我很在乎的，可以多在貴店消費(fèi)啊
A532／KG是波長(zhǎng)532nm下測(cè)定值的意識(shí)吧
作者: 山中的漫游者    時(shí)間: 2006-8-7 10:03
標(biāo)題: re:我說完了，馬上就給綠緣1500幣子啊，呵...
我說完了，馬上就給綠緣1500幣子啊，呵呵，從來(lái)都是算數(shù)的
作者: 泥鰍    時(shí)間: 2006-8-9 00:43
標(biāo)題: re:真沒想到,我的貴人這么多!感謝你們!謝謝...
真沒想到,我的貴人這么多!感謝你們!謝謝各位老師的指導(dǎo)
作者: 山中的漫游者    時(shí)間: 2006-8-9 10:33
標(biāo)題: re:論壇里大家都是兄弟姐妹，都很熱情而赤誠(chéng)，...
論壇里大家都是兄弟姐妹，都很熱情而赤誠(chéng)，凡是知道的，都會(huì)與大家分享，--因此每一個(gè)人都很開心，為你們高興啊
作者: jifengjie    時(shí)間: 2007-1-24 15:58
因此，利用醛反應(yīng)可以對(duì)油脂衛(wèi)生質(zhì)量進(jìn)行判定。
試劑：濃鹽酸（不含氯化亞硝酰），分析純；0.1％間苯三酚乙醇溶液：取0.1克間苯三酚（分析純）溶于100ml無(wú)水乙醇（分析純）中，搖勻，置棕色試劑瓶中避光保存。
操作方法：取具有代表性的油脂樣品2ml于試管中（要求試管具塞、最好有刻度），加入1ml濃鹽酸，加塞劇烈振搖30秒，再加入0.1％間苯三酚乙醇溶液1ml，加塞后再同樣劇烈振搖30秒。然后，靜止放置，溶液分層，10分鐘后觀察顏色變化。
結(jié)果判定：酸敗油樣下層為桃紅色或紅色；新鮮油樣為淺粉紅色、橙色或黃色。
說明：
1、        注意取樣的代表性。
2、        本方法適用于原料品控30％取樣，具有快速、方便、經(jīng)濟(jì)的特點(diǎn)。但是只做定性、快速檢測(cè)的參考。
3、        顏色受個(gè)人感觀而有差異。對(duì)于初學(xué)者，建議在做酸價(jià)或者碘量法測(cè)定過氧化值的基礎(chǔ)上再采用本法。或者，用兩個(gè)差異顯著（如新鮮和已經(jīng)酸敗）的油樣先做比較，以更好進(jìn)行質(zhì)量判定。
4、        反應(yīng)時(shí)間要準(zhǔn)確、一致，每次加入試劑要混合均勻、完全。
5、        請(qǐng)小心操作，保護(hù)個(gè)人安全。
供參考吧。我做過油脂的，還行。
作者: cuomulake    時(shí)間: 2007-1-30 17:35
我測(cè)定過飼料的新鮮度，用的是糧食工業(yè)判定陳化糧的方法，可以上網(wǎng)去查，記得好像要抽提比較復(fù)雜
作者: xys123456    時(shí)間: 2007-8-3 11:10
油脂TBA值的測(cè)定方法

1        原理
油脂受到光、熱、空氣中氧的作用，發(fā)生酸敗反應(yīng)，分解出醛、酸之類的化合物。丙二醛就是分解產(chǎn)物的一種，它能與硫代巴比妥酸(TBA)作用生成粉紅色化合物，在532nm波長(zhǎng)處有吸收高峰，利用此性質(zhì)即能測(cè)出丙二醛含量，從而推導(dǎo)出油脂酸敗的程度。
2        試劑
2.1硫代巴比妥酸(TBA)水溶液：準(zhǔn)確稱取TBA 0.288g溶于水中，并稀釋至100ml（如TBA不易溶解，可加熱至全溶澄清，然后稀釋至100ml），相當(dāng)于0.02mol/L；
2.2  三氯乙酸混合液：準(zhǔn)確稱取三氯乙酸（分析純）7.5g及 0.1g EDTA，用水溶解，稀釋至100.00ml；
2.3  氯仿（分析純）；
2.4  丙二醛標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取0.315g 1，1，3，3-四乙氧基丙烷，溶解后稀釋至1000.00ml，此溶液每ml相當(dāng)于丙二醛100μg，置于冰箱內(nèi)保存。準(zhǔn)確吸取10ml，稀釋至100.00ml，此溶液每ml相當(dāng)于丙二醛10微克(μg)，備用。
3        操作步驟
3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
準(zhǔn)確吸取每ml相當(dāng)于丙二醛10μg的標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml置于納氏比色管中，加水至總體積為5ml，加入5ml TBA溶液，然后按樣品測(cè)定步驟進(jìn)行，測(cè)得光密度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
3.2樣品測(cè)定：
準(zhǔn)確稱取融化均勻的油脂樣品30.0g，置于100ml具塞三角瓶?jī)?nèi)，加入20.0ml三氯乙酸混合液，振搖半小時(shí)（保持油脂融溶狀態(tài)，如冷結(jié)可在70℃水浴上略微加熱使之融化后繼續(xù)振搖）用雙層濾紙過濾，除去油脂。濾液重復(fù)用雙層濾紙過濾一次。
準(zhǔn)確移取上述濾液5.0ml置于25ml比色管內(nèi)，加入5.0 mlTBA溶液，混勻，加塞，置于90℃水浴內(nèi)保溫40min，取出，冷卻1h，移入小試管內(nèi)，離心5min，上清液傾入25ml納氏比色管中，加入5.0ml氯仿，搖勻，靜置，分層，吸出上清液于532nm波長(zhǎng)比色，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線得到微克數(shù)（同時(shí)作空白試驗(yàn)）。
4        計(jì)算
丙二醛含量（mg/kg）按下式計(jì)算
    丙二醛含量（mg/kg）=
式中:C—-從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得丙二醛的微克數(shù)(ug)
     m---樣品質(zhì)量（g）

[ 本帖最后由 xys123456 于 2007-8-3 11:15 編輯 ]
作者: xys123456    時(shí)間: 2007-8-3 11:13
油脂TBA值的測(cè)定方法

1        原理
油脂受到光、熱、空氣中氧的作用，發(fā)生酸敗反應(yīng)，分解出醛、酸之類的化合物。丙二醛就是分解產(chǎn)物的一種，它能與硫代巴比妥酸(TBA)作用生成粉紅色化合物，在532nm波長(zhǎng)處有吸收高峰，利用此性質(zhì)即能測(cè)出丙二醛含量，從而推導(dǎo)出油脂酸敗的程度。
2        試劑
2.1硫代巴比妥酸(TBA)水溶液：準(zhǔn)確稱取TBA 0.288g溶于水中，并稀釋至100ml（如TBA不易溶解，可加熱至全溶澄清，然后稀釋至100ml），相當(dāng)于0.02mol/L；
2.2  三氯乙酸混合液：準(zhǔn)確稱取三氯乙酸（分析純）7.5g及 0.1g EDTA，用水溶解，稀釋至100.00ml；
2.3  氯仿（分析純）；
2.4  丙二醛標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取0.315g 1，1，3，3-四乙氧基丙烷，溶解后稀釋至1000.00ml，此溶液每ml相當(dāng)于丙二醛100μg，置于冰箱內(nèi)保存。準(zhǔn)確吸取10ml，稀釋至100.00ml，此溶液每ml相當(dāng)于丙二醛10微克(μg)，備用。
3        操作步驟
3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
準(zhǔn)確吸取每ml相當(dāng)于丙二醛10μg的標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml置于納氏比色管中，加水至總體積為5ml，加入5ml TBA溶液，然后按樣品測(cè)定步驟進(jìn)行，測(cè)得光密度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
3.2樣品測(cè)定：
準(zhǔn)確稱取融化均勻的油脂樣品30.0g，置于100ml具塞三角瓶?jī)?nèi)，加入20.0ml三氯乙酸混合液，振搖半小時(shí)（保持油脂融溶狀態(tài)，如冷結(jié)可在70℃水浴上略微加熱使之融化后繼續(xù)振搖）用雙層濾紙過濾，除去油脂。濾液重復(fù)用雙層濾紙過濾一次。
準(zhǔn)確移取上述濾液5.0ml置于25ml比色管內(nèi)，加入5.0 mlTBA溶液，混勻，加塞，置于90℃水浴內(nèi)保溫40min，取出，冷卻1h，移入小試管內(nèi)，離心5min，上清液傾入25ml納氏比色管中，加入5.0ml氯仿，搖勻，靜置，分層，吸出上清液于532nm波長(zhǎng)比色，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線得到微克數(shù)（同時(shí)作空白試驗(yàn)）。
4        計(jì)算
丙二醛含量（mg/kg）按下式計(jì)算
                     
丙二醛含量（mg/kg）= C*20/5*m

式中:C—-從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得丙二醛的微克數(shù)(ug)
     m---樣品質(zhì)量（g）
作者: zhouqq3    時(shí)間: 2007-8-3 11:29
呵呵，又學(xué)到不少東西哈。
作者: xiaoyanzhu2002    時(shí)間: 2007-8-13 16:29
謝謝各位的寶貴資料。如果能有更多的人上傳一些原料的實(shí)際測(cè)定數(shù)據(jù)就更好了。
作者: fiyi    時(shí)間: 2007-9-6 14:38
標(biāo)題: 回復(fù) #21 xys123456 的帖子
請(qǐng)問原料放的越久，氧化越厲害，TBA值會(huì)如何變化呢？
作者: 一直在路上    時(shí)間: 2007-9-12 16:36
呵呵,只知道魚粉的新鮮度(揮發(fā)性鹽基氮)的方法
作者: fuzhen    時(shí)間: 2007-9-13 14:17
哪位老師知道油脂檢驗(yàn)中TBA、酸價(jià)及過氧化值的關(guān)系，請(qǐng)指導(dǎo)！
作者: 綠緣    時(shí)間: 2007-9-13 16:37
原帖由 fiyi 于 2007-9-6 14:38 發(fā)表
請(qǐng)問原料放的越久，氧化越厲害，TBA值會(huì)如何變化呢？


會(huì)增加
作者: yaogongx    時(shí)間: 2007-9-23 22:17
好麻煩 的東西!沒有接觸過!!!
作者: huanyue1983    時(shí)間: 2007-10-31 21:27
標(biāo)題: TBA測(cè)定 相關(guān)試劑的配制
我想測(cè)定牛肉的TBA值 ，但是不會(huì)配置以下試劑，
     7.5% TCA
     0.1%EDTA
          0.02mol/l TBA
         氯仿
  還請(qǐng)大家?guī)兔Π。?hr noshade size="2" width="100%" color="#808080"> 作者: 宏圖霸業(yè)    時(shí)間: 2008-3-18 01:17
學(xué)習(xí)學(xué)習(xí)再學(xué)習(xí)．．．．．．．．．．．．．．．玉不琢不成器，人不學(xué)不知道．
作者: yunhai    時(shí)間: 2008-3-18 14:11
這個(gè)東東也是在摸索吧，我感覺！不過現(xiàn)在看這種方法是很使用的
作者: playerlzxx    時(shí)間: 2008-11-27 19:21
高手來(lái)吧，幫不了你！
作者: aiwaboy008    時(shí)間: 2008-12-20 16:46
標(biāo)題: 跪求高人交流飼料TBA的測(cè)定方法
跪求高人交流飼料TBA的測(cè)定方法，我是一飼料公司的，在做氧化方面的試驗(yàn)，對(duì)TBA摸索了一段時(shí)間，渴望交流 0759-2323659  小董
作者: 風(fēng)落沙情    時(shí)間: 2008-12-27 22:13
沒做過這方面的檢測(cè)，幫不了你了。
作者: 風(fēng)落沙情    時(shí)間: 2008-12-27 22:44
希望這信息對(duì)樓主有用吧

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)
豬油衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn) GB10146-88
Hygienic standard of lard
中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部1989-01-11批準(zhǔn)   1989-07-01實(shí)施


1 主題內(nèi)容與適用范圍

   本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了豬體脂肪經(jīng)加工熬制成的市售熟豬油的衛(wèi)生要求。　
   本標(biāo)準(zhǔn)適用于經(jīng)獸醫(yī)衛(wèi)生檢驗(yàn)認(rèn)可的生豬的新鮮、潔凈的板油、肉膘、網(wǎng)膜或附著于內(nèi)臟器官的純脂肪組織，單一或多種混合煉制成的食用純潔豬油。

2 引用標(biāo)準(zhǔn)

GB 5009.37 食用植物油衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法

3 感官指標(biāo)

   感官指標(biāo)見表1。
表1

凝固時(shí)色澤、組織狀態(tài) 白色或帶微黃色澤，組織細(xì)膩，呈軟膏狀
融化時(shí)色澤、透明度 微黃色，澄清透明
氣味及滋味 有豬油固有香味及滋味


4 理化指標(biāo)

  理化指標(biāo)見表2。

項(xiàng)目 指標(biāo)
酸價(jià)（mgKOH/g）≤ 1.5
過氧化值（meq/kg）≤ 45016
丙二醛（mg%）≤ 0.25
折射率（40℃） 1.458--1.462

5 檢驗(yàn)方法

5.1 丙二醛:
    本方法適用于測(cè)定豬油中丙二醛。
5.1.1 原理：
    豬油受到光、熱、空氣中氧的作用，發(fā)生酸敗反應(yīng)，分解出醛、酸之類的化合物。丙二醛就是分解產(chǎn)物的一種，它能與TBA（硫代巴比妥酸）作用生成粉紅色化合物，在538nm波長(zhǎng)處有吸收高峰，利用此性質(zhì)即能測(cè)出丙二醛含量，從而推導(dǎo)出豬油酸敗的程度。
5.1.2 試劑：
5.1.2.1 TBA水溶液：準(zhǔn)確稱取TBA（瑞士產(chǎn)品）0.288g溶于水中，并稀釋至100mL（如TBA不易溶解，可加熱至全溶澄清，然后稀釋至100mL），相當(dāng)于0.02M。
5.1.2.2 三氯乙酸混合液：準(zhǔn)確稱取三氯乙酸（分析純）7.5g及0.1gEDTA(乙二胺四乙酸二鈉,分析純)用水溶解,稀釋至100mL。
5.1.2.3 丙二醛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：精確稱取1，1，3，3-四乙氧基丙烷（E.Mesck97%）0.315g，溶解后稀釋至1000mL（每毫升相當(dāng)于丙二醛含量為100μg），置冰箱保存。
5.1.2.4 丙二醛標(biāo)準(zhǔn)使用液：精確移取上述儲(chǔ)備液10mL稀釋至100mL（每毫升相當(dāng)于丙二醛量為10μg）置冰箱備用。
5.1.2.5 氯仿（分析純）。
5.1.3 儀器：
5.1.3.1 恒溫水浴箱；
5.1.3.2 離心機(jī)2000r/min；
5.1.3.3 72型分光光度計(jì)；
5.1.3.4 100mL有蓋三角瓶；
5.1.3.5 25mL納氏比色管；
5.1.3.6 100╳13mm試管；
5.1.3.7 定性濾紙。
5.1.4 操作方法
5.1.4.1 樣品處理：準(zhǔn)確稱取在70℃水浴上融化均勻的豬油液10g，置于100mL有蓋三角瓶?jī)?nèi)，加入50mL三氯乙酸混合液，振搖半小時(shí)（保持豬油融溶狀態(tài)，如冷結(jié)即在70℃水浴上略微加熱使之融化后繼續(xù)振搖）用雙層濾紙過濾，除去油脂、濾液，重復(fù)用雙層濾紙過濾一次。
5.1.4.2 準(zhǔn)確移取上述濾液5mL置于25mL納氏比色管內(nèi)，加入5mLTBA溶液，混勻，加塞，置于90℃水浴內(nèi)保溫40min，取出，冷卻1h，移入小試管內(nèi)，離心5min 上清液傾入25mL納氏比色管內(nèi)，加入5mL氯仿，搖勻，靜止，分層，吸出上清液于538nm波長(zhǎng)處比色（同時(shí)作空白試驗(yàn)）。
5.1.5 計(jì)算
5.1.5.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：用標(biāo)準(zhǔn)丙二醛濃度分別為1μg、2μg、3μg、4μg、5μg作上述步驟處理，根據(jù)得出吸光度讀數(shù)作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
5.1.5.2 樣品測(cè)出的吸光度讀數(shù)，從標(biāo)準(zhǔn)曲線求出相應(yīng)濃度A，然后按下式計(jì)算：
                                A
            丙二醛含量（mg%)= -----------
                                10
式中：A-豬油的相應(yīng)濃度。
5.2 酸價(jià)、過氧化值：
按照GB 5009.37執(zhí)行。
作者: 風(fēng)落沙情    時(shí)間: 2008-12-27 22:54
植物組織或器官中 丙二醛含量的測(cè)定
植物組織或器官在衰老或逆境下遭受傷害，往往發(fā)生膜脂的過氧化作用。膜脂過氧化的指標(biāo)有很多，如丙二醛（MDA）的產(chǎn)生、過氧化物的碘量滴定、氧吸收、共軛雙鍵測(cè)定等。由于MDA的測(cè)定方法簡(jiǎn)便，所以常用來(lái)評(píng)價(jià)植物脂過氧化強(qiáng)弱的指標(biāo)。 測(cè)定組織或器官脂質(zhì)的過氧化反應(yīng)所產(chǎn)生的丙二醛含量時(shí)，通常利用硫代巴比妥酸（TBA）在酸性下加熱與組織中的MDA產(chǎn)生顯色反應(yīng)，反應(yīng)產(chǎn)物是粉紅色的3,5,5-三甲基噁唑2,4-二酮。用分光光度計(jì)測(cè)定532nm及600nm波長(zhǎng)時(shí)的光密度值，根據(jù)光密度的大小可計(jì)算MDA含量。
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br /> 1.掌握植物體內(nèi)丙二醛含量測(cè)定的原理及方法。
2.了解丙二醛積累對(duì)細(xì)胞的傷害

二、實(shí)驗(yàn)原理
逆境→膜脂的過氧化作用→丙二醛

三、實(shí)驗(yàn)步驟
1 MDA的提取      稱2g葉片，加入5ml 磷酸緩沖液（50mmol，pH值為7.8）及少量石英砂，于冰浴中研磨提取，勻漿液以12000g 離心力作用下（4度）離心10min，其上清液即為MDA提取液。
2 MDA的測(cè)定      取1ml MDA提取液，加3ml 27％三氯乙酸和 1ml 2%TBA。混和液在95度水浴中保溫30min后，立即置于冰浴中冷卻，然后離心10min，于波長(zhǎng)532nm和600nm下測(cè)定OD值。

四、結(jié)果計(jì)算
以測(cè)得的OD532減去OD600的非特異吸收值，按155mmol-1cm-1消光系數(shù)計(jì)算MDA含量。 分別計(jì)算衰老和對(duì)照組的值。
  
  MDA濃度(μmol/L)=6.45(D532-D600)-0.56D450

  MDA含量(μmol/g FW)＝
  
  D450、D532、D600分別代表450nm、532nm和600nm波長(zhǎng)下的光密度值。

五、注意事項(xiàng)
1、0.1-0.5％的三氯乙酸對(duì)MDA—TBA反應(yīng)較合適，若高于此濃度，其反應(yīng)液的非專一性吸收偏高；
MDA-TBA顯色反應(yīng)的加熱時(shí)間，最好控制沸水浴10-15min之間。時(shí)間太短或太長(zhǎng)均會(huì)引起532nm下的光吸收值下降；
2、如待測(cè)液渾濁，可適當(dāng)增加離心力及時(shí)間，最好使用低溫離心機(jī)離心。
低濃度的鐵離子能增強(qiáng)MDA與TBA的顯色反應(yīng)，當(dāng)植物組織中鐵離子濃度過低時(shí)應(yīng)補(bǔ)充 Fe3+（最終濃度為0.5 nmol·L-1）
3、可溶性糖與TBA顯色反應(yīng)的產(chǎn)物在532 nm也有吸收（最大吸收在450 nm），當(dāng)植物處于干旱、高溫、低溫等逆境時(shí)可溶性糖含量會(huì)增高，必要時(shí)要排除可溶性糖的干擾。
作者: lgch    時(shí)間: 2008-12-28 10:16
這項(xiàng)指標(biāo)主要是針對(duì)油脂的。原料也可以。廣東的騰冰老師對(duì)這方面研究很透徹的。以前聽過他的一次講座。
作者: lgch    時(shí)間: 2008-12-28 10:19
油脂TBA值的測(cè)定方法

1        原理
油脂受到光、熱、空氣中氧的作用，發(fā)生酸敗反應(yīng)，分解出醛、酸之類的化合物。丙二醛就是分解產(chǎn)物的一種，它能與TBA（硫代巴比妥酸）作用生成粉紅色化合物，在532nm波長(zhǎng)處有吸收高峰，利用此性質(zhì)即能測(cè)出丙二醛含量，從而推導(dǎo)出油脂酸敗的程度。

2        試劑
2.1  TBA水溶液：準(zhǔn)確稱取TBA0.288g溶于水中，并稀釋至100ml（如TBA不易溶解，可加熱至全溶澄清，然后稀釋至100ml），相當(dāng)于0.02M；
2.2  三氯乙酸混合液：準(zhǔn)確稱取三氯乙酸（分析純）7.5g及0.1gEDTA，用水溶解，稀釋至100ml；
2.3  氯仿（分析純）；
2.4  丙二醛標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取0.315g1，1，3，3-四乙氧基丙烷，溶解后稀釋至1000ml，此溶液每ml相當(dāng)于丙二醛100μg，置于冰箱內(nèi)保存。準(zhǔn)確吸取10ml，稀釋至100ml，此溶液每ml相當(dāng)于丙二醛10μg，備用。

3        操作步驟
（1）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
準(zhǔn)確吸取每相當(dāng)于丙二醛10μg的標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml置于納氏比色管中，加水至總體積為5ml，加入5mlTBA溶液，然后按樣品測(cè)定步驟進(jìn)行，測(cè)得光密度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
（2）樣品測(cè)定：
準(zhǔn)確稱取融化均勻的油脂樣品5-10g，置于100ml有蓋三角瓶?jī)?nèi)，加入50ml三氯乙酸混合液，振搖半小時(shí)（保持油脂融溶狀態(tài)，如冷結(jié)即在70℃水浴上略微加熱使之融化后繼續(xù)振搖）趁熱用雙層濾紙過濾，除去油脂。濾液重復(fù)用雙層濾紙過濾一次。
準(zhǔn)確移取上述濾液5ml置于25ml比色管內(nèi)，加入5mlTBA溶液，混勻，加塞，置于90℃水浴內(nèi)保溫40min，取出，室溫冷卻1h，搖勻移入小試管內(nèi)，靜置2min，上清液傾入25ml納氏比色管中，加入5ml氯仿，搖勻，靜置，分層，吸出上清液于532nm波長(zhǎng)比色，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線得到微克數(shù)（同時(shí)作空白試驗(yàn)）。
4        計(jì)算
         丙二醛含量（mg/kg）=
式中C—從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得丙二醛的微克數(shù)(ug)
     m---樣品質(zhì)量（g）
作者: fuxiuling    時(shí)間: 2009-6-22 13:48
請(qǐng)教：標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制時(shí)有  然后按樣品測(cè)定步驟進(jìn)行是指從那個(gè)步驟開始呀？我剛開始做，期待你的幫助。
作者: dong-xue    時(shí)間: 2009-9-10 09:04
動(dòng)物油脂需要測(cè)TBA，植物油一般測(cè)過氧化值
作者: panjianwen1982    時(shí)間: 2009-10-21 23:01
動(dòng)物油脂需要測(cè)TBA，植物油一般測(cè)過氧化值 ?為什么植物油不要測(cè)TBA
作者: 小歪    時(shí)間: 2009-11-9 15:43
我們測(cè)的是油脂，主要是動(dòng)物油的丙二醛含量。還挺麻煩的做法，但也不是全年都做的，只是在六到十月里做。還有植物組織的丙二醛嗎？
真想知道怎么回事？
作者: 游人學(xué)子    時(shí)間: 2009-11-10 14:20
和氣溫又關(guān)系吧！具體再了解一下。動(dòng)物油脂與植物油脂還是有很大差異的！
作者: shaojinghua    時(shí)間: 2009-11-11 09:12
沒有聽說過還要檢測(cè)這東西的、
作者: 建玲    時(shí)間: 2009-11-11 09:35
標(biāo)準(zhǔn)溶液一定要冷藏，不然會(huì)嚴(yán)重影響結(jié)果
作者: ldq0219    時(shí)間: 2010-4-1 15:36
1        原理
油脂受到光、熱、空氣中氧的作用，發(fā)生酸敗反應(yīng)，分解出醛、酸之類的化合物。丙二醛就是分解產(chǎn)物的一種，它能與TBA（硫代巴比妥酸）作用生成粉紅色化合物，在532nm波長(zhǎng)處有吸收高峰，利用此性質(zhì)即能測(cè)出丙二醛含量，從而推導(dǎo)出油脂酸敗的程度。

2        試劑
2.1  TBA水溶液：準(zhǔn)確稱取TBA0.288g溶于水中，并稀釋至100ml（如TBA不易溶解，可加熱至全溶澄清，然后稀釋至100ml），相當(dāng)于0.02M；
2.2  三氯乙酸混合液：準(zhǔn)確稱取三氯乙酸（分析純）7.5g及0.1gEDTA，用水溶解，稀釋至100ml；
2.3  氯仿（分析純）；
2.4  丙二醛標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取0.315g1，1，3，3-四乙氧基丙烷，溶解后稀釋至1000ml，此溶液每ml相當(dāng)于丙二醛100μg，置于冰箱內(nèi)保存。準(zhǔn)確吸取10ml，稀釋至100ml，此溶液每ml相當(dāng)于丙二醛10μg，備用。

3        操作步驟
（1）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
準(zhǔn)確吸取每相當(dāng)于丙二醛10μg的標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml置于納氏比色管中，加水至總體積為5ml，加入5mlTBA溶液，然后按樣品測(cè)定步驟進(jìn)行，測(cè)得光密度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
（2）樣品測(cè)定：
準(zhǔn)確稱取融化均勻的油脂樣品30g，置于100ml有蓋三角瓶?jī)?nèi)，加入25ml（V）三氯乙酸混合液，振搖半小時(shí)（保持油脂融溶狀態(tài)，如冷結(jié)即在70℃水浴上略微加熱使之融化后繼續(xù)振搖）用雙層濾紙過濾，除去油脂（一般過濾一次，油脂過多的過濾兩次）。
準(zhǔn)確移取上述濾液10ml（V1）置于25ml比色管內(nèi)，加入10ml（V2）TBA溶液，混勻，加塞，置于90℃水浴內(nèi)保溫40min，取出，冷卻至室溫，加入5ml氯仿，搖勻后靜置1小時(shí)，吸取上清液離心3000r/min，5分鐘，離心后在532nm波長(zhǎng)處比色。（同時(shí)做空白實(shí)驗(yàn)，用10ml蒸餾水）
   
4        計(jì)算
         丙二醛含量（mg/kg）=
式中C—從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得丙二醛的微克數(shù)(ug)
     m---樣品質(zhì)量（g）
   

      光密度（A532/Kg）=  1000
作者: 我愛百事可樂    時(shí)間: 2010-4-1 22:52
回復(fù) 7# 泥鰍

我是直接稱2克左右的魚粉和2克的氧化鎂放到消化管再加75毫升的水進(jìn)行蒸餾，不加NaOH.接下來(lái)和粗蛋白一樣的做法。
作者: taichi1234    時(shí)間: 2010-4-2 00:49
可以自己配試劑，也可以直接用測(cè)MDA的試劑盒啊 ！不過具體的有多準(zhǔn)，看你的操作了！
作者: 地勢(shì)坤    時(shí)間: 2010-4-2 08:23
沒接觸過...期待知道的朋友快快到來(lái)!!
作者: 參博士    時(shí)間: 2010-4-2 16:36
我用試劑盒測(cè)得MDA,感覺結(jié)果還可以啊。MDA是TBA的大部分吧，兩個(gè)指標(biāo)差不多
作者: 泥鰍    時(shí)間: 2010-4-4 08:59
回復(fù) 54# 我愛百事可樂


    謝謝您
作者: 帶刺刺刺野花    時(shí)間: 2014-9-15 16:43
請(qǐng)問一下，使用TBA測(cè)定方法檢測(cè)飼料中丙二醛可以嗎？標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定值又是多少？



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