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關于自家苗的制作!請大家進來提一提意見。還希望各位大蝦能教教我WSM要這么做!

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樓主
發表于 2008-2-16 00:15:24 | 只看該作者 回帖獎勵 |倒序瀏覽 |閱讀模式
很多時候,知道了要如何去做,卻不知道這其中道理;是一件很痛苦的事情!現整理出來  其中還有很多不完整的。期望進來的人,能留下點真經!
                                     關于自家苗的制作

1取病料
       取患病新死亡,有典型癥狀并且是沒有用抗生素治療過的的仔豬,用解剖刀取肺臟、脾臟、淋巴結等諸多器官;不同的病采用的組織是有區別,各種病原對組織的嗜好是不一樣的,藍耳病病毒在肺部含量較多,而豬瘟病毒因其嗜內皮細胞的特性,使其在腎臟和免疫器官含量較多。如果把病豬所有內臟一起搗碎制苗,各種抗原都將被稀釋,很難達到有效免疫的抗原量。
PS:本步驟的要點是1、病料要新鮮的,防止細菌毒素的產生。如果不能及時做,凍在-20度(盡量底溫處)保存。2、病料要采集病變明顯的,保證疫苗的效果。。
2制作
      將病料剁碎(除去結締組織,筋膜,氣管及較粗的支氣管,但一定要取出肺門淋巴結)將采集的病料稱重,加適量生理鹽水,用消毒好的組織勻漿機,絞3-5min,致勻漿狀,搗碎機高速運轉,溫度上升很快,夏天溫度高時,容器中的病料很容易超過40 ℃,使蛋白質發生變性,破壞病原的免疫源性。故夏天制苗時,病料加入搗碎機中的生理鹽水和用于水浴冷卻病料的冷水,都應預先在冰箱中經過冷凍),裝盆標記場名放入冰箱凍溶。對于新采取的病料反復凍溶三次。,過濾是將病料中有用的部份濾出,是一個關鍵環節。解凍的病料與生理鹽水按1Kg:3500-4000ml的比例進行稀釋調兌。再用雙層無菌醫用紗布過濾,然后將過了兩層紗布的濾液過一次八層再過一次十二層紗布。
最后加入甲醛, 以甲醛溶液為例,需氧細菌滅活需要的濃度為0.1%~0.2%,厭氧細菌滅活需要的濃度為0.4%~0.5%,病毒滅活需要的濃度為0.05%~0.4%,而且,豬瘟病毒用甲醛溶液滅活效果不理想。所以制作不同的疫苗,對滅活劑的種類和滅活劑的濃度要求是不一樣的.使甲醛純液在溶液中最終濃度達到0.3-0.4%,甲醛濃度不能高了。一小時搖均后,置37℃條件下滅活;滅活時間不能太短。滅活期間,每4—6小時搖動一次約半小時,48小時后滅活完畢,分裝前按1500UI/ml比例加入雙抗(青霉素和鏈霉素),還要加一定量的黃芪多糖,增加豬只抗體的生成。于滅活液中并搖勻,再移至分裝間用虹吸法進行無菌分裝。取出置于4℃下,保存待用。這樣注射下去豬就不容易產生過敏反應 PS:本步驟主要在于無菌操作,和滅活完全。
3試驗
      在投入使用前,對自制的自家組織苗,進行安全性和免疫效果的生物學試驗。包括在添加完甲醛后滅活24H時分別進行小白鼠腹部注射2ml,觀察24小時;和鏡檢細菌數量。在全場注射之前先用一兩窩豬仔作一下試驗,觀察兩天,看有沒發生過敏、或注部位發生炎。如果沒有什么反應,就可以全場鋪開。
4使用
        大豬可以用3ml,小豬1.5ml,種公豬6ml,間隔兩周免疫兩次。幼豬出生4-7天首次免疫,過7天進行二免。 母豬產前4 周注射4毫升/頭。


      自家苗效果如何?重要的是發病的豬盡量杜絕用抗生素,目前所做的自家滅活苗也沒有什么辦法去測定其中的病原含量,所以是盲目的。跟所取的組織是不是典型病變部位,制作過程等有很大的關系。
      自家苗的效果在發病最厲害的時候所取病料制成的苗效果最好,自家苗用下去后,病情得到控制,沒用了典型病變病變組織,所以效果會變差
細菌的結構更加復雜,產生抗原的蛋白質種類更多,自家苗效果不很穩定。
      自家苗本身就是滅活苗,無論細菌還是病毒都大多已經被殺死,因此,只要是經過嚴格的工藝,將病原體殺滅,自家苗就是基本安全的,即使起不到好的作用,也不會引發疾病。
      如果取病料的豬是幾種病混合感染的,那用這病料制成的自家苗抗原的劑量符合要求基本上就可以能免疫這幾種病!最好是選擇細菌性疾病作苗,雖然細菌滅活,但細菌本身的抗原決定簇仍然存在;免疫后,會刺激機體產生相應的抗體,如果疫苗不起作用的話我們可以用藥物去控制或消滅它!另外,對于有多種血清型的細菌,制備的自家苗相對效果還會比較好!病不很復雜,控制的好的豬場,按正規免疫到位,效果是最好的了!!!   
        自家苗可以用,但是必須有條件的,就是豬場病非常的多,比較厲害的情況下來用,不要動輒就用自家苗,那樣風險會很大.自家苗不是疾病的救命稻草!當心飲鴆止渴!
       通過培養細菌來做自家苗,可以克服不少弊端》》》》!!!!!!


[ 本帖最后由 消散了的魂 于 2008-2-16 17:18 編輯 ]
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沙發
 樓主| 發表于 2008-2-16 00:18:00 | 只看該作者
沙發先。。。 。。。





提幾個問題

1 :通過培養細菌來做自家苗   如何操作?區別在哪里?
2 :關于純甲醛濃度   ?我實際操作中是0.35%左右  卻有人說4%?  點解!
3 :關于滅活溫度 和滅活時間長度?   有人說24小時就能滅活?   點解!
4 :關于雙抗的藥物    能否換成啊奇酶素之類的,如果可以;有哪些能用,用量如何?   點解!
5 :關于鏡檢   能使用幾種方法;推薦用哪幾種。用啥標準檢驗?
5 :關于小白鼠活體實驗 的原理!
6 :如何預估,只是預估病原含量?


期盼能得到大家的回復

















                感謝每位到過這里的帥哥和美女      

                                             













新年快樂








謝謝三樓的... ...我還有幾點不明.
1.比如...能否多點資料?比如擴繁后滅活...這其中的操作過程! 點解
2.涉及到佐劑的問題!我以前的制作過程中確實沒有添加!  不知道以后會不會!心里沒底!
3.如果...細菌擴繁后后藥物滅活呢?不是甲醛,這樣的做法...到底在特色情況下可行不?
4.有人提出尋找臨床癥狀疑似PCV3感染的病豬,豬舍豬喘氣病疫苗,加重PCV2病變,該方法能從某種程度上幫助解決典型病料的問題。可行否?

[ 本帖最后由 消散了的魂 于 2008-2-16 14:52 編輯 ]
板凳
發表于 2008-2-16 10:11:25 | 只看該作者
1 :通過培養細菌來做自家苗   如何操作?區別在哪里?

一個是通過培養擴繁后滅活制作;一個是直接搗碎組織滅活制作;
2 :關于純甲醛濃度   ?我實際操作中是0.35%左右  卻有人說4%?  點解!

我用到了0.45%,有的人還用到了0.6%。我想純甲醛濃度的濃度對免疫效果應該起到關鍵性的作用;
請有實踐經驗的人解析?
3 :關于滅活溫度 和滅活時間長度?   有人說24小時就能滅活?   點解!

我想滅活選擇在37攝氏度是使細菌在其繁殖的溫度下被充分的滅活,時間一般都是2-3天;
4 :關于雙抗的藥物    能否換成啊奇酶素之類的,如果可以;有哪些能用,用量如何?   點解!

雙抗的作用我覺得無非是對注射部位起到一定的消炎作用;添加量還沒達到保健的劑量;
5 :關于鏡檢   能使用幾種方法;推薦用哪幾種。用啥標準檢驗?

我覺得用鏡檢的方法還不如用培養基培養的方法簡便、使用、直觀!
5 :關于小白鼠活體實驗 的原理!

這個主要是看注射的應激大小及注射部位的吸收情況
6 :如何預估,只是預估病原含量?

這個主要看你的病料是否典型!

樓主的制作一直沒涉及到佐劑的問題?
樓主“如果取病料的豬是幾種病混合感染的,那用這病料制成的自家苗抗原的劑量符合要求基本上就可以能免疫這幾種病!”
每種病毒對滅活劑純甲醛濃度的要求是不一樣的,最好是病料的疾病相對單一典型!
地毯
發表于 2008-2-16 10:21:12 | 只看該作者
安全嗎?
5
發表于 2008-2-16 15:27:58 | 只看該作者
安全是相對的,危險是絕對的
6
 樓主| 發表于 2008-2-16 16:39:16 | 只看該作者
嚴重同意...  ....
質量第一...  ....
一切由天...  ....
7
發表于 2008-2-17 14:02:58 | 只看該作者
今有幸拜讀!        受益不少!
但樓主說一切由天...這我反對;這不應該是我們這些技術人員說的!
8
發表于 2008-2-27 21:51:30 | 只看該作者
我做過很多滅活苗啊。關于滴加甲醛的問題,我提這么一點建議:一定要慢慢滴加。當然有條件的可以用振蕩培養,那樣滅活更徹底。歡迎大家批評指正。
9
發表于 2008-3-5 23:30:05 | 只看該作者
張見識了 正考慮這個呢
10
發表于 2008-5-28 13:51:04 | 只看該作者
在自家苗的制做中,有人說甲醛濃度是4%,有人說甲醛純液最終濃度達到0.3-0.4%,甲醛濃度不能高了。請教各位老師,如果甲醛濃度高了有什么樣的后果,
    雙抗的作用我覺得無非是對注射部位起到一定的消炎作用;添加量還沒達到保健的劑量,每毫升加那么點雙抗能起消炎作用嗎 ,過路的老師請回答。
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