仔豬在斷奶階段采食有機酸化劑對其胃腸道食糜的影響

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　　仔豬在斷奶階段采食有機酸化劑對其胃腸道食糜的影響

　　C. R. Risley等著

　　王 琤 韋華[1]， 徐 淑 玲2 譯

　　1.江西省獸藥飼料監(jiān)察所 南昌 330029

　　2.江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術學院南昌 330045

　　摘要：21日齡斷奶的仔豬(n=72)飼喂含20%粗蛋白質(zhì)的玉米-大豆粉型基礎日糧，其中添加1.5%延胡索酸或1.5%檸檬酸，并分別觀察斷奶后–2，0，3，7，14天胃、空腸、盲腸和結(jié)腸中pH值、氯離子濃度(Cl-)、游離脂肪酸含量和微生物區(qū)系數(shù)量。結(jié)果表明，除了飼喂延胡索酸后可使仔豬胃內(nèi)延胡索酸濃度增加外，飼喂有機酸對胃、空腸、盲腸和結(jié)腸中pH值、氯離子濃度(Cl-)、游離脂肪酸含量和微生物區(qū)系數(shù)量無顯著效果(p>0.10)。從斷奶–2到21天仔豬胃腸道酸度通常減少，Cl-濃度在這期間不存在相應的變化。除了斷奶后–2到3天仔豬胃內(nèi)厭氧菌的數(shù)量減少，日齡對厭氧菌的總數(shù)沒有影響。在仔豬斷奶后，腸道內(nèi)梭菌的數(shù)目通常減少。乳酸菌的數(shù)量在斷奶時最少，在斷奶后7天仔豬胃、空腸和結(jié)腸中乳酸菌的數(shù)目達到最大值，但是日齡對盲腸中乳酸菌的數(shù)量沒有影響。在斷奶后3到7天內(nèi)大腸桿菌的數(shù)量通常增加。腸道內(nèi)容物的測定受到斷奶后日齡的影響，但是不受采食的有機酸化劑的影響。
　　關鍵詞：仔豬，pH，有機酸，揮發(fā)性脂肪酸，微生物
　　前言
　　斷奶應激表現(xiàn)為生長發(fā)育遲緩，浪費飼料，并且3至4周齡的仔豬在斷奶后一周通常出現(xiàn)腹瀉癥狀(Tzipori等，1980;Barnett等，1989)。斷奶應激可能對仔豬的生產(chǎn)性能產(chǎn)生永久的危害，也可能與斷奶仔豬不能分泌充足的胃酸來降低胃內(nèi)pH值(Manners，1978)，消化玉米-大豆粉日糧(Kidder和Manners，1978)，抑制大腸桿菌的繁殖(Cranwell等，1976)有關。為提高斷奶階段仔豬的生長速率和飼料利用率可在教槽料中添加延胡索酸和或檸檬酸(Falkowski和Aherne，1984;Giesting和Easter，1985;Ridley，1990)。仔豬生產(chǎn)性能的提高與通過酸化劑降低胃內(nèi)pH值，改善腸道微生物區(qū)系有關(Scipioni等，1978;Burnell等，1988;Radecki等，1988)。
　　本試驗主要研究添加延胡索酸或檸檬酸的日糧在斷奶階段對仔豬胃腸道pH值變化、Cl-濃度、揮發(fā)性脂肪酸濃度和微生物區(qū)系數(shù)量的影響。
　　材料與方法
　　本研究包含4個試驗，每個試驗有18頭斷奶仔豬，分別測定添加有機酸對斷奶仔豬胃腸道pH值、Cl-濃度、揮發(fā)性脂肪酸濃度和微生物區(qū)系數(shù)量的影響。每個試驗中，在父系相同的六頭小母豬中隨機抽取三頭，隨機安排日糧處理和采集腸道內(nèi)容物樣品的時間。仔豬在21日齡斷奶。玉米-大豆粉型日糧含20%粗蛋白質(zhì)，符合或超過斷奶仔豬營養(yǎng)需要(NRC，1988)。日糧1不添加酸化劑，日糧2添加1.5%延胡索酸，日糧3添加1.5%檸檬酸(表1)。采樣時間是斷奶前2天和斷奶后0、3、7、14和21天。斷奶前2天采樣的仔豬在19日齡屠宰，斷奶當天采樣的仔豬在21日齡換欄，并在采食教槽料6小時后屠宰。
　　仔豬被獨立的飼養(yǎng)在金屬網(wǎng)床(0.6m×0.9m)中，室溫(Hinkle等，1978)和通風速率(Lubinus和MurpHy，1979)保持在適宜水平。仔豬可自由采食和飲水。
　　表1 日糧成分

項目	對照組日糧	添加延胡索酸的日糧	添加檸檬酸的日糧
玉米	64.20	62.50	62.50
大豆粉（CP：44%）	33.31	33.31	33.31
石粉	0.60	0.58	0.58
脫氟磷酸鹽	1.42	1.44	1.44
食鹽	0.30	0.30	0.30
礦物質(zhì)預混料	0.07	0.07	0.07
維生素預混料	0.25	0.25	0.25
硒預混料	0.05	0.05	0.05
延胡索酸或檸檬酸	—	1.50	1.50

　　胃腸道內(nèi)容物檢測 在采樣當天，仔豬在電擊致死后放血，立即沿中線把仔豬剖開取出內(nèi)臟，無菌隔離后，取出整個胃，1m空腸，整個盲腸和0.3m回腸(近直腸端)。采集每個部位的內(nèi)容物并攪拌均勻。然后，取2g內(nèi)容物于18ml去離子水中，混合并在電磁攪拌器上攪拌均勻。pH值和Cl-濃度必須在采樣后30min之內(nèi)使用適當?shù)碾姌O和標準進行測量。取1g消化道內(nèi)容物加入50%H2SO4酸化后依照Holdeman等(1977)的試驗操作測定揮發(fā)性脂肪酸(VFA)和非揮發(fā)性脂肪酸(NVA)濃度。
　　日糧pH值的測定 稱取20g日糧于250ml燒杯中加入100ml去離子水，混合物充分攪拌，邊攪拌邊用電極測定pH值，待pH值穩(wěn)定后紀錄(Radecki等，1988)。
　　微生物區(qū)系檢測 腸道內(nèi)容物用密封袋保存，并立即用CO2排空袋內(nèi)O2。腸道內(nèi)容物用生理鹽水反復沖洗(Holdeman等，1977)并接種平皿。測定總厭氧菌數(shù)量時，樣品反復沖洗后在裝有瘤胃液﹣葡萄糖瓊脂的培養(yǎng)基(Hodeman等，1977)和仔豬糞浸出物替代瘤胃液的培養(yǎng)基(Moore等，1987)的平皿上培養(yǎng)。平皿在37℃條件下培養(yǎng)5天。乳酸菌接種在番茄汁培養(yǎng)基(番茄汁培養(yǎng)基，#00.1-01-2，Difco 實驗室 ，Detroit，MI)上培養(yǎng)72小時后染色。梭狀菌接種在McClung培養(yǎng)基平皿加上10%含有10 Ig/L新酶素的雞蛋卵黃(McClung Toabe 培養(yǎng)基，#0947-01 and 蛋黃，#3347-72，Difco 實驗室;新霉素硫酸鹽，#N6386，Sigma 化學藥品，St.Louis，MO)并培養(yǎng)48小時。大腸桿菌接種在MacConkey培養(yǎng)基(MacConkey 培養(yǎng)基，#0075-05-5，Difco 實驗室)(試驗1和試驗2)或曙紅亞甲基藍培養(yǎng)基(曙紅亞甲基藍培養(yǎng)基，#0075-01-9，Difco 實驗室)(試驗3和試驗4)平皿培養(yǎng)72小時。
　　數(shù)據(jù)分析 數(shù)據(jù)通過SAS(1988)軟件進行回歸分析。以斷奶后–2天的數(shù)值作為基礎數(shù)值與斷奶后0，3，7，14和21天的數(shù)值進行非正交比較。斷奶后天數(shù)的線性，平方和立方的效果運用直交比較。微生物數(shù)量低于檢測水平(<每克食糜中含105微生物)的看作數(shù)據(jù)丟失。有機酸化劑對斷奶仔豬腸道內(nèi)容物pH值和Cl-濃度的影響見表2。
　　表2 有機酸化劑對斷奶仔豬腸道內(nèi)容物pH值和Cl-濃度的影響

項目ab	胃	空腸	盲腸	結(jié)腸
pH
對照組	4.07	6.76	6.36	7.06
延胡索酸組	3.87	6.42	6.16	6.69
檸檬酸組	3.82	6.69	6.19	6.93
SEM	0.189	0.106	0.101	0.082
平均數(shù)	3.92c	6.63d	6.24e	6.96f
Cl-濃度
對照組	0.144	0.131	0.033	0.016
延胡索酸組	0.088	0.128	0.031	0.016
檸檬酸組	0.118	0.111	0.038	0.018
SEM	0.014	0.020	0.005	0.003
平均數(shù)	0.107c	0.123c	0.034d	0.016d

　　a表中所有數(shù)值表示6個不同時間點的24個觀察值的平均值;b沒有采食日糧組與日糧與采樣時間互間差異顯著(P<0.10);c，d, e, f同行中平均數(shù)上角字母不同的差異顯著(P<0.05)。
　　結(jié)果
　　pH值和Cl-濃度 對照組日糧添加有機酸化劑后pH值顯著降低(P<0.001)，但添加有機酸化劑對腸道pH值影響不顯著(P>0.05)(表2)。胃內(nèi)容物pH值最低，接著是盲腸和空腸內(nèi)容物pH值，結(jié)腸內(nèi)容物pH值最高(P<0.05)。不同部位腸道內(nèi)容物中Cl-濃度不受日糧處理的影響(P>0.27)，但是胃和空腸內(nèi)容物高Cl-濃度到盲腸和結(jié)腸低Cl-濃度持續(xù)降低(P<0.05)。
　　表3 斷奶后天數(shù)對斷奶仔豬腸道內(nèi)容物pH值和Cl-濃度的影響a

項目a	胃	空腸	盲腸	結(jié)腸
pH
–2 d	4.82	6.58	6.79c	7.19c
0 d	3.98*	6.70	6.72	7.01
3 d	3.92**	6.79	6.36*	7.16
7 d	3.71***	6.80	6.05***	7.17
14 d	3.47﹡﹡	6.35	5.79***	6.76**
21 d	3.62***	6.54	5.73***	6.47***
SEM	0.267	0.150	0.143	0.116
Cl-濃度
–2 d	0.126	0.124	0.044	0.019
0 d	0.096	0.113	0.019	0.023
3 d	0.088	0.092	0.030	0.014
7 d	0.111	0.123	0.030	0.014
14 d	0.110	0.142	0.045	0.015
21 d	0.111	0.147	0.030	0.016
SEM	0.020	0.027	0.007	0.004

　　a非處理組和處理與采樣時間互間差異顯著(P<0.10);b表中所有數(shù)值表示不同日糧12個觀察值的平均值;*，**，***表示與﹣2天數(shù)值差異程度(P<0.05，<0.01，<0.001)
　　在胃內(nèi)，斷奶后胃內(nèi)容物酸度減少(P<0.05，0.01或0.001)，但是線性直交比較不顯著(表3)。斷奶后天數(shù)對空腸內(nèi)容物酸度的影響不顯著，但盲腸和結(jié)腸內(nèi)容物酸度隨斷奶后天數(shù)的增加而減少(P<0.001)。斷奶后天數(shù)對不同部位腸道Cl-濃度沒有影響(P<0.10)。
　　揮發(fā)性脂肪酸和非揮發(fā)性脂肪酸 胃腸道前段(胃和空腸)的揮發(fā)性脂肪酸比消化道后段(盲腸和結(jié)腸)的揮發(fā)性脂肪酸的含量要低，乙酸是最主要的揮發(fā)性脂肪酸在所有的檢測部位都能檢測到。
　　揮發(fā)性脂肪酸總量 在斷奶后胃(P<0.001)，空腸(P<0.05)，盲腸(P<0.05)和結(jié)腸(P<0.001)內(nèi)容物揮發(fā)性脂肪酸含量線性增加(表5)。胃內(nèi)容物中乙酸和丙酸的含量逐漸增加，直到斷奶后第三天逐漸穩(wěn)定。空腸內(nèi)容物中揮發(fā)性脂肪酸含量及變化與胃內(nèi)容物含量變化相似。盲腸內(nèi)容物中乙酸的含量穩(wěn)定，然而丙酸的含量隨著日齡逐漸增加(P<0.001)，丁酸的含量隨著日齡先減少后增加(P<0.01)。在結(jié)腸內(nèi)容物中乙酸，丙酸和丁酸的含量隨著日齡逐漸增加(P<0.001)。
　　仔豬采食含延胡索酸日糧與對照組日糧和含檸檬酸日糧相比，胃中非揮發(fā)性脂肪酸總量高于其他兩組(表6)。日糧處理對其它非揮發(fā)性脂肪酸沒有影響(P>0.10)。胃腸道后段食糜中乳酸含量較低(P<0.05)，但主要存在胃和空腸食糜中。除了延胡索酸外，在整個胃腸道后段中非揮發(fā)性脂肪酸總量通常與揮發(fā)性脂肪酸含量有關(表4和表6)。
　　表4 有機酸化劑對斷奶仔豬腸道內(nèi)容物揮發(fā)性脂肪酸含量(mEq/dL)的影響

項目b	胃	空腸	盲腸	結(jié)腸
合計c
對照組	78.3	38.2	285.7	292.5
延胡索酸組	83.8	28.2	368.0	295.8
檸檬酸組	61.8	53.6	335.8	290.8
SEM	8.69	10.30	26.82	29.46
平均數(shù)	74.6d	40.0d	329.8e	293.0e
乙酸
對照組	70.4	34.4	159.7	180.2
延胡索酸組	74.6	26.0	199.3	190.9
檸檬酸組	60.9	43.9	184.5	172.1
SEM	6.66	6.39	17.73	18.60
平均數(shù)	68.6d	34.8e	171.2f	181.1f
丙酸
對照組	4.0	0.4	75.7	58.4
延胡索酸組	4.6	0.9	90.7	55.6
檸檬酸組	2.9	3.8	78.7	62.2
SEM	1.60	2.20	6.66	7.11
平均數(shù)	3.8d	1.7d	81.7e	58.7f
丁酸
對照組	1.7	0.2	46.5	28.7
延胡索酸組	2.2	0.5	55.0	29.4
檸檬酸組	5.2	3.8	48.2	32.0
SEM	1.59	2.20	8.79	4.15
平均數(shù)	3.0d	1.5d	49.9e	30.0f

　　a非處理組和處理與采樣時間互間差異顯著(P<0.10);b表中所有數(shù)值表示6個不同時間點的24個觀察值的平均值;c揮發(fā)性脂肪酸總量包括蟻酸，異丁酸，異戊酸，戊酸，異己酸和己酸的含量。d,e,f同行中平均數(shù)上角字母不同的差異顯著(P<0.05)。
　　斷奶后胃內(nèi)容物中乳酸和琥珀酸的含量成平方下降(P<0.004)，延胡索酸的含量逐漸增加，但這僅僅出現(xiàn)在采食延胡索酸的仔豬。空腸食糜中乳酸的含量到斷奶當天降低到無法檢測到的水平后有增加的趨勢。因為在空腸食糜中乳酸和延胡索酸含量增加，非揮發(fā)性脂肪酸總量與斷奶后﹣2天含量相比，在斷奶后14天達到最大(P<0.05)。在斷奶后盲腸(P<0.05)和結(jié)腸(P<0.01)食糜中延胡索酸和非揮發(fā)性脂肪酸總量逐漸增加。
　　表5 斷奶后天數(shù)對斷奶仔豬腸道內(nèi)容物揮發(fā)性脂肪酸含量(mEq/dL)的影響

項目ab	胃	空腸	盲腸	結(jié)腸
合計
–2 d	5.7d	6.3e	296.6e	153.2d
0 d	2.6	2.4	287.2	139.6
3 d	81.5***	55.1﹡	294.2	264.9
7 d	112.4﹡***	63.6**	334.5	325.8**
14 d	128.4***	53.4*	412.6*	500.8***
21 d	118.9***	59.0*	353.8	373.8***
SEM	12.29	14.56	37.93	41.68
乙酸
–2 d	5.7d	6.3d	148.5	88.7d
0 d	1.8	2.4	165.2	85.2
3 d	84.2***	44.1**	198.4	185.1**
7 d	86.8***	45.8**	190.2	218.7***
14 d	116.3***	53.4**	195.3	282.8***
21 d	117.0***	56.6***	189.4	225.9***
SEM	9.41	9.04	25.07	26.31
丙酸
–2 d	NDf	ND	74.1d	29.5d
0 d	ND	ND	60.8	26.9
3 d	6.8	2.8	56.2	34.0
7 d	8.0	7.4	81.1	55.8
14 d	6.9	ND	122.4***	118.5***
21 d	1.4	ND	95.7	87.8***
SEM	2.26	1.16	9.42	10.08
丁酸
–2 d	ND	ND	57.5g	14.4d
0 d	0.3	ND	33.4	11.5
3 d	2.0	1.6	24.1	24.2
7 d	10.4**	7.6	54.2	29.4
14 d	5.1	ND	74.8	60.0***
21 d	0.5	ND	56.3	40.6**
SEM	2.25	3.11	12.43	5.87

　　a表中所有數(shù)值表示不同日糧12個觀察值的平均值;b非處理組和處理與采樣時間互間差異顯著(P<0.10);c揮發(fā)性脂肪酸總量包括蟻酸，異丁酸，異戊酸，戊酸，異己酸和己酸的含量。d斷奶后天數(shù)線性影響(P<0.001);e斷奶后天數(shù)線性影響(P<0.05);fND表示檢測不到(<0.1mEq/dL);g斷奶后天數(shù)立方次影響(P<0.01);*，**，***表示與﹣2天數(shù)值差異程度(P<0.05，<0.01，<0.001)。
　　表6有機酸化劑對斷奶仔豬腸道內(nèi)容物非游離脂肪酸含量(mEq/dL)的影響

項目a	胃	空腸	盲腸	結(jié)腸
合計
對照組	23.4	14.1	8.1	12.6
延胡索酸組	108.0***	30.8*	11.3	12.4
檸檬酸組	26.8	18.3	13.4	20.9
SEM	12.85	6.07	5.00	4.62
平均數(shù)	52.7b	21.1c	10.9c	15.3c
丙酮酸
對照組	NDd	ND	0.1	0.5
延胡索酸組	ND	ND	0.4	ND
檸檬酸組	ND	ND	0.1	6.0
SEM	ND	ND	0.19	2.50
平均數(shù)	ND	ND	0.2	2.2
乳酸
對照組	16.3	13.2	ND	0.2
延胡索酸組	7.6	10.7	ND	0.1
檸檬酸組	20.3	11.0	4.5	ND
SEM	5.82	4.03	2.59	0.13
平均數(shù)	14.7b	11.7b	1.5c	0.1c
延胡索酸
對照組	0.2	0.2	7.8	11.8
延胡索酸組	83.5***	18.7*	10.4	12.0
檸檬酸組	0.9	0.4	7.6	13.5
SEM	11.26	4.70	4.32	3.8
平均數(shù)	28.2b	6.4c	8.6c	12.4bc
琥珀酸
對照組	6.8	0.7	0.3	0.2
延胡索酸組	17.6	1.3	0.4	0.2
檸檬酸組	5.6	2.7	1.2	1.4
SEM	4.30	1.24	0.37	0.52
平均數(shù)	10.0b	1.6c	0.6c	0.6c

　　a表中所有數(shù)值表示6個不同時間點的24個觀察值的平均值;b,c同行中平均數(shù)上角字母不同的差異顯著(P<0.05);dND表示檢測不到(<0.1mEq/dL);*，***表示與對照組差異程度(P<0.05，<0.001)。
　　表7斷奶后天數(shù)對斷奶仔豬腸道內(nèi)容物非揮發(fā)性脂肪酸含量(mEq/dL)的影響

項目a	胃	空腸	盲腸	結(jié)腸
合計
–2 d	66.8	21.0	ND	0.6
0 d	12.3*	0.3	1.1	5.1
3 d	49.5	6.0	9.2	10.4**
7 d	36.0	22.5	20.9*	29.3**
14 d	74.1	53.2**	17.9	23.1**
21 d	77.7	23.3	16.4	23.4
SEM	18.17	8.58	7.07	6.53
丙酮酸
–2 d	NDb	ND	ND	ND
0 d	ND	ND	0.2	1.4
3 d	ND	ND	0.1	6.3
7 d	ND	ND	0.4	ND
14 d	ND	ND	0.6	2.3
21 d	ND	ND	ND	1.0
SEM	ND	ND	0.27	3.53
乳酸
–2 d	55.3	16.5	ND	0.3
0 d	10.2***	0.1*	ND	ND
3 d	5.0***	3.7	9.0	ND
7 d	12.1***	11.2	ND	ND
14 d	5.5***	29.0	ND	0.3
21 d	0.1	9.4	ND	ND
SEM	8.23	5.71	3.66	0.18
延胡索酸
–2 d	NDd	NDd	NDe	0.3d
0 d	ND	ND	ND	1.9
3 d	35.0	2.4	ND	0.6
7 d	1.7	1.0	19.6*	29.3***
14 d	56.3*	22.2*	15.5	19.9**
21 d	76.4***	13.1	16.4	22.4**
SEM	15.93	6.64	6.11	5.38
琥珀酸
–2 d	11.5c	4.5	ND	ND
0 d	3.4	0.2	0.9	1.7
3 d	9.5	ND	0.2	1.4
7 d	22.1	2.0	0.9	ND
14 d	12.2	2.0	1.7	0.5
21 d	1.2	0.7	ND	ND
SEM	6.08	1.76	0.53	0.73

　　a表中所有數(shù)值表示不同日糧12個觀察值的平均值;bND表示檢測不到(<0.1mEq/dL);c斷奶后天數(shù)二次方影響(P<0.004);d斷奶后天數(shù)線性影響(P<0.01);e斷奶后天數(shù)線性影響(P<0.05);*，**，***表示與﹣2天數(shù)值差異程度(P<0.05，<0.01，<0.001)。
　　微生物區(qū)系 在試驗1和試驗2中，大腸桿菌接種在MacConkey培養(yǎng)基上，然而這種培養(yǎng)基在試驗條件下不適合大腸桿菌的生長。所以，在試驗3和試驗4中，使用Levine eosin methylene blue培養(yǎng)基，適合大腸桿菌的生長，因此，試驗3和試驗4的數(shù)據(jù)列在表8和表9中。
　　表8 有機酸化劑對斷奶仔豬腸道內(nèi)容物中厭氧菌，乳酸菌，梭狀菌和大腸桿菌數(shù)量的影響a

項目a	胃	空腸	盲腸	結(jié)腸
厭氧菌總數(shù)c
對照組	8.4	8.3	10.6	10.8
延胡索酸組	8.5	8.5	10.8	11.0
檸檬酸組	8.8	8.6	10.7	11.0
SEM	0.16	0.16	0.06	0.08
平均數(shù)	8.6d	8.5d	10.7e	10.9e
乳酸菌c
對照組	7.6	7.4	809	8.9
延胡索酸組	7.7	7.6	9.0	9.0
檸檬酸組	8.0	7.9	9.2	9.2
SEM	0.18	0.22	0.16	0.16
平均數(shù)	7.7d	8.5d	9.1e	9.1e
梭狀菌f
對照組	5.8（0.33）g	4.9（0.52）	6.7（0.33）	6.4（0.30）
延胡索酸組	5.7（0.38）	5.6（0.27）	6.7（0.35）	6.6（0.35）
檸檬酸組	6.3（0.29）	5.7（0.27）	6.7（0.30）	6.7（0.35）
平均數(shù)	5.5de	5.3e	6.0d	6.0d
大腸桿菌h
對照組	5.4（0.25）	6.0（0.44）	7.0（0.28）	7.3（0.29）
延胡索酸組	6.0（0.45）	6.4（0.41）	7.0（0.31）	7.4（0.31）
檸檬酸組	6.0（0.38）	5.7（0.39）	6.8（0.29）	7.2（0.31）
平均數(shù)	5.3d	5.6d	6.9e	7.2e

　　a非處理組和處理與采樣時間互間差異顯著(P<0.10);b微生物區(qū)系數(shù)量表示每克食糜中微生物含量的對數(shù);c表中數(shù)值表示6個不同時間點的24個觀察值的平均值;d,e同行中平均數(shù)上角字母不同的差異顯著(P<0.05); f表中數(shù)值為9個觀察值的平均數(shù);g括號里的數(shù)是SEM;h表中數(shù)值為6個觀察值的平均數(shù)。
　　表9 斷奶后天數(shù)對斷奶仔豬腸道內(nèi)容物中厭氧菌，乳酸菌，梭壯菌和大腸桿菌數(shù)量的影響

項目a	胃	空腸	盲腸	結(jié)腸
厭氧菌總數(shù)c
–2 d	8.9d	8.7	10.8	11.0
0 d	8.1**	8.1	10.9	10.9
3 d	8.7	8.4	10.6	11.0
7 d	9.2	8.9	10.8	11.0
14 d	8.0**	8.5	10.6	10.9
21 d	8.4	8.3	10.6	10.8
SEM	0.23	0.22	0.09	0.11
乳酸菌c
–2 d	8.3e	8.2f	9.2	8.4e
0 d	7.3**	6.9**	9.0	9.0
3 d	7.6	7.1*	8.6	9.1*
7 d	8.2	8.4	9.4	9.4**
14 d	7.4*	7.8	9.3	9.4**
21 d	7.5*	7.4	8.8	9.2*
SEM	0.25	0.31	0.22	0.22
梭狀菌g
–2 d	6.5（0.34）	6.2（0.30）	7.6（0.31）	7.6（0.32）
0 d	5.6（0.37）	4.9**（0.35）	6.8（0.31）	6.9（0.30）
3 d	5.0**（0.39）	4.1**（0.47）	6.0**（0.34）	6.5*（0.38）
7 d	6.4（0.56）	6.4（0.51）	6.1**（0.44）	6.3**（0.35）
14 d	NDf	ND	ND	5.6*（0.96）
21 d	ND	ND	7.0（0.94）	ND
大腸桿菌h
–2 d	6.2（0.75）	5.3（0.87）	6.9（0.43）	7.3（0.46）
0 d	5.6（0.32）	6.0（0.42）	7.2（0.39）	7.5（0.41）
3 d	5.6（0.28）	6.5（0.36）	7.5（0.39）	8.0（0.41）
7 d	6.2（0.44）	6.2（0.42）	7.4（0.43）	7.0（0.41）
14 d	5.4（0.78）	5.3（0.89）	6.6（0.39）	7.3（0.41）
21 d	5.8（0.55）	6.2（0.85）	7.0（0.43）	6.7（0.46）

　　a非處理組和處理與采樣時間互間差異顯著(P<0.10);b微生物區(qū)系數(shù)量表示每克食糜中微生物含量的對數(shù);c表中所有數(shù)值表示不同日糧12個觀察值的平均值;d斷奶后天數(shù)的影響(P<0.004);e斷奶后天數(shù)的影響(P<0.05);f斷奶后天數(shù)的影響(P<0.01);g表中數(shù)值為9個觀察值的平均數(shù);h括號里的數(shù)是SEM;i斷奶后天數(shù)的影響(P<0.10);jND表示檢測不到(<每克食糜中含105微生物);k表中數(shù)值為6個觀察值的平均數(shù);*，**，***表示與﹣2天數(shù)值差異程度(P<0.05，<0.01，<0.001)。
　　厭氧菌總數(shù) 胃腸道前段食糜中乳酸菌數(shù)量和大腸桿菌數(shù)量高于胃腸道后段食糜(P<0.05)，然而胃腸道后段比空腸食糜中梭狀菌的數(shù)量多(表8)。日糧處理對不同部位胃腸道食糜中厭氧菌總量，乳酸菌(P<0.05)和大腸桿菌的數(shù)量沒有影響。
　　胃內(nèi)容物中厭氧菌總量在斷奶后6小時內(nèi)減少，然后逐漸增加(表9)，空腸食糜中厭氧菌數(shù)量無大的變化，在斷奶后–2到21天內(nèi)盲腸和結(jié)腸食糜中厭氧菌總數(shù)穩(wěn)定。由微小群落數(shù)量可表明，厭氧菌的數(shù)量在70%~105%微小群落數(shù)量范圍內(nèi)。
　　斷奶后天數(shù)對胃(P<0.04)，空腸(P<0.01)和結(jié)腸(P<0.04)食糜中乳酸菌數(shù)量影響顯著;而盲腸中乳酸菌的數(shù)量不受斷奶后日齡的影響(P>0.11)(表9)。胃中乳酸菌的數(shù)量從基礎數(shù)量一直減少，直到斷奶當天，然后數(shù)值增加直到斷奶后7天，接著在斷奶后7~14天乳酸菌的數(shù)量減少并低于基礎數(shù)值(P<0.05)。空腸中乳酸菌的數(shù)量變化與胃中乳酸菌變化相似，但是在斷奶后7~14天乳酸菌數(shù)量下降的幅度不明確。結(jié)腸中乳酸菌的數(shù)量從基礎數(shù)值增加直到斷奶后7天，然后穩(wěn)定在這一水平。
　　斷奶后天數(shù)對胃(P<0.05)，空腸(P<0.05)，結(jié)腸(P<0.05)和結(jié)腸(P<0.10)食糜中梭狀菌數(shù)量影響顯著(表9)。梭狀菌的數(shù)量在斷奶后﹣2~3天逐漸減少，然后在第7天數(shù)量增加，接著在斷奶后14~20天，所有腸道食糜中梭狀菌的數(shù)量減少到檢測限以下(<0.1mEq/dL)。在所有腸道食糜中，日糧處理對梭狀菌的數(shù)量沒有影響(P>0.10)。
　　由于培養(yǎng)基數(shù)量有限，故試驗3沒有接種梭狀菌進行培養(yǎng)。
　　試驗發(fā)現(xiàn)，斷奶后天數(shù)對大腸桿菌數(shù)量的影響不顯著，但是在所有腸道食糜中大腸桿菌的數(shù)量變化相同。大腸桿菌的數(shù)量在斷奶后3天或7天達到最大值，然后逐漸減少直到斷奶后21天。在所有腸道食糜中，日糧處理對大腸桿菌的數(shù)量沒有影響(P>0.40)。
　　討論
　　pH值和Cl-濃度 當日糧中含有有機酸化劑時，斷奶仔豬平均日增重和飼料報酬增加(Falkowski and，1984;Giesting and Easter，1985;Risley，1990)。但是在斷奶后21天，仔豬生產(chǎn)性能沒有提高。假設先前報道胃腸道酸度的增加是提高仔豬生產(chǎn)性能直接原因，并且有機酸化劑可改善腸道微生物菌群(Scipioni等，1978;Burnell等，1988)。
　　Scipioni等(1978)報道斷奶仔豬采食含有1.0%檸檬酸日糧后，胃和空腸pH下降程度不明顯，分別由4.55和6.57下降到3.50到6.43。Burnell等(1988)也報道，7周齡斷奶仔豬采食含1.0%檸檬酸鈉的教槽料后，小腸pH下降程度不明顯，由6.76下降到6.19。所有觀察組都使用含有乳清粉的復合日糧，與不含乳清粉的日糧相比，乳清粉可使日糧pH降低。試驗也發(fā)現(xiàn)，在簡單日糧組，仔豬采食含1.5%的延胡索酸或檸檬酸日糧后，胃和空腸pH下降不明顯(表2)，與Scipioni等(1978)和Burnell等(1988)報道相同。試驗數(shù)據(jù)表明，教槽料中添加有機酸化劑不能充分降低仔豬腸道pH，因此，有機酸化劑不是腸道pH降低的主要原因。
　　有機酸化劑促進HCl分泌。胃食糜中Cl-濃度從斷奶當天的低值增加到斷奶后21天的高值。然而Cl-濃度在斷奶后7~21天固定不變，這并不表明胃中酸度的增加。因此，Cl-濃度并不能反映胃中HCl的濃度(表3)。
　　揮發(fā)性脂肪酸和非揮發(fā)性脂肪酸 日糧處理對揮發(fā)性脂肪酸沒有影響表明有機酸化劑不能充分的改善腸道微生物區(qū)系和微生物的新陳代謝(Varel 和Pond，1985)。然而，仔豬采食含延胡索酸的日糧后，胃內(nèi)琥珀酸含量的增加可能對改善微生物新陳代謝有部分作用。日糧處理對揮發(fā)性脂肪酸沒有影響，與Risley(1990)報道相同，Risley發(fā)現(xiàn)有機酸化劑對仔豬生產(chǎn)性能的影響與改變腸道微生物區(qū)系沒有關系。
　　從胃腸道前端到胃腸道后端非揮發(fā)性脂肪酸含量下降。仔豬采食含含延胡索酸日糧后腸道內(nèi)非揮發(fā)性脂肪酸含量的顯著降低，表明延胡索酸可能被仔豬直接吸收或被腸道微生物利用。如果延胡索酸被直接吸收，非揮發(fā)性脂肪酸可成為額外的能量來源。Kirchgessner 和 Ploth(1982)報道，延胡索酸可作為能量來源和葡萄糖發(fā)揮相同的效果。由于斷奶仔豬機體能量缺乏并且斷奶日糧的采食量不足，這種額外的能量可能對斷奶仔豬很重要(Fenten 等，1985)。這表明有機酸化劑可能是斷奶仔豬易被利用的能量來源。
　　在整個胃腸道中揮發(fā)性脂肪酸和非揮發(fā)性脂肪酸含量隨著采食量增加后有效發(fā)酵底物的增加而增加(Rerat 等，1987)。通常斷奶仔豬在剛斷奶后的一段時間采食量降低，到斷奶后7天仔豬的采食量增加(Fenten 等，1985)。試驗表明，斷奶仔豬斷奶后1天的采食量是12g，斷奶后2~3天的采食量是140g/d，斷奶后4~7天的采食量為231g/d(Ogunbameru 等)。由目前的研究可知，低采食量可從斷奶后1，3和7天仔豬胃內(nèi)容物的數(shù)量得到明顯的反映。低采食量可能是影響仔豬斷奶后一周內(nèi)生產(chǎn)性能較低的主要原因。
　　微生物區(qū)系 與Scipioni等(1978)研究表明，斷奶仔豬采食含檸檬酸日糧后，與厭氧菌總量和大腸桿菌數(shù)量減少的結(jié)論相比，本試驗添加有機酸化劑不是影響細菌數(shù)量的主要原因。研究結(jié)果的不同，可能是來源于使用不同的培養(yǎng)基;Spipioni等(1978)使用Violet Red Bile培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌和RCM(Oxoid)培養(yǎng)基和Gas﹣pak廣口瓶培養(yǎng)厭氧菌。本試驗則使用裝有曙紅亞甲基藍瓊脂培養(yǎng)基的Gas﹣pak廣口瓶培養(yǎng)大腸桿菌和裝有仔豬糞浸出物葡萄糖培養(yǎng)基的平皿培養(yǎng)厭氧菌。在試驗中日糧處理對腸道內(nèi)微生物區(qū)系沒有影響，這表明有機酸化劑對腸道微生物區(qū)系的影響較小。
　　在所有的腸道食糜中，厭氧菌的數(shù)量在斷奶后﹣2~3天減少然后到斷奶后7天厭氧菌數(shù)量增加。胃和空腸中細菌總數(shù)變化與仔豬采食量水平相一致。就如前面提到的，仔豬在斷奶后一段時間采食量低，這導致只有少量的食糜可供細菌生長(Morishita 和 Ogata，1970)。到斷奶后7天，采食量的增加可使更多的細菌得以生長。
　　在斷奶后14~21天，所有腸道食糜中梭狀菌的數(shù)量降低到檢測限以下。這種數(shù)量的減少可能是由于日糧由液體的豬乳(含有較高數(shù)量的梭狀菌)變?yōu)橛衩砖伌蠖狗坌腿占Z(含有少量的梭狀菌)。梭狀菌數(shù)量變化的生物學意義是值得懷疑的，因為梭狀菌的數(shù)量是整個腸道微生物數(shù)量的0.01%。
　　乳酸菌和大腸桿菌的數(shù)量不受日糧中添加有機酸化劑的影響。有機酸化劑被認為可起到降低胃腸道pH值和提供更適宜乳酸菌的環(huán)境的作用。消化道pH值低和大量乳酸菌將抑制大腸桿菌的增殖(Cranwell 等，1976)。在本試驗中，這些效果并沒有得到證實，可能是由于添加1.5%的有機酸化劑對腸道pH值和乳酸菌的數(shù)量變化沒有作用。
　　除了結(jié)腸，胃腸道內(nèi)乳酸菌的數(shù)量在斷奶后(0~3天)減少，然后在斷奶后7天增加。與此相同，大腸桿菌的數(shù)量在斷奶后3天后7天達到最大值。這些細菌通常被認為是有害菌。在斷奶后一周，乳酸菌的數(shù)量降低并且大腸桿菌的數(shù)量較大，導致仔豬腹瀉和生產(chǎn)性能低下。
　　小結(jié)
　　在斷奶仔豬日糧中添加有機酸化劑可降低日糧的pH值，但是不能改變消化道pH值、Cl-濃度和揮發(fā)性脂肪酸含量，并且不能改變腸道細菌數(shù)量。斷奶應激是仔豬一個較復雜的問題。低采食量和乳酸菌及大腸桿菌的數(shù)量變化是兩個可能的因素。
　　[1]王琤韋華，江西省獸藥飼料監(jiān)察所

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