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[養豬技術] 【原創】豬唾液用于疾病診斷的實用指南

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發表于 2016-8-12 11:19:53 | 只看該作者 |只看大圖 回帖獎勵 |倒序瀏覽 |閱讀模式

  一、唾液用于疾病診斷的常用方法

  1、疾病監控

  預后分析及唾液可用于動物疾病信號的監控,及評估豬群內的流行病原。預后分析

  并不是一種診斷程序,因此唾液也不能用作排除感染的依據。

  2、檢測抗體

  唾液樣品可用于檢測PRRSV抗體,血清學檢查不適合用于普遍存在的病原,如PCV2。

  3、檢測病原RNA/DNA

  唾液樣品還可用于檢測造成肺炎的病原,如豬肺炎支原體、PRRSV、SIV等,但這些病原在唾液中的存在并不一定與疾病相關。

  二、動物選擇

  1、感染者:選擇已表現出感染信號的動物

  2、無癥狀者:隨機選擇無癥狀的動物

  3、跟蹤感染時間:同一動物進行兩次取樣,兩次間隔2-4周

  4、檢查感染狀況:對不同年齡群的動物分別取樣(如4、8、12、16、20、24周齡)

  三、取樣數量

  由于缺乏對唾液樣品的診斷靈敏度的相關數據,最適樣品大小目前還沒有最終確定。樣品數量取決于觀察的單位,不能超過欄水平。

  下表1列出了不同發病率情況下的唾液取樣數,實際取樣數應等于或高于表中的數值。

  四、取樣前準備工作

  準備一條新的、干凈的、原色棉繩,直徑適合于豬場的大小和年齡。如斷奶仔豬為1cm,生長育肥豬可為2cm。禁止使用合成纖維繩,因為它們的吸收唾液的能力不及棉繩。

  繩子的長度取決于具體的固定的位置,如固定在天花板,則需要較長;如固定在欄壁,則長度較短。

  一條繩子足夠適用于10-15頭取樣豬。但是,如果欄舍內飼養豬只增加,則需增加取樣繩的數量。

  每欄使用一條新的棉繩。

  準備一些滅菌的試管(5-12mL)用于儲存收集到的唾液樣品,確保試驗無菌。

  取樣最好在豬只進食前或后的2小時執行,這樣可提高豬只對取樣繩的興趣,提高取樣效率。

  五、取樣技術

  1、固定取樣繩。在欄舍內選擇一個位置固定取樣繩,要保證欄內所有豬均可接觸到取

  樣繩。固定位置應干凈,遠離飲水和進食區。取樣繩的低端應與豬站立時嘴的高度相平。如果同欄內分配多個取樣繩,它們的位置應盡可能的分開。

  2、取樣繩放置時間為30min。如果發現試驗豬對取樣繩不夠活躍,可延長至1小時。

  3、小心取下取樣繩,注意不要接觸到地面。將取樣繩內的唾液擠至一個干凈的塑料袋或容器內。

  4、將上述塑料袋剪開一個小口,將里面的唾液轉移至準備好的無菌試管內。每個樣品至少需要2ml。

  5、收集后,如果發現試管內有明顯的雜質,如飼料等,則需用離心機對樣品進行純化。離心速度為2000x g,10分鐘。

  6、在試管上標明取樣欄舍、取樣豬場、取樣日期。

  六、樣品保存

  在將樣品送往試驗室前,可暫時先將樣品儲存于冰箱內,但必需在1天送往試驗室分析。如果不能,則應該將樣品保存于–20至–80°C冷庫。

  七、送檢

  在送檢前應確保你所選的試驗室具備唾液分析的能力。常規血液、組織的分析方法并不適用于唾液。另還需附上相關的信息,如獸醫姓名、豬場名稱、發票信息、所取樣品的動物種類和年齡、取樣日期、取樣數、樣品類型、檢測項目等。

譯者:戶啟蔚
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