復合BFA對雛雞生長性能及免疫力影響的研究

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復合BFA對雛雞生長性能及免疫力影響的研究 河北農業大學碩士學位論文 系 別：動物科技學院 專 業：動物主產 方 向：家禽營養與免疫 研究生：陳寶江 導 師：谷子林 研究員 一九九八年六月 中國•保定•河北農業大學 摘要 　　選用651只尼克紅蛋公雛隨機分為7組，在飼料中分別添加不同組 合和劑量的BFA，研究其對雛雞增重、紅白細胞變化、血紅蛋白量、胸 腺、脾、法氏囊發育及ND抗體水平影響大小及機制。結果表明： 　　1．各試驗組體重較對照組分別增加 13.5%、 6.3%、 35.3%、 27.3%、 5.9%、 8.3%，差異極顯著，其中血紅蛋白含量與體重呈強 正相關， r=0.6003(t>t0.01)。 　　2．各試驗組與對照組相比綜合免疫能力明顯提高 　　( 1 )白細胞總數分別較對照組增加7.2%、 12.9%、 4.8%、 7.3%、 3.5%、 6.2%，其中：淋巴細胞增加14.01%、 14.73%、 6.03%、 9.11%、 1.45%、 5.70%； 嗜中性白細胞增加7.20%、 23.34%、 13.04% 15.60% 、 15.98%、 2l.36%，差異極顯著 (F>F 0.01)。 　　( 2 ) ND抗體水平分別增加了217.0%、 201.1%、 109.8%、 84.0%、 69.7%和84.8%，多重方差分析F>F 0.0l。 　　分析表明： CoBFA通過其Zn、 Se、 Vc、 Ve BFA幾種成分 協同作用相互補充，互相促進，提高家禽血紅蛋白含量，促進免疫器官 發育，綜合免疫能力提高，從而達到增重效果。綜合比較，以第III組即 CoBFA-3為最佳配方。 關鍵詞： CoBFA；雛雞；免疫力；增重； ND抗體；白細胞 前言 　　我國養雞歷史悠久，是一個養雞大國，據統計，到1995年，全國存欄雞20億只以上，年產蛋1676.7萬噸，占世界總產量42.85%，其中集約化養殖所占比例蛋雞達50%以上，而肉雞則達90%[1]。集約化養殖使家禽生 長快，飼料報酬高，生產能力強，但由于飼養密度大，環境變化等應激因 素增多，使機體免疫機能衰退，生產力下降，對疾病，特別是一些烈性傳 染病抵抗力降低，使其傳播迅速，經濟損耗大。現在對疾病防治主要靠藥物和疫苗，，但實踐中往往達不到預期效果，其原因除藥物疫苗質量外，常常是由于家禽本身免疫系統弱化造成的。 　　家禽機體主要靠皮膚、粘膜、體內各種吞噬細胞及特異性抗體抵抗外 來侵害[2]，集約化飼養，常由于飼料中某些養分不充足或不平衡，使這些 保護屏障受損，免疫器官發育受阻，吞噬細胞、抗體產生能力下降，從而不能亢分發揮機體自身抗病能力和生產潛力。研究表明，各種營養素均可影響機體免疫力，其中Zn、 Se、 Vc、 VE。對其影響最大。 　　Zn是體內100多種酶組成成分，對維護皮膚、粘膜完整、促進免疫器 官生長發育具有重要作用；缺Zn會導致皮膚不完全角質化，免疫器官(胸 腺、脾、法氏囊)生長受阻或退化。 　　Se是GSH-PX組成成分，GSH-PX可分解機體內H202、ROOH 等過氧化物，防止它們對細胞膜的破壞[13][14][15]，同時可抵消血清內皮質酮 對淋巴細胞吞噬能力和體液免疫功能的抑制作用。 Vc是一種強還原劑，作為抗應激、抗感染營養物，已被廣泛應用，它主要是維持胸腺網狀細胞發育[43]，分解動物應激狀態下產生的皮質酮(一種免疫抑制劑和細胞毒素)，同時可促進創口愈合。 　　VE的免疫作用機制在于拮抗H202、 ROOH亞硝基化合物生成 [41][3]，同時促進Vc在體內合成，促進脾臟生長，使脾臟鞘動脈周圍網狀內 皮系統生成吞噬細胞能力加強。 　　BFA為一種高分子有機酸，與其他天然黃腐酸具有相似結構和功能， 其免疫上的功能在于殺菌、抑菌，止血，抗潰瘍，解毒，誘導機體產生干擾素[23][25][26][57]，此外BFA抑制乙酰苯肼(APH)生成，減少體內過氧化 物生成[28][29]。 理論上講， Zn、 Se、 Vc、 VE、 BFA都具有促生長，調節、提高 家禽免疫功能作用，但各有特點，相互補充。 Zn保護上皮粘膜完整，促進 器官發育，促進Vc吸收； Vc羥化分解皮質酮； Se分解體內ROOH、 H202、亞硝基化合物生成，促進Vc體內合成； BFA加快傷口愈合，同時， BFA具有良好的吸附性和承載性，可作為維生素、微量元素載體。由此可見，以上幾種成分在提高免疫功能上具有可加性，復合配制上具有可行性。 　　本研究選用尼克紅蛋公雛作為研究對象、以BFA為主要成份，制成含 Zn， Se、 Vc、 VE、的不同配方CoBFA，經飼養試驗、比較屠宰試驗、血紅蛋白量、紅細胞數、白細胞總數和白細胞分類計數及血清ND抗體滴 定度檢測，獲得雛雞綜合免疫能力和生產性能變化情況，為以后通過調節飼料養分，提高家禽自身抗病、抗逆能力提供科學依據。 1，材料與方法 1.1 試驗材料 1.1.1 所用藥品 1.1.1.1 生化黃腐酸(BFA)(含腐植酸20%)，深州市威爾有公司生產， 批號： 970305 1.1.1.2 Zn：分析純ZnS04•7H20，天津市化學試劑三廠生產，批號： 901126 1.1.1.3 Se:飼料級Na2SeO3，解放軍86800部隊獸藥廠生產，批號： 970101 1.1.1.4 Vc： Vc藥用片劑，華北制藥集團有限公司生產，批號： 970101 1.1.1.5 VE：飼料級a-生育酚(50%)，上海三維制藥公司生產，批號： 97-02-7046 1.1.2　試驗動物 　　選用尼克紅蛋公雛(1日齡)651只，平均體重33.57g，平均母原抗 體稀釋度為120倍，經方差分析差異均不顯著(p>0．05)。隨機分成7組， I-Ⅵ組為試驗組，VII組為對照，每組93只，分兩個重復。 1.1.3 試驗地點 河北農業大學山區研究所實驗室、 河北農業大學動物 科技學院營養與飼料教研室 1.1.4 時間 1998年4-6月,共6周 1.2 試驗方法 1.2.1 飼養試驗 　　蛋雛分組前，隨機取10只稱重，前兩天喂相同開食料，第三天分組分籠飼養，分別飼喂混有不同復合BFA的雛雞料，對照組飼喂基礎全價料， 自由采食， 自由飲水，室內小氣候保持一致， 自然光照和人工補充光照相 結合，燈光補照，電熱供暖，機械通風，于第13天NDⅣ系免疫(滴眼)， 每隔一定時間于清晨飼喂前每組隨機抽取10只雞稱重。 　　飼料組成選用本地常用的玉米，麩皮、豆粕、棉粕、花生仁餅、魚粉、 蛋白粉，飼養標準依蛋雛飼養標準[16]，基礎日糧配方及營養水平見表1． 表1 基礎日糧配方及營養水平 單位：%、MJ/kg 飼 料 組 成 原 料 比 例 玉米 麩皮 豆餅 棉餅 花生餅 蛋白粉 魚粉 骨粉 鹽 62.0 5．0 19．0 1.0 5．0 2．0 3．0 2．7 0．3 營養 水平 指 標 代謝能 粗蛋白 鈣 磷 食鹽 賴氨酸 蛋+胱 11．91 18.00 0．80 0．70 0.37 0.85 0.60 11．83 17．50 1．09 0．65 0．40 0.83 0．65 標準值 實測值 另加Met、Lys各0．10g/kg膽堿350mg /KG，微量元素、維生素按 標準添加。 1.2.2 血液常規及免疫水平 分別于l、 14、 16、 18、20、22、24、26、28、31、 35、 42日齡于各組隨機取雛雞8只，心臟采血，一部分肝素抗凝作血常規檢驗， 另一部分不加抗凝劑靜置分離血清，作ND抗體測定． 1.2.2.1 沙利氏法分別測各血樣血紅蛋白含量，取均值． 1.2.2.2 計數板法計數各組各日齡血液紅細胞數，取均值。 l.2.2.3 分別利用中性紅、結晶紫兩種染液對試雞紅白血球染色，顯微鏡 觀察，計數各組各日齡白血球總數，取均值。 1.2.2.4 血液涂片，用瑞氏染色法染色，顯微鏡觀察，分類計數白細胞數 取均值。 1.2.2.5 非抗凝血液析出的血清，應用試管法進行血凝抑制實驗，測定各 組各日齡ND抗體滴定度，取均值，觀察變化規律[33]。 1.2.3． 比較屠宰試驗 　　分別于1、 14、 16、 18、 20、 22、 24、26、 28、 3l、 35、 42日齡各組隨機取雛雞8只，心臟取血后，窒息處死，立即剖解，分離法 氏囊、胸腺、脾臟三種主要免疫器官，去掉脂肪，觀察發育狀況，使用T-200 型電子天平 (1/1000克)精確稱鮮樣重，取均值比較。 1.2.4 數據處理 　　所獲數據全部采用IBM-PC機Ams統計軟件包處理，并有針對地選用t檢驗，多重方差分析q檢驗， 相關分析，多元回歸分析，通徑分析等方 法[30][27]。 2 結果與分析 2.1體重變化結果與分析 七個組試雛在試驗42天內體重變化見表3 圖1 表3 試雛不同日齡體重統計表 單位：g 14 16 18 20 22 24 26 28 31 35 42 I 85.2 89.5 118.0 144.2 150.9 157.7 172.3 191.2 267.5 333.0 431.3 II 76.7 94.3 102.7 131.8 140.6 149.8 176.8 190.3 224.8 314.7 404.6 III 84.5 102.5 115.8 146.7 155.2 164.0 178.0 193.3 275.5 371.5 514.1 IV 97.0 110.3 118.3 138.2 146.2 157.2 187.3 208.2 243.5 360.7 484.1 V 74.6 84.4 88.8 101.4 118.7 145.1 152.5 189.1 244.8 303.2 402.4 VI 82.0 91.5 98.5 125.0 131.9 150.7 170.2 200.0 246.0 301.3 411.6 VII 70.5 79.8 84.0 96.0 102.8 137.2 144.2 178.8 231.5 286.7 380.5 圖1 試雛不同日齡體重統計折線圖（可放大顯示） 　　雛雞1日齡隨機抽取10只，稱體重平均為33.57克，各只間體重方差分析差異不顯著，整個飼養期內飼料消耗基本一致。 14日齡I-VI組體重分別 比對照組增加了20.85%、 8.79%、 19.86%、 37.59%、 5.82%、 16.31%， I 組、III組、IV組、Ⅵ組均達到差異極顯著水平(p<0.01)，其中以Ⅳ、 I、 III組增重較快； 42日齡各組體重比較， I-VI組較對照組分別增加了 13.5%、 6.3%、35.3%、27.3%、 5.9%、 8.3%，其中第III、Ⅳ組增重最快， 多重方差分析F=3.41，差異極顯著；通徑分析表明Zn、 Se、 Vc、 VE、 BFA與體重相關系數分別為0.8294、 0.8327、 0.2645、 0.1112、 0.0719， 其中Zn、 Se與體重呈較強正相關。 　　此外， Se還可通過Vc起作用（通徑系數0.5373）；BFA與Vc互作較大 (通徑系數1．9634)。 2.2 血液紅細胞變化結果與分析 　　各組試驗公雛不同日齡紅細胞數及變化規律見表4 表4 試雛不同日齡紅細胞數 單位：百萬/ml I4 16 18 20 22 24 26 28 31 35 42 平均 I 236.3 233.7 195.5 222.7 226.3 219.0 201.7 201.3 195.0 209.5 227.0 215.3 II 237.0 217.8 245.3 185.0 256.3 203.2 192.3 222.2 200.5 210.0 242.2 219.3 III 203.3 215.5 191.0 202.7 224.3 209.0 226.0 209.0 227.0 225.3 225.0 214.4 IV 206.5 230 221.3 189.5 217.7 191.2 202.7 203.5 198.0 208.5 222.8 208.3 V 215.0 197.7 215.7 236.7 217.0 204.8 234.8 231.5 165.0 205.8 201.0 211.4 VI 198.0 211.3 190.3 213.5 241.7 212.2 207.7 192.7 178.0 220.0 221.3 207.9 VII 203.3 212.7 226.3 183.7 220.7 177.0 169.7 209.5 173.0 210:3 225.4 201.1 　　結果顯示：各試驗組紅細胞數量比對照組有所提高，I-V1組分別比對照組增加6.6%、8.1%、5.9%、3.5%、5.1%、3.4%，多重分析比較， F=13.411(F>F0.01)，第II、I組較對照組分別達極顯著，顯著水平： 多元線性回歸表明紅細胞數與Zn、 Vc、 VE、 BFA關系為： 　　　　　　　　　　　y=204.8744+0.0090Xl+0.1406X2+0.1087X3+0.0175X4　(r=0.8722)， 說明CoBFA在一定程度可以提高紅血球數量，從而提高 機體供應養分和氧氣能力，促進機體生長，其中以Vc和Zn促生長作用較大 2.3 血紅蛋白變化結果與分析 　　試驗各組間不同日齡雛雞血紅蛋白量及變化見表5 表5 不同日齡雛雞血紅蛋白量 單位：mg/g 14 I6 18 20 22 24 26 28 31 35 42 平均 I 10.0 9.3 9.2 9.5 10.2 9.4 9.5 8.6 8.9 9.0 9.5 9.5 II 9.8 9.3 10.3 10.4 10.4 9.4 9.8 9.6 8.8 10.2 8.7 9.7 III 10.0 9.1 10.1 10.3 10.4 10.2 10.4 8.7 8.9 9.9 9.4 9.8 IV 10.0 9.4 I0.0 9.5 10.7 10.1 9.3 9.3 9.4 9,1 9.7 9.7 V 9.0 9.0 10.4 10.2 10.2 9.9 10.8 9.5 8.6 8.4 9.4 9.6 VI 9.5 9.0 10.1 9.7 9.7 9.6 9.9 9.2 9.7 9.1 9.3 9.5 VII 9.0 9.0 10.3 8.5 9.1 9.0 9.0 8.4 8.8 8.5 8.7 8.9 　　結果顯示：各試驗組與對照組比較， I-vI組較vII組分別增加了 6.7%、9.0%、10.1%、9.0%、7.9%、6.7%，多重方差分析F>F 0.01， q檢驗發現各組較對照組差異極顯著，其中以III、Ⅱ、Ⅳ組最高，而各試 驗組間差異不顯著。多元回歸血紅蛋白與Vc、 VE相關 y=9.5872+0.0064X1-0.0053X2(r=0.9518) 2.4.1白細胞總數變化結果與分析 各組雛雞不同日齡白細胞數及變化規律見表6 表6 不同日齡雛雞白細胞總數 單位：個/ml 14 16 18 20 22 24 I 18416.7 18083.3 19750 15750 15000 20416 II 18500 17625 16333.3 19375 21333.3 21750 III 17250 17625 14500 18833.3 16750 24666.7 IV 18375 16750 16416.7 16875 17416.7 22250 V 16750 16250 16583.3 19916.7 15833.3 20500 VI 20500 16833.3 16583.3 18000 19333.3 20375 VII 18000 18916.7 17333.3 19083.3 16833.3 20666.7 （轉下表） 26 28 31 35 42 平均 I 22583.3 18125 16875 21166.7 23625 19072 II 20916.7 19666.7 16375 23000 240417 20083.3 III 29500 23250 14000 20125 19125 18650 IV 5916.7 20166.7 17250 23583.3 245625 19078.4 V 18250 16750 16750 21875 22125 18406.1 VI 19250 19250 19500 20166.7 191875 18899.6 VII 21666.7 6416.7 16875 7083.3 17400 17788.6 （承接上表） 　　結果表明 各組與對照組比較，白細胞總數有所增加，分別較對照增加了 7.2%、12.9%、4.8%、7.2%、3.5%和6.2%，多重方差比較差異未達到顯 著，但以第II、Ⅳ增加較多，白細胞總數與Zn、Se、Vc、 VE、BFA相關 系數分別為0.3498、0.4323、0.6386、0.6001、0.6838，與Zn、Se、Vc、 VE、 BFA線性回歸方程為： y=17577．2590+5.1400Xl+6.0189X2+4.6400X3+2.7800X4 (0．8161)， 說明VE、BFA、Vc對白細胞總數影響較大，而Zn、Se 相對影響較小。 2.4.2 白細胞分類計數 　　各試驗組雛雞白細胞分類計數量及所占比例見表7 表7 試驗組雛雞白細胞分類計數 單位：%、個/ml I II III IV V VI VII 淋 巴 比例 數量 65.4 62.5 62.2 62.6 60.3 61.2 61.5 12473 12552 11600 11943 11099 11567 1094 嗜 中 比例 數量 28.1 30.7 30.3 30.3 31.5 32.1 28.1 5359 6166 565l 5781 5798 6067 4999 嗜 酸 比例 數量 2.9 3.2 4.1 4.25 5.0 3.3 4.6 553 643 765 811 920 624 818 嗜 堿 比例 數量 2.0 2.6 2.5 2.09 2.3 2.5 4.2 381 522 466 399 423 472 747 單 核 比例 數量 1.5 0.9 l.2 0.8 1.1 1.1 1.6 286 181 224 153 202 208 284 　　結果顯示：各組間各類白細胞比較：其中淋巴細胞以對照組為最低 I-VI組較對照組分別增長14.01%、14.73%、6.03%、9.17%、 1.45%、 5.70%；多重方差分析，差異不顯著；嗜中性白細胞則分別增加了7.20%、 23.34%、13.04%、15.60%、15.98%、21.36%，其中II、VI組與對照組比較，多重方差分析差異顯著；通徑分析表明， Zn、Se、vc、VE、 BFA相關系數分別達0．230l、0.2248、0.0331、-0.0169、0.3937， 實驗結果綜合說明，以Ⅱ組增加白細胞數效果最明顯。 2.5 免疫器官生長發育變化結果與分析 2.5.1胸腺 各組雛雞不同日齡胸腺重量均值及變化規律見表8、圖2 表8 不同日齡雛雞胸腺重量均值 單位：g 14 16 18 20 22 24 26 28 31 42 I 0.355 0.408 0.503 0.573 0.642 0.697 0.726 1.029 1.674 2.417 II 0.215 0.431 0.474 0.509 0.677 0.684 0.818 1.100 1.626 2.355 III 0.359 0.474 0.539 0.567 0.758 0.767 0.805 1.168 1.714 2.614 IV 0.380 0.490 0.670 0.692 0.728 0.848 1.043 1.286 1.695 2.863 V 0.249 0.330 0.350 0.465 0.544 0.656 0.878 0.933 1.423 2.124 VI 0.354 0.417 0.460 0.475 0.584 0.695 0.941 1.104 1.565 2.160 VII 0.213 0.283 0.307 0.347 0.588 0.589 0.788 1.001 1.324 2.109 圖2 不同日齡雛雞胸腺重量均值折線（可放大顯示） 　　結果表明：各試驗組與對照組比較，胸腺生長發育迅速，42日齡時比 較，I-Ⅵ組分別較對照組增加： 14.6%、11.7%、23.9%、35.8%、0.7% 和2.4%； t檢驗表明：與對照比，III、Ⅳ組達極顯著(p<0.01)，而I、 II組則達顯著水平(p<0.05);逐步回歸結果表明， Vc對胸腺影響最大； y=2.1489+0.0016X32-0.0066X3(r=0.9999)。 2.5.2法氏囊 試驗各組不同日齡法氏囊生長發育變化見表9、圖3 表9 不同日齡法氏囊重量均值 單位：g 14 16 18 20 22 24 26 28 35 42 平均 I 0.316 0.405 0.600 0.704 0.738 0.768 0.939 1.100 1.893 2.231 0.969 II 0.260 0.378 0.503 0.506 0.667 0.861 0.903 1.108 1.357 2.t27 0.867 III 0.247 0.491 0.614 0.718 0.778 0.783 0.810 1.287 1.589 2.515 0.983 IV 0.376 0.398 0.513 0.695 0.760 0.805 0.946 1.239 1.322 2.277 0.933 V 0.228 0.334 0.376 0.479 0.607 0.629 0.750 0.998 1.102 1.975 0.748 VI 0.334 0.353 0.385 0.534 0.649 0.658 0,887 1.099 1.197 2.072 0.817 VII 0.219 0.32 0.367 0.459 0,538 0.557 0.646 0.985 1.098 1.914 0.710 圖3 不同日齡法氏囊重量均值折線圖 （可放大顯示） 結果顯示：各試驗組較對照組法氏囊生長發育均有較大增長，其增重 幅度42日齡比較I-VI組分別增加16.60%、11.10%、31.40%、18.97%、 3．18%和8．25%；多重方差比較， q檢驗結果各試驗組與對照組均差異極顯 著(F>F 0.01)，而各試驗間比較，以第三組最高，與其它各組也達到 極顯著差異；此外I組與Ⅱ、Ⅳ、V；VI組，Ⅳ組與II、V、VI組； II組與V、VI組也分別達極顯著差異；法氏囊重與Zn、 Vc、 VE、 BFA 關系為 　　y=1.9440+0.006XI+0.0072X2+0.0060X3+0.0040X4 (r=0.9147)。綜合說明：各種復合BFA均可刺激法氏囊生長發育，其中以III組和I組為好。 2.5.3 脾 各組不同日齡脾臟重量均值及變化規律見表10、圖4 表10 不同日齡脾臟重量均值 單位：g 14 16 18 20 22 24 26 28 31 42 I 0.119 0.105 0.131 0.185 0.208 0.208 0.324 0.360 0.764 1.082 II 0.071 0.125 0.144 0.201 0.211 0.223 0.363 0.349 0.456 1.013 III 0.087 0.127 0.149 0.198 0.238 0.272 0.251 0.346 0.708 1.127 IV 0.098 0.115 0.175 0.214 0.283 0.347 0.377 0.361 0.418 1.279 V 0.069 0.107 0.122 0.188 0.211 0.220 0.272 0.292 0.567 0.685 VI 0.088 0.095 0.124 0.138 0.216 0.228 0.302 0.297 0.54I 0.988 VII 0.068 0.108 0.109 0.137 0.164 0.187 0.208 0.357 0.407 0.655 圖4 不同日齡脾臟重量均值折線圖 （可放大顯示） 　　結果顯示：各試驗組較對照組脾臟生長發育加快， 42日齡I-VI組較 對照組分別增加：65.2%、54.7%、72.1%、95.3%、4.6%和50.8%，方差 分析除V組外，其它各組均達到極顯著水平(F>F 0.01)；42日齡多元 線性回歸表明脾重與Zn、Vc、VE、BFA關系為 　　y=0.4492+0.0034X1+0.0044X2+0.0032X3+0.0008X4 (r=0.9673)，Zn、Vc、VE與脾重呈強正相關。 2.6 抗體水平變化結果及分析 各試驗組免疫后不同日齡ND抗體水平變化規律見表11、圖5 表11 不同日齡ND抗體水平 單位：格 14 I6 18 20 22 24 26 28 31 35 42 　 I 20.0 26.7 35.7 41.7 56.0 80.0 266.7 106.7 25.0 10.0 8.3 61.53 II 20.0 16.7 31.7 40.0 63.3 113.3 213.3 106.7 20.0 10.0 8.0 58.45 III 13.3 15.0 20.0 33.3 40.0 86.7 120.0 60.0 40.0 15.0 5.0 40.75 IV 50.0 11.7 16.7 23.3 53.3 66.7 80.0 53.3 20.0 11.7 6.0 35.89 V 30.0 8.3 16.7 16.7 33.3 60.0 80.0 80.0 20.0 10.0 7.5 35.7 VI 11.7 23.3 33.3 22.5 46.7 53.3 66.7 93.3 20.0 16.7 7.3 32.95 VII 11.7 16.7 26.7 23.3 23.3 33.3 40.0 16.7 15.0 4.0 2.8 19.41 圖4 不同日齡ND抗體水平折線圖 （可放大顯示） 　　由圖表可知，各試組與對照組比較， ND抗體水平上升快，高峰值高， 維持較高水平(ND>40)時間長， 10次測定ND抗體平均水平I-VI組 較對照組分別增加了217.o%、201.1%、109.8%、84.0%、69.7%和 84.8%；多重方差分析F=4.605(F>F 0.01)；差異極顯著；相關性檢驗 表明，VE、Vc、BFA與ND水平相關性最強，r分別為0.9211、o.9198 和0.9118，其次為Se、Zn， r分別為0.2569、0.1208。而多元線性回 歸方程計算，抗體平均值與Zn、Vc、VE、BFA關系式為： 　　　　　y=0.0541Xi+0.0039X2+o.1073X3+0.0755x4+19.4000 (r=0.9790)。 3． 討論 　　本試驗以蛋公雛增重、血紅蛋白、紅細胞、白細胞總數、各類白細胞 所占比例、免疫器官生長發育狀況，以及血清ND抗體水平變化為指標， 綜合研究了不同配方CoBFA對家禽生長及免疫功能的影響及作用機制。 CoBFA所含的幾種主要有效成分均對家禽生長及免疫力提高有促進 作用，而其作用機制又各有不同。 3.1．Zn 作為機體多種酶成分，參與胱氨酸和酸性粘多糖的合成代謝，對保持上皮完整，生物膜結構，防止其受氧化損害，保護機體免受病毒和細 菌侵害有重要意義，同時作為酶成分具有調節新陳代謝，促進生長功能。 試驗表明，缺Zn會使小白鼠、豬淋巴結、脾、胸腺重量下降20%-40%， 用2 g/kg和100 g/kg兩種日糧喂豬，其胸腺重相差15倍[3][4][5]。Moulder (1989)報導，使用0.8-2.0g/kg低Zn日糧喂小鼠，淋巴細胞數量顯著 下降，對抗原持異性增殖能力降低[6]。阮景軍(1994)亦獲得類似結果[7] Wamer(1987) 證實， Zn可使T淋巴細胞和自然殺菌(NK)細胞活 性上升[8][11]。 Wincharch(1993)又證實了這一現象[12]。程偉(1992) 報道，用幾倍NRC標準Zn日糧飼喂仔豬，其增重明顯，且可防治腸炎[10]。 大澤基保(1990)證實， Zn可在一定程度上提高B淋巴細胞數量，增加 抗體產生[9]。本試驗證實Zn與體重、白細胞數量，嗜中性白細胞數， ND抗 體水平的相關系數分別為0.8294、0.3498、0.2301、0.1208，表明其對 生長和免疫確實有效，但以促進生長和提高嗜中性白細胞數作用為主。 3.2 Se 作為GSH-PX成分，其免疫機制在于： 3.2.1 分解機體內ROOH、 H202等物質，防止其對生物膜破壞； 3.2.2 提高細胞內5 -羥二十碳四烷酸(5-HETE)和白細胞三烯B4 (LTB4)含量， 5-HETE和LTB4可抵消皮質酮對淋巴細胞增殖的抑制。 李素芬(1996)證實，雛雞飼喂高Se日糧，其胸腺法氏囊、脾重明顯增 加，淋巴細胞數量增多[17]。孫先忠(1986)則證實Se可防止淋巴器官變性， 提高白細胞殺菌能力，使血清中備解素、補體、溶菌酶顯著提高[18]。 Fineh (1989)發現Se可使外周淋巴細胞對PHA，刀豆蛋氨酸刺激轉化能力快 速、穩定[19]，從而提高機體對細菌和抗原的反應能力，產生抗體迅速，維 持時間長，將Se作為豬雞疫苗增效劑，可明顯提高抗體滴定度，降低強毒 攻擊死亡率，這一點已為Hayek、 Sevker等多人證實[20][21][22][23][24]。本實 驗證實， Se與生長，白細胞總數，嗜中性白細胞數， ND抗體水平相關系 數分別為0．8327、 0．4323、 0．0331， 0．2569，說明Se對促生長作用明 顯，而對免疫未表現出明顯作用，其原因可能是： Se提高免疫力在于其分 解過氧化物和抵消皮質酮，而VE可以防止過氧化物產生， Vc可羥化分解 皮質酮， VE、 Vc的大劑量添加，從而使Se的作用被弱化和掩蓋。 3．3 vc 對家禽抗應激，提高免疫力作用機制在于 3．3．1 Vc可以維持胸腺網狀細胞功能，促進其發育，提高白細胞和巨噬細胞 殺菌能力[14]。 Aspamar (1990 )向蛋雞日糧中加入50 IU/kg～ 100IU/kgVc，血液殺菌能力， β溶解酶活性，吞噬細胞吞噬能力明顯上升 [40]。 Rogon(1994)、周明(1990)、乏慶偉(1989)等也分別在雞、對蝦上獲 得類似結論[52][55]。 3．3．2 Vc的另一個重要作用是羥化分解家禽機體應激狀態下產生的皮質 酮，皮質酮作為一種免疫抑制劑和細胞毒素，會降低機體免疫力[50]，實驗 證實，日糧中加入高劑量Vc，可使雞抗綿羊紅細胞和流產布氏桿菌凝集反 應明顯增加，王慶偉(1989)向對蝦料中加人Vc( 100 mg/kg-200 mg/kg)，對蝦血清IgG、IgM、 IgA含量顯著提高 (p<0．01)[55]。 3.3.3 Vc羥化賴氨酸促其轉化成膠原纖維，促進傷口愈合[53]．本實驗證 實， Vc與紅細胞、血紅蛋白、正相關，從而提高雛雞生長速度；對胸腺發 育呈強烈促進作用，提高淋巴細胞數和ND抗體水平 (r=0.91981)；這 與他人所獲結論一致。 3.4 VE作為免疫佐劑，其作用機制在于 3.4.1 拮抗H202、，亞硝基化合物，從而提高血液嗜中性白細胞和巨噬細 胞活性，達到提高家禽抗病力效果，程玉冰(1992)向雛雞日糧中加入 150mg/kg-300mg/kgVE，其感染大腸桿菌死亡率下降到37.2%-21.6%， 增重提高 10.2%- 11.6%[41]。 Pichard(1994)[44]、 楊麗萍 (1996)[42]Rice(1988)[49]、Politis(1993)[40]在雞牛上也獲得類似結果。 3.4.2 VE可促進免疫器官發育， Kohler(1985)、賀英(1996)證實，VE可 使脾指數增加，脾臟鞘動脈網狀內皮系統中巨噬細胞增加[43][48]。 3.4.3 VE對體液免疫作用機制在于提高T淋巴細胞數量，特別是輔助T淋 巴細胞數量，從而使機體Ig合成增加[45]。楊麗萍(1994)報導，向接種 ND的雞日糧加入300 mg/kgVE，可使抗體滴定度維持10天以上[42]。 Bonnette(1987)[39]、郭芳彬(1997)[45]、 Richard(1994)[46]、沈詠舟 (1996)[47]、文杰(1996)[37]、Tengerdy(1973)[51]對豬雞試驗均有類似反 應。 Skpanda(1996)試驗用Se-VE合體作IBD疫苗佐劑， IBD抗體滴定度 顯著增加(p<0.01)[46]。本實驗測定分析發現，在復合BFA中， VE對 白細胞數、 ND抗體作用顯著，相關系數分別為0.6001、 0.921l，這與前 人一致而對嗜中性白細胞呈負相關(r=0.0169)，這說明， VE在日糧中 含量過高，可能會使體內一般吞噬細胞功能受到一定抑制，但作用不明顯， 而其特異性免疫作用明顯增加，使機體整體免疫力增加。 3．5 BFA為一種高分子活性有機酸制劑 它是有機物料經生物發酵而產生 的高分子聚合物，光譜分析表明它是一種多價酚型芳香族化合物，具有酚 基、烯醇基、胺基等，與自然界存在的黃腐酸具有相似的功能：可以殺菌 抗潰瘍、解毒、收斂，對機體網狀內皮系統具有顯著激活作用，誘導產生 干擾素，從而提高機體非特異性免疫能力[38]，具有提高陽離于交換能力， 絡合緩沖能力，吸附催化能力，可以吸附血小板，促進凝血，使傷口加速 愈合，防止病毒感染，此外由于黃腐酸特殊分子結構，可抑制乙酰苯肼 (APH)生成， APH為脂質過氧化物的誘導劑[28][29]。試驗證實，黃腐酸 可促進脾重增加，提高嗜中性白細胞數量，淋巴細胞轉化率，從而可以抵 抗防治病毒、細菌的感染[31][34][36]。黃仁錄(1996)向肉仔雞料中加入 BFA， 21日齡增重提高9.75%-15.63%，球蟲卵顯著下降[38]。谷子林 (1996)對蛋雞試驗證明， BFA可使ND爆發雞群20天產蛋率由34%恢復 到80%，而對照組只達到61.920%[34]．本實驗通過對結果通徑分析表明， BFA的確可明顯提高白細胞(r=0.6838) 特別是嗜中性白細胞數(r= 0．3937)及ND抗體水平 (r=0.9118)。 　　總之，由于Zn、Se、Vc、VE、BFA或對家禽生長,或對免疫提 高有促進作用，但各自作用機制不同，作用方面相互補充，使四種不同配 方復合BFA試驗組與單獨BFA及對照組比較，生長速度及免疫力均有不 同程度增加。 　　各指標間關系通過分析可知： 　　(1)血紅蛋白量與體重呈強相關r=0.6003(t>t 0.01)，與脾生 長發育呈強相關r=0.6270(t>t0.01)。脾重(以42日齡為標準)與Zn、 Vc、VE、BFA關系為 　　y=0.4492+0.0034X1+0.0014X2+0.0032X3+0.0008X4 即主要由Zn、 VE對脾生長起作用；這表明：由于Zn、VE等物質促進脾 臟發育加快，提高其對紅細胞修復作用及免疫功能，從而達到促生長效果， 這與前人結論一致。 　　(2)法氏囊為家禽特有免疫器官，不同試驗組法氏囊發育均較對照 組快，差異極顯著。法氏囊(42日齡)與Zn、Vc、VE、BFA關系為 　　y=1.9440+0.0006Xl+0.0072X2+13.0060X3+0.0004X4 可見法氏囊量與Vc、 VE含量變化強相關。 　　(3) ND抗體作為家禽特有的抗體， 可在一定程度上反映家禽體 液免疫水平高低。本試驗各組在免疫前抗體水平均較對照組高， 免疫后應 答迅速，滴定度水平高，維持時間長(ND>40)I-VI組分別為8、8、 8、6、4、6天，而VII組只有2天；抗體由淋巴細胞形成，分析表明淋 巴細胞與抗體水平呈強相關， r=0.9301(t>t 0.01)；而脾、胸腺、法 氏囊與抗體水平(26日齡測定)線性方程為 　　y=724.60X1+815.49X2+250.32X3+290.2l (r=0.9933)； 胸腺、法氏囊重與ND抗體水平分別呈顯著(t>t 0．05)， 極顯著(t>t 0.01)相關，相關系數分別為0.565、0.5836；這說明，ND 抗體水平由淋巴細胞多少決定，而淋巴細胞增加主要由Zn、Vc、VE促 進胸腺、法氏囊增加造成。 4． 結論： 4．1 不同配方CoBFA均可提高家禽生長速度及機體綜合免疫力，在生產 中具有廣泛應用前景。 4．2 CoBFA通過促進脾發育，提高血紅蛋白量，加快生長速度。 4．3 CoBFA通過促進胸腺、法氏囊發育，提高機體綜合免疫力，特別是體 液免疫力。 4．4 綜合考慮增重效果、白細胞數及抗體滴定度維持時間 (ND抗體> 40)，認為III組效果最佳。

朱良

研究生的論文，似乎對大家用處不是很大。 只是了解一下當前的研究動態而已。 不過，還是謝謝樓主了！