中華人民共和國國家標準

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中華人民共和國國家標準

GB/T18651-2002

牛無漿體病快速凝集檢測方法


中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局發布

　　1范圍
本標準規定了牛無漿體病快速凝集檢測方法。
本標準適用于牛無漿體病的診斷。其他動物無漿體病的診斷亦可參照辦法。
　　2試劑和器械
　　2.1試劑
　　a）無漿體凝集抗原，4℃保存；
　　b）陰性協同血清（牛血清因子），-70℃"-80℃保存；
　　c）陽性對照血清，-20℃保存；
　　d）陰性對照血清，-20℃保存。
　　以上試劑由制標單位提供。
　　2.2器械
　　2.2.1微量移液器：5μL、10μL或5μL"25μL（連續可調）。
2.2.2微量移液器頭若干個。
　　2.2.3試驗用板：取85mm×12.5mm潔凈透明塑料平板，用油漆或油性記號筆劃成4排×6個區位。
　　3操作步驟
實驗應在25℃"28℃環境下進行。
　　3.1被檢血清按常規采集和分離，從采集到第一次檢測前，要在室溫放置38h"48h，然后冷藏或凍存備用，長期低溫保存會使陽性率下降。
　　3.2取出凝集抗原、陰性協同血清、陽性和陰性對照血清以及被檢血清，在25℃"28℃下放置15min"20min。
　　3.3同時在平板第一排左起1、2區位劃上陽性（ ）和陰性（-）符號，其余各區位依次編上被檢血清號。
　　3.4用微量移液器在編號區位內按號分別加陽性、陰性對照血清和待檢血清10μL。
　　3.5在各區位加凝集抗原5μL，靠近血清，互不接觸。
　　3.6在各區位抗原旁邊加陰性協同血清10μL，互不接觸。
　　3.7用牙簽將各區位的三種反應物攤成液面（約成人小指甲蓋面積），混合均勻。做一份血清換用一根牙簽。
　　3.8用手輕輕晃動該平板，在4min"8min內，當陽性對照血清開始出現凝集反應時，對著黑色背景判讀結果。
　　4判定標準
　　4.1陽性對照血清出現顆粒清晰的凝集現象。
　　4.2陰性對照血清沒有可辨認的任何凝集顆粒。
　　4.3被檢血清凡出現可辨認的凝集顆粒的凝集現象，均判為陽性反應。