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發表于 2006-9-13 08:14:45
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國家口蹄疫參考實驗室診斷檢疫技術簡介
（一）現有診斷檢疫技術（試劑盒）本實驗室經過多年的研究和實踐，建立了病毒分離、補體結合試驗（CFT）病毒中和試驗（VNT）、血清中和試驗等診斷方法，并形成了一套完善的診斷程序，符合國際通用的操作標準。同時發展了O型口蹄疫正向間接血凝診斷法，口蹄疫和豬水泡病反向間接血凝診斷法，瓊脂擴散試驗，以及口蹄疫VIA診斷和RT-PCR診斷試劑盒，滿足口蹄疫樣品的診斷和定型。近年來，本實驗室根據科學技術發展，結合國際組織推薦的口蹄疫診斷檢疫技術，研制出了多種試劑盒和檢測方法。1、O型口蹄疫液相阻斷ELISA診斷試劑盒液相阻斷ELISA是國際獸疫局（OIE）推薦的檢測口蹄疫病毒抗體的標準方法。用分離于我國的口蹄疫O型毒株研制出液相阻斷ELISA試劑盒，用于測定牛、豬、羊血清中針對O型口蹄疫病毒結構蛋白的抗體。本試劑盒主要用途，一是對進出口動物口蹄疫病毒抗體監測；二是監測口蹄疫疫苗免疫抗體，以評價動物群體抗感染能力。
2、口蹄疫病毒非結構蛋白抗體檢測試劑盒（3ABC-I-ELISA）
區分口蹄疫感染和免疫動物是國際活畜進出口貿易的必檢項目，也是OIE判定疫情國家和非疫情國家的依據。本試劑盒適用于活畜進出口調運、疫區凈化檢疫和群體無癥狀感染評價，檢測活畜血清中口蹄疫病毒非結構蛋白3ABC抗體，以區分感染和免疫動物。本試劑盒可測出牛感染后長達480天（16個月）的感染抗體，其多項技術指標已超過國外同類產品。
3、口蹄疫多重RT-PCR診斷試劑盒（FMD Multi RT-PCR）本試劑盒適用于病料診斷、反芻活畜和肉品等畜產品染毒檢測，特異性擴增病料、O/P液和肉品中的口蹄疫病毒基因片段，確認樣品供體是否染毒。本試劑盒含有三對引物，可擴增多個口蹄疫病毒基因片段，至少適用于口蹄疫O型、A型和AsiaⅠ型的三個血清型的檢測，可查出0.07LD50的病毒量。4、口蹄疫原位雜交檢測法原位雜交是借助核酸分子雜交的方法，在顯微鏡水平檢測和定位特異的核酸片段。本試劑盒設計的敏感性加強型原位雜交方法，定位急性期和持續感染組織中的口蹄疫病毒，適用于檢測牛、羊、豬和乳鼠等動物組織石蠟切片、冰凍切片以及細胞爬片。5、口蹄疫病毒蛋白原位檢測法
本試劑盒屬于組織化學（immunohistochemistry）方法，是利用抗原與抗體間特異性結合和標記技術，對組織和細胞內的特定抗原或抗體進行定位、定性、或定量檢測的技術。用于檢測檢測牛、羊、豬和乳鼠等動物組織石蠟切片、冰凍切片以及細胞爬片中感染的口蹄疫病毒。
（二）正在研制的診斷檢疫試劑盒
1、口蹄疫ELISA診斷定型試劑盒；2、口蹄疫診斷金標試紙條；3、口蹄疫RT-PCR-ELISA試劑盒；4、口蹄疫實時PCR（real-time PCR）診斷技術；注：進行口蹄疫病原診斷鑒定的任何樣品必須維持pH7.6-7.8的環境。
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發表于 2006-9-13 08:13:27
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