再求飼料中TBA值的測定方法一個

風落沙情

沒做過這方面的檢測，幫不了你了。

風落沙情

希望這信息對樓主有用吧

中華人民共和國國家標準
豬油衛生標準 GB10146-88
Hygienic standard of lard
中華人民共和國衛生部1989-01-11批準   1989-07-01實施


1 主題內容與適用范圍

   本標準規定了豬體脂肪經加工熬制成的市售熟豬油的衛生要求。　
   本標準適用于經獸醫衛生檢驗認可的生豬的新鮮、潔凈的板油、肉膘、網膜或附著于內臟器官的純脂肪組織，單一或多種混合煉制成的食用純潔豬油。

2 引用標準

GB 5009.37 食用植物油衛生標準的分析方法

3 感官指標

   感官指標見表1。
表1

凝固時色澤、組織狀態 白色或帶微黃色澤，組織細膩，呈軟膏狀
融化時色澤、透明度 微黃色，澄清透明
氣味及滋味 有豬油固有香味及滋味


4 理化指標

  理化指標見表2。

項目 指標
酸價（mgKOH/g）≤ 1.5
過氧化值（meq/kg）≤ 45016
丙二醛（mg%）≤ 0.25
折射率（40℃） 1.458--1.462

5 檢驗方法

5.1 丙二醛:
    本方法適用于測定豬油中丙二醛。
5.1.1 原理：
    豬油受到光、熱、空氣中氧的作用，發生酸敗反應，分解出醛、酸之類的化合物。丙二醛就是分解產物的一種，它能與TBA（硫代巴比妥酸）作用生成粉紅色化合物，在538nm波長處有吸收高峰，利用此性質即能測出丙二醛含量，從而推導出豬油酸敗的程度。
5.1.2 試劑：
5.1.2.1 TBA水溶液：準確稱取TBA（瑞士產品）0.288g溶于水中，并稀釋至100mL（如TBA不易溶解，可加熱至全溶澄清，然后稀釋至100mL），相當于0.02M。
5.1.2.2 三氯乙酸混合液：準確稱取三氯乙酸（分析純）7.5g及0.1gEDTA(乙二胺四乙酸二鈉,分析純)用水溶解,稀釋至100mL。
5.1.2.3 丙二醛標準儲備液：精確稱取1，1，3，3-四乙氧基丙烷（E.Mesck97%）0.315g，溶解后稀釋至1000mL（每毫升相當于丙二醛含量為100μg），置冰箱保存。
5.1.2.4 丙二醛標準使用液：精確移取上述儲備液10mL稀釋至100mL（每毫升相當于丙二醛量為10μg）置冰箱備用。
5.1.2.5 氯仿（分析純）。
5.1.3 儀器：
5.1.3.1 恒溫水浴箱；
5.1.3.2 離心機2000r/min；
5.1.3.3 72型分光光度計；
5.1.3.4 100mL有蓋三角瓶；
5.1.3.5 25mL納氏比色管；
5.1.3.6 100╳13mm試管；
5.1.3.7 定性濾紙。
5.1.4 操作方法
5.1.4.1 樣品處理：準確稱取在70℃水浴上融化均勻的豬油液10g，置于100mL有蓋三角瓶內，加入50mL三氯乙酸混合液，振搖半小時（保持豬油融溶狀態，如冷結即在70℃水浴上略微加熱使之融化后繼續振搖）用雙層濾紙過濾，除去油脂、濾液，重復用雙層濾紙過濾一次。
5.1.4.2 準確移取上述濾液5mL置于25mL納氏比色管內，加入5mLTBA溶液，混勻，加塞，置于90℃水浴內保溫40min，取出，冷卻1h，移入小試管內，離心5min 上清液傾入25mL納氏比色管內，加入5mL氯仿，搖勻，靜止，分層，吸出上清液于538nm波長處比色（同時作空白試驗）。
5.1.5 計算
5.1.5.1 標準曲線制備：用標準丙二醛濃度分別為1μg、2μg、3μg、4μg、5μg作上述步驟處理，根據得出吸光度讀數作標準曲線。
5.1.5.2 樣品測出的吸光度讀數，從標準曲線求出相應濃度A，然后按下式計算：
                                A
            丙二醛含量（mg%)= -----------
                                10
式中：A-豬油的相應濃度。
5.2 酸價、過氧化值：
按照GB 5009.37執行。

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植物組織或器官中丙二醛含量的測定
植物組織或器官在衰老或逆境下遭受傷害，往往發生膜脂的過氧化作用。膜脂過氧化的指標有很多，如丙二醛（MDA）的產生、過氧化物的碘量滴定、氧吸收、共軛雙鍵測定等。由于MDA的測定方法簡便，所以常用來評價植物脂過氧化強弱的指標。 測定組織或器官脂質的過氧化反應所產生的丙二醛含量時，通常利用硫代巴比妥酸（TBA）在酸性下加熱與組織中的MDA產生顯色反應，反應產物是粉紅色的3,5,5-三甲基噁唑2,4-二酮。用分光光度計測定532nm及600nm波長時的光密度值，根據光密度的大小可計算MDA含量。
一、實驗目的
1.掌握植物體內丙二醛含量測定的原理及方法。
2.了解丙二醛積累對細胞的傷害

二、實驗原理
逆境→膜脂的過氧化作用→丙二醛

三、實驗步驟
1 MDA的提取      稱2g葉片，加入5ml 磷酸緩沖液（50mmol，pH值為7.8）及少量石英砂，于冰浴中研磨提取，勻漿液以12000g 離心力作用下（4度）離心10min，其上清液即為MDA提取液。
2 MDA的測定      取1ml MDA提取液，加3ml 27％三氯乙酸和 1ml 2%TBA。混和液在95度水浴中保溫30min后，立即置于冰浴中冷卻，然后離心10min，于波長532nm和600nm下測定OD值。

四、結果計算
以測得的OD532減去OD600的非特異吸收值，按155mmol-1cm-1消光系數計算MDA含量。 分別計算衰老和對照組的值。
  
  MDA濃度(μmol/L)=6.45(D532-D600)-0.56D450

  MDA含量(μmol/g FW)＝
  
  D450、D532、D600分別代表450nm、532nm和600nm波長下的光密度值。

五、注意事項
1、0.1-0.5％的三氯乙酸對MDA—TBA反應較合適，若高于此濃度，其反應液的非專一性吸收偏高；
MDA-TBA顯色反應的加熱時間，最好控制沸水浴10-15min之間。時間太短或太長均會引起532nm下的光吸收值下降；
2、如待測液渾濁，可適當增加離心力及時間，最好使用低溫離心機離心。
低濃度的鐵離子能增強MDA與TBA的顯色反應，當植物組織中鐵離子濃度過低時應補充 Fe3+（最終濃度為0.5 nmol·L-1）
3、可溶性糖與TBA顯色反應的產物在532 nm也有吸收（最大吸收在450 nm），當植物處于干旱、高溫、低溫等逆境時可溶性糖含量會增高，必要時要排除可溶性糖的干擾。

lgch

這項指標主要是針對油脂的。原料也可以。廣東的騰冰老師對這方面研究很透徹的。以前聽過他的一次講座。

lgch

油脂TBA值的測定方法

1        原理
油脂受到光、熱、空氣中氧的作用，發生酸敗反應，分解出醛、酸之類的化合物。丙二醛就是分解產物的一種，它能與TBA（硫代巴比妥酸）作用生成粉紅色化合物，在532nm波長處有吸收高峰，利用此性質即能測出丙二醛含量，從而推導出油脂酸敗的程度。

2        試劑
2.1  TBA水溶液：準確稱取TBA0.288g溶于水中，并稀釋至100ml（如TBA不易溶解，可加熱至全溶澄清，然后稀釋至100ml），相當于0.02M；
2.2  三氯乙酸混合液：準確稱取三氯乙酸（分析純）7.5g及0.1gEDTA，用水溶解，稀釋至100ml；
2.3  氯仿（分析純）；
2.4  丙二醛標準溶液：稱取0.315g1，1，3，3-四乙氧基丙烷，溶解后稀釋至1000ml，此溶液每ml相當于丙二醛100μg，置于冰箱內保存。準確吸取10ml，稀釋至100ml，此溶液每ml相當于丙二醛10μg，備用。

3        操作步驟
（1）標準曲線的繪制
準確吸取每相當于丙二醛10μg的標準溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml置于納氏比色管中，加水至總體積為5ml，加入5mlTBA溶液，然后按樣品測定步驟進行，測得光密度繪制標準曲線。
（2）樣品測定：
準確稱取融化均勻的油脂樣品5-10g，置于100ml有蓋三角瓶內，加入50ml三氯乙酸混合液，振搖半小時（保持油脂融溶狀態，如冷結即在70℃水浴上略微加熱使之融化后繼續振搖）趁熱用雙層濾紙過濾，除去油脂。濾液重復用雙層濾紙過濾一次。
準確移取上述濾液5ml置于25ml比色管內，加入5mlTBA溶液，混勻，加塞，置于90℃水浴內保溫40min，取出，室溫冷卻1h，搖勻移入小試管內，靜置2min，上清液傾入25ml納氏比色管中，加入5ml氯仿，搖勻，靜置，分層，吸出上清液于532nm波長比色，對照標準曲線得到微克數（同時作空白試驗）。
4        計算
         丙二醛含量（mg/kg）=
式中C—從標準曲線查得丙二醛的微克數(ug)
     m---樣品質量（g）

fuxiuling

請教：標準曲線繪制時有  然后按樣品測定步驟進行是指從那個步驟開始呀？我剛開始做，期待你的幫助。

dong-xue

動物油脂需要測TBA，植物油一般測過氧化值

panjianwen1982

動物油脂需要測TBA，植物油一般測過氧化值 ?為什么植物油不要測TBA

小歪

我們測的是油脂，主要是動物油的丙二醛含量。還挺麻煩的做法，但也不是全年都做的，只是在六到十月里做。還有植物組織的丙二醛嗎？
真想知道怎么回事？

游人學子

和氣溫又關系吧！具體再了解一下。動物油脂與植物油脂還是有很大差異的！