豬場養戶如何開展非洲豬瘟自檢工作？

bhnnnhg

早監測、早發現、早處置”——豬場養戶如何開展非洲豬瘟自檢工作？——訪廣東愛蘇生物科技有限公司劉芮祎市場總監

廣東愛蘇生物科技有限公司成立于2015年，在畜牧業板塊創立了“牧康靈”品牌，以先進的無創采集專利技術，便捷的現場檢測方法，和最新的“生豬體檢”理念服務于豬場。非瘟之下，廣東愛蘇結合養殖生產實踐，總結了一套集采樣、檢測與技術服務于一體的“牧康靈非洲豬瘟一站式解決方案”助力非瘟防控。

自主檢測：有的放矢，心中有數

Q1.非洲豬瘟自檢政策逐層放開，對于國家鼓勵養殖戶開展自檢工作，能談談您的看法嗎？

這是一項非常有益、及時而且十分有必要的政策。可以說現在開展非洲豬瘟自檢工作已經迫在眉睫，同時也是防控非洲豬瘟的前提與重中之重。目前防控非洲豬瘟，沒有疫苗，也沒有有效藥物，自檢成了非洲豬瘟防控的第一步，也是“自保”的前提！只有養殖場戶做到自主檢測，才能了解非洲豬瘟防控的成效，做到有的放矢，心里更有數！
規范操作，避免操作污染

Q2.通過對豬場自檢指導工作以及開展的非洲豬瘟檢測培訓，您認為豬場養戶們普遍存在哪些問題？

最主要的問題是操作上“污染防控意識薄弱”。由于多數養殖戶以前沒有接觸過這樣的實驗，操作流程技能不規范等，容易造成污染擴散，導致實驗結果出現假陽性等情況。

關于如何解決操作污染問題，我們有以下措施建議：

1.“傻瓜式”培訓。儀器設定好程序，現場指導豬場員工掌握操作技能、流程步驟及判讀實驗結果。

2.根據豬場具體情況建立（簡易）實驗室。需要有獨立實驗區，至少要保證樣本處理區與操作區分開；需有通風條件（可配超凈工作臺），避免內部交叉污染循環。日常檢測結束使用95%的酒精或核酸去除劑對實驗桌、儀器槍頭等進行消毒。

3.對于實驗區已出現污染問題，可以更換基因序列（靶點）不同的試劑盒，同時確保通風流暢。

規范化自檢操作流程與操作細節

Q3.日常監測中，養殖場戶該如何開展非洲豬瘟自檢操作呢？有哪些規范化檢測流程以及操作細節可以分享？

非洲豬瘟自檢流程與細節有以下幾點注意事項：

1.樣本來源要廣泛。采樣的樣本除了豬群本身，還應包括豬場各個區域的環境、用具、員工、來往車輛、飼料原料等。

2.采樣方式要安全可靠。對于豬只本身的臨床樣本，建議使用“唾液樣本”進行監測和檢測。因為非洲豬瘟病毒在自然感染的情況下首先在口腔內形成感染，病毒從口腔扁桃體進入血液出現的平均時間是3-4天，最長可達19天，也就是唾液可以早于血液至少3天被檢測出來，最早可以提前19天被檢測出來，這也是檢測的黃金窗口期，那這樣就給豬場進行有效、及時處理贏得了大量的時間！如果在血液里面查出有病毒核酸陽性，實際上豬已經出現了比較嚴重的病毒血癥，再做任何處理都已經來不及了，也就失去了檢測的生產指導意義。

3.采樣時間間隔要合理。應根據豬場實際情況確定，種豬群一般建議一周至少2次，商品豬群一周1次，如果有賣豬等臨時行為，要對出豬臺、進出人員等隨時進行檢測，環境檢測要做到一周2次左右。如果豬場周圍有疫情發生的，則更要加強監測周期和頻率，做到隨時了解本豬場的病原及生物安全防控情況。

4.采樣數量要科學。對于臨床樣本數量，建議母豬分胎次，小豬分胎齡，育肥、保育以欄為單位進行采樣，以及環境等各個區域（可以劃分小單元），每組取5份樣本混樣，公豬量少的可以全檢。這里需要注意，混樣樣本不建議份數太多。假若出現檢測陽性結果，再單獨對每一份樣本進行溯源，目標過于分散，耗時增長。

“定向”選擇檢測“目標”樣本

Q4:在檢測試劑與儀器的選擇上，您是否能給養殖場戶們一些意見？

首先，從非洲豬瘟病毒的存在形式上來說，分為蛋白和核酸，所以可檢測的目標物就從這兩個層面來入手。目前市面上有快速檢測試紙條，這屬于免疫層析的原理，檢測目標為病毒的蛋白；還有一種方法是用熒光定量PCR儀，配合使用熒光定量PCR試劑盒，這是一種分子水平的診斷，這種方法檢測的是病毒的核酸。

在方法學上，兩種檢測方法都可以檢測病毒，但是靈敏度差異很大，熒光定量PCR的方法是目前最靈敏的方法，所以適合環境或者唾液樣本的檢測，還有豬場的日常監測。而快速檢測試紙條屬于免疫學診斷方法，靈敏度相對較低，但是對于臨床上已有發病癥狀，肉眼通過癥狀不能確診的情況下，可以使用快速檢測試紙條來進行快速的判斷，所以在臨床上如果遇到有緊急發病癥狀的時候，可以使用快速檢測試紙條。

Q5：近期，有關新聞報道（北京森康）非洲豬瘟抗原檢測試劑紙條檢測有假陰性的現象，對此您有何看法？

最近也有很多朋友問過我這個問題，我也非常愿意分享我的觀點。

第一，方法學限制。抗原快速檢測試紙條是免疫膠體金水平的檢測方法，檢測的是病毒的蛋白，這種方法的檢出率或者說靈敏度偏低，換句話說是檢測限（檢測閾值）較高，低病毒量不容易達到檢測限。農業農村部第一批非洲豬瘟現場快速檢測試劑評價結果目錄里，“森康快速檢測試紙條的診斷敏感性是66.67%、特異性100%”，同時注明非洲豬瘟快速檢測試劑條類“僅用于病（死）豬現場快速初步檢測”。這句話本質的含義是：病豬或者死豬的帶毒量已經很高，更容易達到試紙條的檢測限，所以病（死）豬更容易檢測出來。抗原快速檢測試紙條檢出率的高低取決于待檢豬的發病階段，如若是處于潛伏期的病豬，核酸檢測結果是陽性，抗原快速檢測試紙條檢測是陰性也是合理存在的。

這也提示我們可以通過“定向”選擇檢測“目標”樣本，從而提高準確率。針對豬群日常監測與環境檢測，其帶毒量相對偏低，不容易達到檢測限，不推薦使用抗原快速檢測試紙條。

第二，合理存在假陰或者假陽的可能性。農業農村部第一批備案目錄里部分熒光定量PCR試劑盒，診斷敏感性并不都是100%，也有93%或96%的情況。抗原快速檢測試紙條與熒光定量PCR試劑盒敏感性指數的區別就是假陰或者假陽比例的高低。所以我個人認為每個產品都有它的優缺點，而不能一棍子打死，就說試紙條完全不準確也不可取，關鍵還是要定向選擇檢測目標樣本。

第三，正規渠道購置檢測產品。市面上森康產品的價格參差不齊，在這也提醒過廣大用戶，不能一味的在意價格，而不注重產品質量。請廣大客戶通過正規渠道購置產品，保障自身利益。

關注豬群“內在”健康體質情況

Q6:唾液檢測在生豬健康度監測上也備受關注，能否介紹生豬的健康體質檢測？

抵抗非洲豬瘟，除了做好“外在”的生物安全防控措施，還要注重豬“內在”的健康體質情況。通過對豬只健康度的評判，可以了解豬群免疫力情況，及時提高豬群免疫力，以提高抗病能力。

其中，我們有寒度檢測試劑盒和朊度檢測試劑盒。寒度檢測試劑盒主要檢測機體體內毒素蓄積程度、免疫力水平或肝腎功能受損程度。朊度檢測試劑盒檢測機體的免疫能力。朊度即蛋白含量，代表機體的營養情況。

Q7：唾液檢測的優勢及唾液采集的注意事項主要有哪些？

唾液學檢測有四大優勢：1.唾液可以早于血液平均3~5天檢測出非洲豬瘟病毒，便于早期篩查；2.唾液采集操作簡單方便，節省人力和物資；3.對豬無應激，方便頻繁的臨床采樣；4.通過唾液樣本，可以進行PCR檢測，進一步確診是否為非洲豬瘟病毒感染。

唾液采樣有以下注意事項：1.采樣時間：控食過夜，前晚停料不停水，第二天早晨采食前采集唾液。這樣采集的唾液樣本純度高，病原含量高；2.要加入唾液保護液，否則唾液中的酶會對病毒核酸造成降解。3.采集出來的唾液樣本不能離心，離心沉淀后，上清液中的病毒量會降低。

Q8：在日常疫病監測過程中，您認為應該注意哪環節？

在日常疫病檢測監測中，這幾方面需要注意：

1.非洲豬瘟病毒雖然毒力強，發病后死亡率高，但它也有弱點，病毒接觸傳播，不接觸就不傳播，這個點來說其威力不及口蹄疫和豬高熱病。若非傳播媒介協助，自身傳播擴散力度不是特別強。joncarent.com

2.非瘟感染豬清除一定要早：“早監測、早發現、早處置”，及時“穩、準、狠”地清除病豬，不給病毒擴散的機會，這樣才能保護健康豬群。

3.落實封閉飼養、全進全出等飼養管理制度，禁止無關人員和車輛進入場區；嚴格落實補欄隔離措施和空欄管理制度，避免交叉污染。