發(fā)酵豆粕各項指標檢測方法與標準

wlins · 發(fā)表于 2008-11-27 14:58:43

發(fā)酵豆粕各項指標檢測方法與標準
1、水份、粗蛋白、粗脂肪、粗纖維、灰份、鈣和磷的分析方法全部采用國標法。
2、總有機酸測定采用氫氧化鈉滴定的方法和乳酸測定采用氣象色譜。
3、pH的測定采用玻璃電極pHS-3C型pH計測定。
4、可溶蛋白的測定方法
5、小肽含量的測定
　　　　　　　　　　　水份的測定

水份測定直接參見國標
測定完水分后的樣品需要測定其中的總有機酸的含量，其數(shù)值為A，并計算有機酸的揮發(fā)量。
水份含量的計算時應當扣除這部分有機酸的揮發(fā)量，否則會出現(xiàn)水分超標現(xiàn)象。
　　　　　　　　　　　總有機酸檢測

試劑：NaOH標準溶液（鄰苯二甲酸氫鉀標定），酚酞指示劑
儀器:磁力攪拌器離心機
方法：
（1）取發(fā)酵后鮮樣品15g 置于150ml燒杯中加入溶于100ml去離子水，在磁力攪拌器上浸提30min。
（2）取部分浸提樣離心10min(3000r/min)。
（3）取上清液15ml, 加30ml去離子水稀釋（以消除底色的影響），加酚酞指示劑四滴，用0.1molNaOH標準溶液滴定，并記錄到終點消耗NaOH體積。（終點到溶液呈現(xiàn)粉紅）
計算
乳酸（％）＝N(NaOH)×V(NaOH) ×0.09008/15×115/15g
N(NaOH):NaOH標準溶液的濃度；
V(NaOH) ：消耗NaOH標準溶液體積；
0.09008：乳酸的毫克當量。
0.1mol氫氧化鈉的配制與標定
1、配制：稱取9.6g氫氧化鈉，溶于100ml水中，搖勻，注入聚乙烯容器中，密閉放置至溶液清亮。用塑料管虹吸5ml的上清液，注入2000ml無二氧化碳水中(將去離子水煮沸5分后冷卻)，搖勻。
2、標定
稱取0.67g于105~110℃烘至恒重的基準的鄰苯二甲酸氫鉀，準確至0.0001g，溶于50ml的無二氧化碳水中，加4滴酚酞指示劑（0.1％），用配制好的氫氧化鈉溶液滴定至溶液呈粉紅色，同時作空白試驗。
3、計算
氫氧化鈉標準溶液的濃度按下式計算
c（NaOH）=m/（V1-V2）×0.2042
式中       c（NaOH）——氫氧化鈉標準溶液之物質的量的濃度，mol/l；
               V1——滴定用鄰苯二甲酸氫鉀之用量，ml；
               V0——空白試驗氫氧化鈉溶液之用量，ml；
               m——鄰苯二甲氫鉀之質量，g；
   0.2042——與1.00ml氫氧化鈉標準液[c（NaOH）=1.000mol/l]相當?shù)囊钥吮硎镜泥彵蕉讱溻浿昧俊?br /> 0.1％酚酞指示劑的配制：稱取1.000克酚酞，溶解與100ml95％的試劑酒精中，混勻即得。
　　　　　　　　　　　乳酸測定

稱取樣品10g與50ml的燒杯中，移取30ml去離子水，在磁力攪拌器上攪拌30min，在3000r/min離心10min，取上清液利用氣相色譜或液相色譜測定乳酸含量?！　　　　　　　　　　?br /> pH的測定

稱取樣品10g與50ml的燒杯中，移取15ml去離子水，攪拌30min，用 pHS-3C型pH計測定溶液的pH值。
或者用精密pH試紙測試。
　　　　　　　　　　可溶性蛋白的測定
根據(jù)AOCSBa11-65測定蛋白質溶解指數(shù)的方法
稱取20g樣品于300ml的勻漿杯中、量取50ml 37＋1℃的去離子水于勻漿杯中，將勻漿杯放在37℃的水浴中，浸泡攪拌5min，在內切式組織勻漿機上勻漿10min，從勻漿杯中取出漿液移入600ml燒杯中，待漿液分層后，移出40ml上清液注入50ml離心管中，并在2700r/min的轉速下離心10min，移取15ml上清液于凱氏燒瓶中，測定上清液中蛋白質含量和樣品總蛋白含量，計算溶解可溶性蛋白質的數(shù)量。
　　　　　　　　　　小肽含量測定方法

三氯乙酸（TCA）法
三氯乙酸法的原理是利用大分子的蛋白質在TCA溶液中沉淀，除去酸不溶蛋白質，然后測定酸溶蛋白含量。國外大量資料表明在蛋白質酶水解的研究中測定水解度，通常在酶解液中加入TCA溶液，是為水解的大分子蛋白質沉淀，而與小分子的酸溶蛋白成分，即肽類和FAA離開，測定酸溶蛋白占總蛋白的含量，求得水解度，即酸溶蛋白占總蛋白的百分比。
粗蛋白≥50％    小肽（1000d以下）≥10％
乳酸≥3.5％    水分≤10％
鈣 0.5－0.54％總磷≥0.74％
/gm益生菌≥20億/克蛋白酶≥150
粗脂肪≤5.0％    粗纖維≤3.0％
無氮浸出物≤28％  粗灰分≤6.0％
豬消化能（kcal/kg）3980
豬代謝能（kcal/kg）3600
豬凈能（kcal/kg）2320
禽代謝能（kcal/kg）2570
魚消化能（kcal/kg）3200
奶牛凈能（kcal/kg）1090

項目
含量
天門冬氨酸Asp 5.42%
賴氨酸Lys       3.03%
蛋氨酸Met       0.65%
蘇氨酸Thr       2.05%
精氨酸Arg       3.50%
甘氨酸Gly       2.25%
絲氨酸Ser       2.43%
異亮氨酸Ile       2.21%
苯丙氨酸Phe       2.37%
纈氨酸Val       2.36%
組氨酸His       1.24%
谷氨酸Glu       9.84%
丙氨酸Ala       2.30%
脯氨酸Pro       2.04%
色氨酸Trp       0.50%
亮氨酸Leu       3.76%
發(fā)酵豆粕與普通豆粕、膨化豆粕比較

項目/種類	豆粕	膨化大豆	發(fā)酵豆粕
工藝	壓榨/浸提	熱加工	發(fā)酵、酶解
粗蛋白%	44	36	50
粗纖維%	6-7	5	5
粗灰分%	6.5	5	6
酸堿度	7.0	7.0	4.0-4.8
細胞壁破裂	沒有破壁	部分破壁	100%破壁
小分子蛋白含量%	11.0	9.0	22
胰蛋白酶抑制劑	5-10mg/Kg	5-20mg/Kg	1mg/Kg
脲酶mg/Kg	0.4	/	<0.02
棉子糖水蘇四糖	12-15	9-12	<0.05
大豆球蛋白ppm	高	高	<10
半球蛋白ppm	高	高	<1
外源凝集素ppm	100-300	100-300	<1
氣味	豆腥味	豆腥味	發(fā)酵香味
顆粒度	大顆粒	大顆粒	細粉
流散性	中等	不好	佳